Предстерилизационная обработка это: Ошибка выполнения

Предстерилизационная обработка это: Ошибка выполнения

24.01.1993

Содержание

Дезинфекция и стерилизация в клинике Домостом

В нашей клинике все материалы, инструменты, средства дезинфекции гипоаллергенны, протестированы, сертифицированы и разрешены к использованию в Российской Федерации. На все материалы и инструменты, приборы в клинике «Домостом» есть и сертификаты и гарантии.

В клинике «Домостом» используются только одноразовые шприцы, маски, перчатки, шапки, подголовники, нагрудные салфетки, бахилы, слюноотсосы, стаканчики, расходные материалы (бинт, вата, абатменты, формирователи, щетки и насадки на лазер, чехлы на рентгенологический датчик и т.д.). Прочий инструментарий подвергается тщательной обработке, соответствующей санитарным нормам. На каждого пациента открывается стерильный индивидуальный набор с инструментами, комплект боров, эндо игл, наконечников и одноразовый защитный комплект для врача и ассистента (маски, шапки, перчатки, фартуки).

Обработкой инструментов занимаются специально обученные сотрудники клиники, которые имеют соответствующие сертификаты.

Предстерилизационная очистка инструментов

Все инструменты выдерживаются в дезинфицирующем 3% растворе «Аминаз Плюс 0,4%» в течение 15 минут с последующей механической обработкой. Боры, файлы, щетки и другие инструменты выдерживаются 30 минут в растворе «Деско Дрилль». Далее инструменты погружаются на 15 минут в ультразвуковую ванну — это гарантирует качество предстерилизационной очистки.

Контроль качества предстерилизационной очистки проводится путем постановки азопирамовых и фенолфтолеиновых проб. Чистый инструментарий упаковывается в индивидуальные крафт пакеты «Клини пак», «ПикПак», «Euronda», «Sigma». Стерильные пакеты вскрываются только на приеме врача при пациенте.

Каждые пол года растворы меняются «Аминаз Плюс 0,4%» на «БебиДез Ультра», «Деско Дриль» на «Ротасепт».

Стерилизация инструментов

Далее проводится стерилизация. Для стерилизации мы используем автоклавы:

  • «Tuttnauer» (Израиль) – автоматический автоклав;
  • Mocom – «Millenium B2» (Италия) – автоклав класса B, автоматический, с вакуумной сушкой и предварительным вакуумированием;
  • Euronda.

Для контроля качества паровых автоклавов используются химические индикаторы «Интест-П».

Дезинфекция в клинике Домостом

Дезинфекция поверхностей и пола в кабинетах проводится после каждого пациента. Для обработки поверхностей и слюноотсосных систем мы используем раствор «Аминаз Плюс 0,4%». Рабочий день завершается заключительной уборкой. По санитарным нормам и, в соответствие с СанПином, в нашей стоматологии ежемесячно (еженедельно) проводится генеральная уборка.

В «Домостом» вместо обычных кварцевых ламп установлены бактерицидные рециркуляторы нового поколения «Дезар-3».

Мы заботимся об экологии: утилизация медицинского мусора проводится в специальных контейнерах. Все документируется.

Ежедневно заполняется учетная документация.

Азопирамовая проба 🧪| Предстерилизационная очистка

Азопирамовая проба 🧪 это способ проверки качества предстерилизационной очистки (ПСО) инструментов. Мы проверяем, не остались ли на инструментах даже после дезинфекции и ПСО следы крови и биологических жидкостей.

Мы часто получаем вопросы: в каком случае необходимо проводить азопирамовую пробу? В том случае, если процедура связана с нарушением целостности кожного покрова. Вы должны производить все три этапа очистки инструмента: дезинфекция, ПСО, стерилизация.

Обычно это касается косметологов и мастеров ногтевого сервиса. Но если вы парикмахер и ножницами нечаянно поранили клиента, вы также должны провести все три этапа обработки инструмента.

Подробнее смотрите в нашем видеоролике 👇

СКОЛЬКО ИНСТРУМЕНТОВ ПРОВЕРЯТЬ

Контроль качества ПСО осуществляется ежедневно с каждой партии обрабатываемых инструментов. Отбирается 1% инструментов, но не менее 3 единиц. Например, если у вас одновременно происходит обработка 100 инструментов, вы должны поставить пробу на трех из них.

Для проведения пробы мы возьмем азопирам комплект. Его преимущества перед комплектом из сухих реагентов в том, что срок годности готового раствора составляет 1 месяц при комнатной температуре и 2 месяца в холодильнике. Для работы не нужно искать этиловый спирт, на который требуется разрешение и журнал расходования


ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРА АЗОПИРАМ

Смешиваем содержимое двух емкостей – это готовый, но еще не рабочий раствор азопирама.

Есть два варианта использования готового раствора.

  1. Нанести на чистую салфетку пипеткой три капли раствора азопирамовой пробы и три капли 3%-ой перекиси водорода.
  2. Смешать в отдельной емкости в равных пропорциях готовый раствор и перекись водорода – получится рабочий раствор. Срок его использования – не более часа.

ПРОВЕДЕНИЕ АЗОПИРАМОВОЙ ПРОБЫ

ВАЖНО! Инструменты должны быть чистые и сухие! Температура инструментов должна быть комнатной. Не допускается проведение пробы на горячих предметах.

Протираем салфеткой режущие элементы инструмента или те его части, которые контактируют с биологическими жидкостями или кровью.

Если инструмент имеет выемки или шероховатости (фрезы, ложка Уно, петля косметологическая), средство используется в виде капель. Для этого мы в равных долях смешаем азопирам с 3%-й перекисью водорода и наносим пипеткой 2-3 капли на инструмент. Это необходимо для того, чтобы раствор прошел по всем каналам и стыкам деталей инструмента.


ВРЕМЯ ПРОВЕДЕНИЯ АЗОПИРАМОВОЙ ПРОБЫ

1 минута. Не больше и не меньше. В течение этого времени раствору дают возможность стечь на чистую белую салфетку. Это условие одно из самых важных.

Результат, полученный через более длительное время, не считается действительным.


РЕЗУЛЬТАТЫ АЗОПИРАМОВОЙ ПРОБЫ


  • Фиолетовый цвет – ПСО проведена некачественно и на инструментах остались следы крови или биологической жидкости.
  • Бурый цвет – на инструментах есть ржавчина или хлорсодержащие окислители.
  • Розовый цвет – на инструментах есть остатки моющих средств.

Окрашивание, наступившее позже одной минуты после обработки, не учитывается при анализе результатов. В нашем примере на видео реактив не дал положительных результатов, поэтому считаем, что инструмент прошел ПСО, можно приступить к стерилизации.


ЖУРНАЛ ПСО

После проведения пробы остатки раствора необходимо удалить с инструмента независимо от результата. Для этого предметы нужно сполоснуть водой или протереть тампоном, смоченным водой, и снова просушить.

Важный момент! При длительном хранении готового раствора следует проверить его на пригодность. Для этого на кровяное пятно необходимо нанести 2-3 капли раствора. Если в течение минуты пятно окрашивается в фиолетовый цвет, то раствор пригоден к использованию.

Результаты всех проведенных проб фиксируются в специальном журнале учета качества предстерилизационной очистки. Его заполнение проверяет Роспотребнадзор во время проверки. Внимание! В журнал заносится только ОТРИЦАТЕЛЬНАЯ проба. О том, как заполнять журнал, вы можете прочитать здесь.

Если проба показала наличие загрязнений, вся партия инструментов должна пройти повторную обработку – дезинфекцию и ПСО, затем проба проводится повторно.

Источник: Компания «Чистовье»

Этапы предстерилизационной очистки. Дезинфекция изделий медицинского назначения

В медицинских учреждениях с целью недопущения распространения инфекции, а также в соответствии с санитарно-гигиеническими нормами проводится стерилизация всех инструментов. Перед этим сотрудниками младшего медицинского персонала выполняется предстерилизационная очистка изделий медицинского назначения. Рассмотрим, в чем она заключается, как выполняется.

Для чего нужна предстерилизационная очистка

Целью этой процедуры является устранение различных загрязнений и белковых частиц, которые остаются на инструментах в процессе выполнения различных медицинских вмешательств. Это необходимо для того, чтобы не допустить загрязнение и выход из строя оборудования.Также эта процедура нужна, чтобы обеспечить высокое качество стерилизации инструментов в автоклавах. Чтобы убрать все загрязнения, нужно совершить целый ряд действий.

Существуют строго прописанные в санитарных нормах этапы предстерилизационной очистки, последовательное выполнение которых за короткое время позволяет максимально удалить все белковые загрязнения.

Из каких этапов состоит процесс

Первым этапом обработки медицинских инструментов является их дезинфекция с последующей промывкой, чтобы убрать все следы обеззараживающего вещества. Стерилизация инструментов оказывается эффективной только в том случае, если их подготовка перед погружением в автоклав выполнена с соблюдением всех необходимых норм. Поэтому сотрудники (младший медперсонал) должны относиться к данной работе очень ответственно. В настоящее время выделяют следующие этапы предстерилизационной очистки:

  • Промывание после дезинфекции.
  • Замачивание.
  • Мытье в моющем растворе.
  • Споласкивание при помощи обычной проточной воды.
  • Споласкивание дистиллированной водой.
  • Сушка горячим воздухом.
  • Контроль качества.

Определить, насколько хорошо была выполнена обработка медицинских инструментов, помогают лабораторные пробы: азопирамивая и фенолфталеиновая. При этом первая позволяет выявить остатки крови на медицинской посуде, а вторая дает возможность выяснить, насколько качественно были смыты чистящие вещества.

Промывание и замачивание

После дезинфекции, выполняемой как химическими, так и физическими методами, приступают к промыванию медицинских изделий. На данном этапе предстерилизационной очистки добиваются полного устранения остатков и запаха дезинфицирующих веществ. Для этого медицинское оборудование помещают под проточную воду и промывают примерно 30 секунд.

Предстерилизационная очистка изделий медицинского назначения выполняется при помощи специальных моющих растворов, в которые все оборудование полностью погружается и выдерживается в интервале от 15 до 60 минут. Для этого часто используется смесь 6 % перекиси водорода, воды и синтетического моющего вещества.

Чтобы замачивание было максимально эффективным и приводило к нужному результату за короткое время, моющий раствор дополнительно нагревают до температуры от 40 до 50 градусов Цельчия. При замачивании медицинских инструментов особенно важно, чтобы все полости и каналы были полностью заполненными раствором. Для этого на очистку оборудование поступает только в разобранном виде.

Мытье

Все медицинские инструменты моются в тех растворах, в которых происходило их предварительное замачивание. Для этого применяются специальные щетки, ершики или заранее изготавливаемые ватные тампоны. На этом этапе предстерилизационной очистки обработке каждого инструмента или его составной детали уделяется по 30 секунд. При ручном способе не допускается использование ершиков для мытья устройств и приспособлений, в конструкции которых имеются хрупкие элементы из резины и других материалов.

Предстерилизационная обработка медицинских изделий в специальных моечных машинах является более предпочтительной по сравнению с ручным способом. Автоматические режимы стерилизации исключают возможность инфицирования персонала медучреждения, а также обеспечивают быструю и качественную очистку. Кроме того, при таком способе сокращается общее время нахождения инструментов в дезинфицирующих растворах. Весь процесс обработки становится гораздо менее трудоемким для персонала.

Споласкивание

Не менее важным является этап споласкивания инструментария. Необходимость в этом обусловлена применением большого количества обеззараживающих веществ в процессе мытья оборудования. На данном этапе предстерилизационной очистки важно максимально полно устранить остатки всех применяемых растворов с поверхностей медицинских инструментов.

Максимально эффективно и быстро справиться с этой задачей позволяет ополаскивание оборудования под проточной водой. В зависимости от того, какое именно дезинфицирующее средство применялось в процессе мытья, время, отводимое на споласкивание, может варьироваться от 30 секунд до 10 минут. После обработки инструментов под водой проточной их обязательно дополнительно ополаскивают и дистиллированной. Выполняют такую процедуру в течение непродолжительного времени. Это необходимо для того, чтобы в процессе сушки и стерилизации на поверхностях оборудования не оседали соли, которые всегда есть в обычной воде.

Просушивание

Современные автоклавы имеют такие режимы стерилизации, при которых достигается полное обеззараживание медицинских инструментов. Однако помещать их в агрегат с остатками воды нельзя. Поэтому дезинфекция изделий медицинского назначения обязательно также включает в себя просушивание.

Чтобы эта процедура не занимала много времени, проводят ее не на воздухе, а в специальных сушильных шкафах. В них размещают предварительно промытые медицинские инструменты и выдерживают при температуре 85 ºС до полного исчезновения влаги. Обработка горячим воздухом в сушильных шкафах существенно упрощает процесс медицинской предстерилизационной очистки, поскольку выполняется в автоматическом режиме. Это исключает необходимость в каких-либо действиях медицинского персонала.

Контроль качества

Чтобы определить, насколько качественно были выполнены все этапы предстерилизационной очистки, проводят азопирамовую и фенолфталеиновую пробы.

Азопирамивая проба предназначена для выявления неполного удаления загрязнений в виде крови с поверхностей медицинских инструментов. Для этого используется свежеприготовленный раствор изопирама. При его нанесении на поверхности, имеющие кровяные загрязнения, дает фиолетовое окрашивание.

Фенолфталеиновая проба выполняется для определения того, остались ли на поверхностях медицинских инструментов моющие и обеззараживающие средства. Если в результате этих двух исследований хоть одна проба даст положительный результат, всю процедуру очистки проводят повторно. Действия на каждом этапе нужно выполнять максимально качественно, ведь от этого зависит здоровье пациентов, а порой и их жизнь.

Мы рассказали, как проводится предстерилизационная очистка медицинского инструментария.

Безопасность — Многопрофильный медицинский центр Диомид

В медицинском центре «Диомид» забота о Вашем здоровье является одной из первичных задач каждого специалиста нашей клиники. Во время каждого приёма врач предпринимает все возможные меры предосторожности, соблюдая все санитарно-противоэпидемические требования и проводя дезинфекционные и стерилизационные мероприятия в соответствии с нормативными документами. Мы отвечаем за Вашу безопасность на каждом этапе своей работы:

1) Индивидуальная защита медицинского персонала.

Приём Пациентов ведётся всегда в защитной одежде. Наши доктора, ассистенты и медсестры работают с пациентами только в одноразовых масках и перчатках. Перед надеванием перчаток руки медицинского персонала подвергаются специальной обработке: тщательное мытье + обработка специальным дезинфицирующим спреем.

2) 100% дезинфекция многоразовых инструментов.

Обработке подлежат все (кроме одноразовых индивидуального использования) предметы медицинского назначения, которые контактируют с пациентом. Это проводится для подавления и ликвидации патогенных и условно-патогенных микроорганизмов – бактерий, вирусов, грибов.

3) Дезинфекция после каждого приема пациента.

После каждого приёма вся мебель, предметы медицинского назначения, находящиеся в зоне лечения, проходят полную дезинфекцию при помощи специализированных дезинфицирующих средств.

4) Современное оборудование.

В медицинском центре «Диомид» используются самые современные инструменты, отвечающие всем требованиям качества и безопасности.

5) Стерилизация.

Предстерилизационная обработка проводится с инструментарием, который использовался в операциях, то есть контактировал с ранами, кровью и другим биологическим материалом. Это предварительный шаг перед стерилизицией и проводится он для того, чтобы убрать остатки белка, жира, иные загрязнения и оставшиеся количества медицинских препаратов. Всё, что поддается стерилизации проходит данную стадию. Инструменты подлежат разборке и замачиванию в соответствующем растворе с полным погружением и заполнением всех пустот. Механическая очистка может проводиться либо вручную ёршиком, тампоном, марлей, или при машинной мойке. Поскольку от этого этапа зависит качество стерилизации, производится жесткий контроль очистки: ежедневно 1% разом обработанных инструментов отбирается и проводятся соответствующие исследования на наличие патогенных организмов. Если выявлено их наличие – вся полностью обработанная партия должна быть подвергнута повторной обработке. После этого можно приступать непосредственно к стерилизации. Она проводится также разными способами: физический (включает воздушный, инфракрасный, паровой, гласперленовый методы), химический (плазменный, жидкостный), газовый.

Результат стерилизации также подлежит усиленному контролю.

Стерилизация женщин: этические вопросы и соображения

Этическое консультирование включает в себя три широких аспекта: 1) содержание представляемой информации, 2) процесс передачи информации и 3) самоанализ со стороны акушера-гинеколога. Контент должен включать самую последнюю информацию о процедурах и альтернативах стерилизации (см. также Практический бюллетень № 121, Обратимая контрацепция длительного действия: имплантаты и внутриматочные спирали и Практический бюллетень №133, Преимущества и риски стерилизации ). Процесс консультирования должен быть непредвзятым, и врачи должны распознавать пациентов как людей с разными желаниями и приоритетами. Наконец, акушеры-гинекологи должны стремиться избегать привнесения в клиническую практику осознанных или бессознательных гендерных, расовых и классовых предубеждений в отношении того, кто должен стать матерью.

Содержание консультирования

Этическая обязанность акушеров-гинекологов состоит в том, чтобы гарантировать, что все пациенты понимают риски и преимущества стерилизации (включая возникающие неконтрацептивные преимущества, такие как возможное снижение риска рака) и что стерилизация должна считаться постоянной, хотя и с периодическими неудачами и сопутствующий риск внематочной беременности 33. Обратимые методы контрацепции длительного действия следует рассматривать в качестве дополнительных возможностей для женщин, которые завершили деторождение или никогда не хотят забеременеть 34, 35. Акушеры-гинекологи также должны информировать женщин о том, что стерилизация партнера-мужчины более эффективна и имеет меньший риск, чем стерилизация женщин. стерилизация. Следует обсудить факторы риска для более позднего запроса на реверсивную операцию, особенно молодой возраст и проблемы в браке или отношениях или другие значительные жизненные стрессоры на момент запроса.Выбор между различными методами, в конечном счете, зависит от предпочтений пациентки, а собственные приоритеты и жизненные обстоятельства женщины должны определять выбор противозачаточных средств. Следует уважать четко сформулированное стремление женщины к постоянному предотвращению будущих беременностей. Когда женщины выбирают стерилизацию, потому что их партнеры-мужчины не желают рассматривать вазэктомию, решение о стерилизации, хотя и самостоятельное, может быть результатом представлений о мужественности или других гендерных норм о том, кто несет ответственность за планирование семьи. Хотя акушеры-гинекологи могут чувствовать себя некомфортно из-за того, что они увековечивают несправедливые гендерные нормы, проводя стерилизацию женщин в таких ситуациях, это допустимо с этической точки зрения и в конечном итоге может представлять собой решение, оптимальное для женщины с учетом ее конкретных обстоятельств.

Акушеры-гинекологи также должны знать и иметь возможность обсуждать соответствующие законы или постановления, которые могут ограничивать предоставление услуг по стерилизации, такие как требования Medicaid к минимальному возрасту и периоду ожидания.Кроме того, акушеры-гинекологи должны знать, что некоторые пациентки могут иметь страховое покрытие, ограниченное беременностью и ближайшим послеродовым периодом, и могут иметь ограниченный доступ к стерилизации или другим вариантам контрацепции за пределами этого окна 14.

В заключение, при консультировании пациентов следует подчеркнуть постоянство стерилизации и включать информацию об обратимых альтернативах, особенно методах LARC, которые столь же эффективны, как и постоянная стерилизация. В соответствующих случаях стерилизация партнера-мужчины должна обсуждаться во время предстерилизационного консультирования пациента как вариант с меньшим риском и большей эффективностью, чем стерилизация женщины.При необходимости следует обсудить правовые или нормативные ограничения на стерилизацию.

Процесс консультирования

Процесс консультирования также имеет этические последствия. Цель консультирования по вопросам стерилизации — и консультирования в более широком смысле — состоит в том, чтобы принять подход, ориентированный на пациента, при котором решение принимается совместно пациенткой и лицом, осуществляющим за ней уход. Следует избегать патернализма, при котором врач подавляет автономию пациента, чтобы «защитить» его от последствий принятия ею собственного решения.

За последние несколько десятилетий в здравоохранении произошел переход от модели «врач знает лучше» к модели, в которой пациент находится в центре внимания и рассматривается как сотрудник и партнер при принятии решений в области здравоохранения 36. Этот переход к совместному подходу жизненно важен для обеспечения автономии пациента в принятии медицинских решений. Однако, когда пациенты рассматривают необратимое решение, такое как стерилизация, врач нередко чувствует защитный импульс, чтобы помочь пациенту избежать того, что было названо «сожалением о стерилизации».«Например, врачи могут колебаться в вопросе стерилизации молодых женщин, зная, что для большинства людей полное когнитивное созревание, включая способность включать долгосрочные цели в сложные процессы принятия решений, не достигается до середины 20-летнего возраста. 37. Когда молодые женщины, цветные женщины, незамужние женщины и женщины, испытывающие серьезные жизненные стрессы, просят о стерилизации, может возникнуть защитный импульс из-за знания о том, что женщины в этих демографических группах непропорционально стремятся получить информацию об обратном в более позднем возрасте.Кроме того, поскольку материнство остается прочно укоренившейся частью социокультурного определения женщины в современной американской жизни, выполнение просьб о стерилизации нерожавших женщин может быть трудным. В этих ситуациях, как и при любом консультировании по стерилизации, важно использовать методы LARC как одинаково эффективные и обратимые варианты.

Однако врачи должны признать, что пациенты обладают большим опытом в своей жизни и в том, что для них важно и значимо.Хотя устранить все риски сожаления невозможно, отказ в стерилизации тем, кто ее просит, происходит за счет ограничения способности женщин полностью выражать свою автономию в отношении того, когда и стоит ли забеременеть и родить ребенка. Биоэтики обычно считают, что устранение риска сожаления путем ограничения автономии пациента хуже, чем предоставление пациенту возможности сделать ошибочный выбор. Невозможно устранить сожаление, поскольку сам факт того, что человек является полностью автономным и способным принимать решения, несет в себе риск сожаления о принятом решении.Это явление получило название «достоинство риска» 38. Когда способность принимать решения ограничена врачом или учреждением, риск сожаления может быть уменьшен; тем не менее, устранение полномочий на принятие решений считается большим вредом, чем сожаление о принятии решения 38. В случае сомнения в целесообразности продолжения запрашиваемой стерилизации рекомендуется, чтобы врач ошибался в сторону уважения самостоятельности пациента в принятии решений и репродуктивной автономии.

Некоторые акушеры-гинекологи отказываются проводить процедуры стерилизации из-за своих личных религиозных убеждений или моральных ценностей.В таких случаях врач должен предоставить альтернативную форму контрацепции, которая в равной степени приемлема для пациентки, или направить пациентку к другому поставщику гинекологической помощи, как это должно быть в случае, когда требования совести препятствуют оказанию медицинской помощи. 39. Автономия женщины, которая добивается стерилизации, всегда следует уважать, даже перед лицом возражений по соображениям совести против ее просьбы.

И наоборот, принуждение или принуждение женщины каким-либо образом к стерилизации, которой она не желает, или в отношении которой она не уверена или не знает, всегда неприемлемо.В прошлом принуждение и принудительная стерилизация принимали различные формы, в том числе отказ в оказании других медицинских услуг для поощрения стерилизации, угрозы привлечь к работе систему защиты детей, если женщина не дает согласия на стерилизацию, или проведение стерилизации без ведома пациента в процессе. другого оперативного лечения. Эти и любые другие методы принудительной или насильственной стерилизации являются неэтичными и ни в коем случае не должны применяться.

Иногда на решение женщины о стерилизации могут повлиять внешние факторы.Например, женщина может потребовать стерилизации из-за давления со стороны партнера или из-за отсутствия у нее страховки или ресурсов для обратимых вариантов, которые она предпочитает. Опять же, тщательный диалог имеет первостепенное значение, и необходимо прояснить весь спектр желаний женщины в отношении построения семьи в долгосрочной перспективе. Если единственная причина для проведения стерилизации связана с такими факторами, как давление со стороны партнера, врачи должны усердно работать над решением проблем репродуктивного принуждения, включая потенциальные проблемы безопасности.Если финансовые ограничения приводят к запросу на стерилизацию, врачи должны работать с пациентами, чтобы найти недорогие обратимые варианты, если эти методы действительно приемлемы для пациента.

При условии, что консультирование проводилось в соответствии с изложенными здесь принципами, этически приемлемо проводить стерилизацию во время аборта, родов или другой репродуктивной заботы. Тем не менее, такие просьбы должны быть обсуждены до основной процедуры или мероприятия, в то время, когда пациентка способна принять обдуманное решение, оценить риски и преимущества стерилизации, подумать об альтернативных методах контрацепции и составить план на случай непредвиденных обстоятельств. акушерские или неонатальные осложнения или другие непредвиденные события.Следует избегать стерилизации, когда решение о стерилизации принимается во время родов или другой неотложной помощи, или когда острые события (например, разрыв матки) вызывают опасения, что деторождение в будущем нецелесообразно или небезопасно. Хотя могут быть редкие случаи, когда стерилизация оправдана, в таких ситуациях врачи обычно должны предлагать методы LARC и вернуться к вопросу о стерилизации позже. И наоборот, если плановую стерилизацию планируется провести во время кесарева сечения или сразу после родов, и возникают непредвиденные неонатальные осложнения, для которых план действий в чрезвычайных ситуациях не обсуждался заранее, решение следует пересмотреть и в качестве альтернативы предложить метод LARC. возможная альтернатива.

Таким образом, акушеры-гинекологи должны проводить предстерилизационное консультирование, включающее обсуждение репродуктивных желаний женщины и ставящее ее желания в центр внимания. Даже с учетом риска сожаления этически допустимо проводить требуемую стерилизацию нерожавших женщин и молодых женщин, не желающих иметь детей. Запрос на стерилизацию молодой женщины без детей не должен автоматически вызывать консультацию психиатра. Хотя врачи по понятным причинам не хотят вызывать сожаление о стерилизации у женщин, они также должны избегать патернализма.

Консультирование и самоанализ — пол, раса, класс и материнство

Социальные исследования показывают, что раса и социальный класс влияют на представление о том, кто должен быть матерью и какие качества делают ее «хорошей матерью». По этой причине акушеры-гинекологи должны учитывать роль предубеждений при консультировании и рекомендациях по уходу и избегать действий, основанных на предубеждениях в отношении расы, этнической принадлежности, социально-экономического статуса, сексуальной ориентации и материнства, которые могут, несмотря на самые лучшие намерения, повлиять на интерпретацию пациентов. запросы и влиять на оказание помощи.В случае стерилизации риск действовать на основе стереотипов или рассматривать женщин исключительно с точки зрения их «демографических характеристик» двойственен: в желаемой стерилизации может быть отказано, потому что женщина принадлежит к демографической группе, которая непропорционально ищет обратную информацию, исторически подвергалась виктимизации, или что, по мнению врача, должны иметь детей. Нежелательная стерилизация может быть проведена ненадлежащим образом на основании принадлежности к категории, для которой преобладают стереотипы «неконтролируемой фертильности» 40.Подход, ориентированный на пациента, который фокусируется на репродуктивных желаниях отдельной женщины, может смягчить некоторые из потенциально негативных последствий более широкого социального климата расового и классового неравенства, в котором осуществляется здравоохранение.

Лапароскопическая стерилизация

Обзор

Женские репродуктивные органы, вид спереди с зажимом, закрывающим фаллопиеву трубу.

Что такое лапароскопическая стерилизация?

Лапароскопическая стерилизация — это хирургическая процедура, обеспечивающая постоянный контроль над рождаемостью у женщин.Женская стерилизация включает закупорку или удаление фаллопиевых труб.

Фаллопиевы трубы находятся по обеим сторонам матки и простираются к яичникам. Они получают яйцеклетки из яичников и транспортируют их в матку. Как только фаллопиевы трубы закрыты или удалены, мужская сперма больше не может достичь яйцеклетки.

Лапароскопия позволяет врачу завершить перевязку или удаление маточных труб, сделав небольшой разрез возле пупка. Этот меньший разрез сокращает время восстановления после операции и риск осложнений.В большинстве случаев женщина может покинуть операционную в течение четырех часов после лапароскопии.

Готов ли я к стерилизации?

Женщина должна тщательно взвесить свое решение пройти стерилизацию путем лапароскопии. Хотя эта процедура была успешно отменена у некоторых женщин, она предназначена для необратимой потери фертильности.

Женщины, которые не уверены, хотят ли они еще иметь детей, должны выбрать обратимую форму контрацепции, такую ​​как противозачаточные таблетки, внутриматочную спираль (ВМС) или барьерный метод (например, диафрагму).Обсудите эти альтернативы со своим врачом.

Ваш партнер может также подумать о вазэктомии, методе мужской стерилизации, при котором перевязываются и перевязываются семявыносящие протоки — трубка, по которой транспортируется сперма.

Почему женщины выбирают лапароскопическую стерилизацию?

Для женщин, которые больше не хотят иметь детей, лапароскопическая стерилизация является безопасной и удобной формой контрацепции. После завершения дальнейших шагов для предотвращения беременности не требуется.

Однако лапароскопия может не подходить для некоторых женщин.В этих случаях перевязка или удаление маточных труб может быть выполнена путем лапаротомии, более обширной операции, которая требует большего разреза брюшной полости и дня или двух восстановления в больнице.

Наступит ли менопауза после лапароскопической стерилизации?

Перевязка или удаление маточных труб не изменяет менструальный цикл женщины и не вызывает менопаузу.

Детали процедуры

Виды лапароскопических операций по женской стерилизации.

Как проводится лапароскопическая стерилизация?

Внутривенный катетер (I.V.) будет вставлен в вену на вашей руке или предплечье. Вам дадут общий наркоз в I.V. для расслабления мышц и предотвращения боли во время операции. После начала анестезии вас уложат на операцию, и на кожу нанесут антисептик для предотвращения инфекции. Во влагалище будет помещено зеркало. Устройство будет аккуратно вставлено в матку, чтобы матка могла располагаться в нужном положении во время процедуры.

Затем делается небольшой надрез возле пупка.Лапароскоп, тонкая смотровая трубка шириной с карандаш, вводится через этот разрез, и брюшная полость надувается, чтобы облегчить осмотр органов.

Специальное приспособление для захвата фаллопиевых труб вводится через второй небольшой разрез, сделанный на уровне лобковых волос. Фаллопиевы трубы герметизируются одним из двух способов:

  • С помощью электрического тока, вызывающего образование тромба в трубке (электрокоагуляция)
  • С лентой или зажимом, надеваемым на трубки.В некоторых случаях будет использоваться устройство для отделения труб от матки и яичников, и трубы будут удалены из организма.

После того, как фаллопиевы трубы запломбированы или удалены, лапароскоп и захватное устройство извлекаются, а на разрезы накладывается небольшая повязка.

Как мне подготовиться к процедуре?

Перед лапароскопией:

  • Не ешьте, не пейте (включая воду) и не курите после полуночи накануне операции.
  • В день операции носите обувь на низком каблуке. Вы можете чувствовать сонливость из-за анестезии и шататься на ногах.
  • Не носить украшения. (Можно носить обручальные кольца.)
  • Носите свободную одежду. После операции у вас будет некоторая болезненность в животе и спазмы.
  • Принесите гигиеническую прокладку. После операции у вас может быть вагинальное кровотечение.
  • Перед операцией удалите лак для ногтей как минимум с одного пальца.

Чего ожидать после процедуры

?

Восстановление дома:

  • Не употребляйте алкоголь и не садитесь за руль в течение как минимум 24 часов после операции.
  • Вы можете принять душ в любое время после операции. Вы можете принимать ванну или плавать через две недели после операции.
  • Вы можете снять повязку на следующее утро после операции. Steri-полоски, напоминающие пластырь, можно снять через два-три дня после операции.
  • Пациенты могут вернуться к работе через три дня после операции. (Если вам нужна справка от врача об освобождении от работы, запросите ее до дня операции.)

Дискомфорт

  • Ваш живот может быть опухшим в течение нескольких дней после операции.Тайленол® можно принимать для облегчения боли.
  • Несколько дней у вас может болеть горло. Попробуйте использовать леденцы от горла.
  • У вас может быть легкая тошнота. Попробуйте съесть легкий ужин в день операции. Чай, суп, тосты, желатин или крекеры могут облегчить тошноту.
  • Газ в брюшной полости может вызывать дискомфорт в области шеи, плеч и грудной клетки в течение 24–72 часов после операции. Попробуйте принять теплый душ, использовать грелку или прогуляться.

Вагинальное кровотечение и менструация

Вагинальное кровотечение в течение одного месяца после операции является нормальным явлением.У многих женщин следующий нормальный менструальный цикл отсутствует в течение четырех-шести недель после операции. Когда ваш нормальный цикл вернется, вы можете заметить более сильное кровотечение и больший дискомфорт, чем обычно, в течение первых двух-трех циклов.

Сексуальная активность

Вы можете возобновить половую жизнь через неделю после операции.

Восстановление и перспективы

Как проходит восстановление после лапароскопической стерилизации?

После операции пациенты остаются в послеоперационной палате и наблюдают за возможными осложнениями.Пациентов выписывают после того, как они получат инструкции по домашнему восстановлению. Пациентов просят посетить своих врачей для последующего наблюдения в течение двух-восьми недель.

Когда звонить врачу

Когда мне следует обратиться к врачу после лапароскопической стерилизации?

Немедленно обратитесь к врачу, если вы испытываете что-либо из следующего:

  • Постоянная тошнота и рвота в течение более 24 часов.
  • Температура выше 100 градусов по Фаренгейту в течение более 24 часов.
  • Покраснение, отек, выделения или кровотечение вокруг разреза.
  • После первого дня операции:
    • Сильное кровотечение со сгустками крови
    • Замачивание гигиенической прокладки в течение двух часов

%PDF-1.6 % 2237 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 2237 120 0000000016 00000 н 0000006804 00000 н 0000006943 00000 н 0000007234 00000 н 0000007279 00000 н 0000007316 00000 н 0000007364 00000 н 0000007430 00000 н 0000007562 00000 н 0000007599 00000 н 0000007946 00000 н 0000007981 00000 н 0000008019 00000 н 0000008045 00000 н 0000008164 00000 н 0000008721 00000 н 0000009266 00000 н 0000105418 00000 н 0000107257 00000 н 0000125669 00000 н 0000151567 00000 н 0000156283 00000 н 0000160790 00000 н 0000162551 00000 н 0000162838 00000 н 0000163213 00000 н 0000163351 00000 н 0000163411 00000 н 0000163521 00000 н 0000163633 00000 н 0000163815 00000 н 0000163910 00000 н 0000164004 00000 н 0000164169 00000 н 0000164264 00000 н 0000164359 00000 н 0000164565 00000 н 0000164660 00000 н 0000164754 00000 н 0000164922 00000 н 0000165018 00000 н 0000165112 00000 н 0000165289 00000 н 0000165384 00000 н 0000165479 00000 н 0000165665 00000 н 0000165759 00000 н 0000165852 00000 н 0000166035 00000 н 0000166130 00000 н 0000166224 00000 н 0000166405 00000 н 0000166499 00000 н 0000166593 00000 н 0000166801 00000 н 0000166895 00000 н 0000166987 00000 н 0000167195 00000 н 0000167290 00000 н 0000167405 00000 н 0000167580 00000 н 0000167674 00000 н 0000167767 00000 н 0000167948 00000 н 0000168062 00000 н 0000168178 00000 н 0000168356 00000 н 0000168470 00000 н 0000168583 00000 н 0000168728 00000 н 0000168837 00000 н 0000168941 00000 н 0000169049 00000 н 0000169158 00000 н 0000169271 00000 н 0000169407 00000 н 0000169570 00000 н 0000169764 00000 н 0000169908 00000 н 0000170047 00000 н 0000170170 00000 н 0000170320 00000 н 0000170433 00000 н 0000170544 00000 н 0000170669 00000 н 0000170825 00000 н 0000170944 00000 н 0000171059 00000 н 0000171240 00000 н 0000171373 00000 н 0000171501 00000 н 0000171615 00000 н 0000171741 00000 н 0000171882 00000 н 0000171993 00000 н 0000172135 00000 н 0000172255 00000 н 0000172386 00000 н 0000172520 00000 н 0000172653 00000 н 0000172764 00000 н 0000172906 00000 н 0000173042 00000 н 0000173178 00000 н 0000173294 00000 н 0000173415 00000 н 0000173559 00000 н 0000173666 00000 н 0000173797 00000 н 0000173913 00000 н 0000174027 00000 н 0000174168 00000 н 0000174333 00000 н 0000174487 00000 н 0000174646 00000 н 0000174770 00000 н 0000174945 00000 н 0000175097 00000 н 0000006630 00000 н 0000002774 00000 н трейлер ]>> startxref 0 %%EOF 2356 0 объект > поток _E0/)-Sɑ 18 = пэ~.ЗфкК? Великобритания#»#p#c~~= uģ»h4` !Z6i;M!PXႏ/ NӍ!$=~dR)me|K[ww7,n4hmfFRz 5M0GD7|4;xD_LHKę1S6M]ƀXx| d1i!hM3i%L_

Стерилизация маточных труб (перевязка маточных труб) — familydoctor.org

Трубная стерилизация (перевязка маточных труб) — хирургический метод контроля над рождаемостью. Это обычно называют «перевязыванием труб». Операция не позволяет женщине забеременеть, перекрывая фаллопиевы трубы. Эти трубки ежемесячно переносят яйцеклетку из яичника в матку. Сперматозоиды поднимаются по фаллопиевым трубам, чтобы соединиться с яйцеклеткой, в результате чего наступает беременность.Когда трубы закрыты, яйцеклетка и сперматозоиды не могут достичь друг друга.

Трубная стерилизация является постоянной формой контроля над рождаемостью. Это один из самых эффективных способов предохранения от беременности. Повернуть вспять можно, но сложно и не всегда успешно. Он не защищает от инфекций, передающихся половым путем (ИППП).

Вам не нужно согласие вашего партнера на стерилизацию маточных труб. Но для большинства отношений лучше всего говорить о процедуре заранее.

Путь к улучшению здоровья

Стерилизация маточных труб проводится в больнице или амбулаторном хирургическом центре. Процедуру можно проводить амбулаторно в любое время. Послеродовая стерилизация может проходить сразу после родов, если это было кесарево сечение (кесарево сечение). Это также может быть выполнено в течение нескольких часов или дней после вагинальных родов.

Перед проведением процедуры вам сделают анестезию. Вы ничего не почувствуете. Во время процедуры ваш врач, скорее всего, сделает 1 или 2 надреза (надреза) на животе.Он или она вставит в разрезы специальные инструменты. Используя инструменты, они перекрывают фаллопиевы трубы, блокируя их пластиковыми зажимами, зажимами или кольцами. Они могут удалить или уничтожить небольшой кусочек каждой трубки.

После процедуры ваш врач закроет ваши разрезы. Вы должны быть в состоянии вернуться домой через несколько часов. Если процедура следует за родами, вам не придется проводить дополнительное время в больнице.

После процедуры

После процедуры у вас могут появиться некоторые симптомы, в том числе:

  • Боль в животе, спазмы.
  • Усталость.
  • Головокружение.
  • Дискомфорт в месте(ах) разреза.
  • Боль в плече (вызывается газом, который закачивается в брюшную полость, чтобы помочь отделить органы и дать врачам место для проведения операции).

Как и при любой хирургической процедуре, иногда могут возникнуть проблемы. Немедленно обратитесь к врачу, если вы:

  • Поднять лихорадку.
  • Кровотечение из разреза.
  • У вас сильная боль в животе, которая не прекращается.
  • Бывают обмороки.

Восстановление после трубной стерилизации обычно завершается через пару дней. Возможно, вы захотите расслабиться на недельку или около того. Избегайте подъема тяжестей в течение 1 недели.

У вас все еще будут месячные после перевязки маточных труб. Некоторые временные формы контроля над рождаемостью, такие как таблетки, помогают при нерегулярных менструальных циклах. Стерилизация не влияет на ваш менструальный цикл. Если у вас были нерегулярные менструации до использования любого типа противозачаточных средств, у вас, вероятно, снова будут нерегулярные менструации после стерилизации.

Спросите своего врача, как долго вы должны ждать после процедуры, прежде чем заниматься сексом. Не занимайтесь сексом, пока не почувствуете себя комфортно. Обычно вам нужно подождать около недели после операции. Вам придется подождать не менее 4 недель, если стерилизация проводится вскоре после родов.

На что следует обратить внимание

Трубная стерилизация является постоянной формой контроля над рождаемостью. Если вы думаете, что когда-нибудь захотите отменить эту процедуру, вам не следует этого делать. Реверсия возможна, но это сложная, серьезная операция.Даже успешное обращение не гарантирует, что вы снова сможете забеременеть. Если вы забеременеете, у вас повышенный риск осложнений, таких как внематочная беременность. Кроме того, операция стоит дорого и обычно не покрывается медицинской страховкой.

Помните, что стерилизация не защитит вас от инфекций, передающихся половым путем (ИППП). Всегда используйте презерватив во время полового акта, чтобы предотвратить ИППП.

Некоторые женщины опасаются, что стерилизация их изменит, но это не так.Это не сделает вас менее женственной. Это не вызывает увеличения веса или роста волос на лице. Это не уменьшит ваше сексуальное удовольствие и не вызовет начало менопаузы.

Поговорите со своим врачом в любое время, когда вы думаете о новой форме контроля над рождаемостью, особенно о постоянном. У вас есть много вариантов. Убедитесь, что это лучший выбор для вас.

Вопросы к врачу

  • Является ли постоянным противозачаточным средством лучший выбор для меня?
  • Существуют ли другие формы постоянного контроля над рождаемостью?
  • Что делать, если я хочу отменить процедуру позже?
  • Когда мне лучше всего пройти процедуру?
  • Какие риски связаны с процедурой?
  • Могу ли я забеременеть после стерилизации маточных труб?
  • Увеличивает ли процедура риск развития рака яичников?

Ресурсы

Национальные институты здравоохранения, MedlinePlus: перевязка маточных труб

У.S. Министерство здравоохранения и социальных служб, Управление женского здоровья: методы контроля рождаемости

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США: противозачаточные средства

Copyright © Американская академия семейных врачей

Эта информация дает общий обзор и может не относиться ко всем. Поговорите со своим семейным врачом, чтобы узнать, относится ли эта информация к вам, и получить дополнительную информацию по этому вопросу.

Уход и техническое обслуживание хирургических инструментов

Информация о дезинфекции, очистке и стерилизации хирургических инструментов


Обработка новых инструментов

Совершенно новые инструменты должны быть очищены перед первой стерилизацией или использованием.Защитные колпачки и защитные пленки должны быть полностью удалены, например, с долота, распатора или микрохирургического инструментария.

Очистка-дезинфекция-стерилизация моторных систем и наконечников

Моторные системы и наконечники Aesculap требуют технического обслуживания и известны во всем мире своей надежностью. Преждевременного износа и неисправностей можно избежать, следуя приведенным ниже инструкциям по уходу и инструкциям по смазке наконечников в соответствующих инструкциях по эксплуатации.Если устройства все-таки нуждаются в ремонте или обслуживании, обратитесь к местному представителю Aesculap.

  • Для машинной очистки поместите инструмент в проволочную корзину, подходящую для процесса очистки (убедитесь, что чистящий раствор и промывочная вода из машины соприкасаются со всеми частями инструмента).
  • Полностью демонтируйте все разборные инструменты.
  • Предпочтительно сухая утилизация.
  • Для влажной утилизации используйте активное чистящее дезинфицирующее средство.Тщательно промойте инструмент чистой проточной водой перед машинной очисткой и дезинфекцией.

При необходимости обработать ультразвуком в соответствии с инструкциями производителя:

  • Для эффективной механической поддержки при ручной очистке
  • Для предварительной обработки инструментов с засохшей грязью перед машинной очисткой
  • Микрохирургические инструменты и инструменты с тонкими рабочими концами не следует обрабатывать ультразвуком. Их следует стирать либо вручную, либо в стиральной машине.В случае очистки в машине используйте подходящую стеллаж для хранения.
  • Очистите вручную или в машине. Следуйте инструкциям производителя.

Ручная очистка/дезинфекция

  • Поместите инструмент в подходящее дезинфицирующее средство с активными очищающими свойствами так, чтобы все поверхности, внутренние полости, просветы и отверстия соприкасались с раствором. Следуйте инструкциям производителя дезинфицирующего средства.
  • После химической дезинфекции всегда тщательно промывайте чистой проточной водой. Следуйте инструкциям производителя дезинфицирующего средства.
  • Удалите остатки грязи с инструмента с помощью мягкой синтетической щетки. Не используйте чистящую или металлическую щетку.
  • Очистите все просветы и каналы мягкими круглыми синтетическими щетками. Обратите внимание, просвет и щеточка должны иметь одинаковый диаметр.
  • Заключительное ополаскивание дистиллированной или деионизированной водой.
  • Протрите инструмент впитывающей, мягкой и безворсовой тканью.
  • Просушить каналы и каналы сжатым воздухом.
Уход/тестирование
  • Дайте прибору остыть до комнатной температуры.
  • Слегка смажьте подвижные части (например, соединения и концы) специальной стерилизационной, паропроницаемой смазкой (например, масляным спреем STERILIT JG 600 или смазкой JG 598, физиологически безопасной в соответствии с DAB и § 31 LMBG).
  • После каждого процесса очистки, дезинфекции проверяйте инструмент, чтобы убедиться, что он чист, правильно функционирует и не поврежден, например.грамм. погнутые, сломанные, деформированные или изношенные детали.
  • Утилизируйте поврежденные и дефектные инструменты и замените их.
Хранение
  • Поместите инструменты с тонким рабочим концом и/или инструменты для микрохирургии в подходящие стеллажи для хранения.
  • Закрепите инструменты замком в первом фиксаторе.

Стерилизация паром должна выполняться в соответствии с утвержденным процессом проточной стерилизации (например, с помощью стерилизатора, соответствующего спецификациям EN 285 и утвержденного в соответствии с EN 554).
При использовании метода фракционного вакуума используйте программу стерилизации 134°C/2 бар с минимальным временем выдержки 5 минут.

Болезнь Крейтцфельдта-Якоба

Заявление рабочей группы по подготовке инструментов относительно обработки инструментов для повторного использования в случаях подозрения на болезнь Крейтцфельдта-Якоба.
Многоразовые инструменты, которые использовались у пациентов с подозрением на болезнь Крейтцфельдта-Якоба, должны подвергаться специальной обработке при подготовке их к повторному использованию.
«Рабочая группа по подготовке инструментов» не в состоянии оценить эффективность различных рекомендаций, сделанных до сих пор. Однако, поскольку все эти процессы обработки оказывают более или менее значительное влияние на сохранение ценности многоразовых инструментов, Рабочая группа рекомендует установить процедуру, которая соответствует следующим критериям:
Гипохлорит натрия (хлорный отбеливающий щелок) не может использовать для обработки замачиванием, так как такой раствор может вызвать необратимую коррозию инструментов.
При использовании едкого натра такие материалы, как алюминий, не подходят из-за их низкой коррозионной стойкости и поэтому не могут использоваться в таком случае.
Процесс очистки, включая необходимое ополаскивание, должен выполняться между обработкой погружением и стерилизацией, чтобы полностью удалить остатки ванны перед стерилизацией. Рекомендуется машинная очистка.

Информация по дезинфекции, очистке и стерилизации B.Медицинские изделия Braun

Воспользуйтесь обширной информацией о «My B. Braun».

Зарегистрируйтесь сейчас

После регистрации вы найдете в категории переработка / инструкции подробную информацию о запрошенных продуктах.

Машинная очистка/дезинфекция

  • Выберите программу в зависимости от материала очищаемого инструмента (например, нержавеющая инструментальная сталь, алюминий).Следуйте инструкциям производителя машины.
  • Окончательное ополаскивание деионизированной водой.
  • Оставьте достаточно времени для высыхания.
  • Снимите инструмент со станка сразу после выполнения программы.

Связанный документ и ссылка

Описание Документ Ссылка

060206 Изделия для ручной и машинной обработки пр…

пдф (47.1 КБ) открытым

AKI — Подготовка инструмента рабочей группы

связь открытым

Какие параметры должны быть проверены при валидации паровой стерилизации?

Понимание уровня гарантии стерильности

Чтобы понять, как валидируются процессы паровой стерилизации, важно понимать некоторые ключевые концепции стерилизации.Целью стерилизации является инактивация микробиологических загрязнений, что делает продукты стерильными[1]. Кинетику инактивации микроорганизмов стерилизующими агентами лучше всего описать как экспоненциальную зависимость между числом выживших микроорганизмов и степенью обработки стерилизующим агентом 1 . Следовательно, всегда существует вероятность того, что микроорганизм может выжить независимо от степени применяемой обработки, и невозможно гарантировать стерильность любого продукта в популяции, подвергнутой стерилизующей обработке 1 .Вместо этого стерильность обработанной популяции определяется с точки зрения вероятности присутствия одного жизнеспособного микроорганизма в продукте 1 . Это называется уровнем обеспечения стерильности (SAL). SAL выражается как количественное значение, которое можно интерпретировать как вероятность того, что устройство окажется нестерильным после воздействия процесса стерилизации. Например, SAL ≤ 10 -6 означает, что существует вероятность того, что одно устройство на миллион окажется нестерильным после воздействия процесса стерилизации.

Валидация SAL с использованием биологических индикаторов

В процессах паровой стерилизации в качестве стерилизующего агента используется насыщенный пар под давлением в течение определенного времени воздействия и при определенной температуре[2]. FDA заявляет, что для многоразовых устройств, предназначенных для стерилизации, должен быть указан как минимум один проверенный микробицидный метод стерилизации[3]. Для предметов многоразового использования, когда трудно определить сложность процесса стерилизации, а предстерилизационную обработку, такую ​​как очистка, трудно контролировать и она является переменной, применяемый метод стерилизации должен быть консервативным и часто упоминается как «избыточное уничтожение», а SAL из ≤ 10 -6 должно быть получено 1, [4] .Чтобы подтвердить SAL ≤ 10 -6 , цикл стерилизации влажным жаром может быть подтвержден с использованием частичного или полного цикла. При проверке уровня обеспечения стерильности любым из этих методов время сушки не программируется. Это делается для ограничения количества летальных исходов, доставляемых в BI после завершения фазы воздействия. Следовательно, время сушки проверяется отдельно.

Подход частичного цикла или «полуцикла» для тестирования уровня обеспечения стерильности требует полной инактивации соответствующего тестируемого организма с микробиологической нагрузкой или F bio в течение ≥ 6 минут при параметрах полупериода.Необходимо провести трехкратное тестирование для демонстрации воспроизводимости 1 . Споры Geobacillus stearothermophilus чаще всего используются для проверки процессов влажно-тепловой стерилизации 2,[5] . Микробиологическое испытание или F bio рассчитывается как D 121 x log 10 ( N 0 ). Значение D 121 или десятичное уменьшение является выражением устойчивости и представляет собой время, необходимое для достижения инактивации 90% (или 1 log) популяции тестируемого микроорганизма при 121°C. N 0 относится к жизнеспособной популяции биологического индикатора до воздействия. Используемые биологические индикаторы или инокулированные носители должны соответствовать стандарту ISO11138-3:2017, что означает, что они должны иметь жизнеспособность ≥ 1,0 x 10 5 и значение D 121 ≥ 1,5 минут. Кроме того, значение z должно быть ≥ 6°C[6]. Наконец, размещение биологических индикаторов или инокулированных носителей должно происходить в «наиболее трудно стерилизируемых» местах загрузки[7].

В качестве альтернативы частичному циклу можно использовать полный цикл. Здесь полный цикл стерилизации должен привести к полной инактивации биологических индикаторов с микробиологической нагрузкой или F bio в течение ≥ 12 минут плюс добавление коэффициента безопасности. Этот фактор безопасности достигается путем определения log популяции, необходимой для получения микробиологического заражения в течение 12 минут, и добавления 0,5 log 10 1 .Как и в случае с неполным циклом, требуется трехкратное тестирование для демонстрации воспроизводимости. Биологические индикаторы или инокулированные носители, часто G. stearothermophilus , должны быть помещены в наиболее трудно стерилизуемые места в загрузке и должны соответствовать критериям, изложенным в ISO 11138-3 3 .

Валидация времени сушки

В дополнение к установлению процесса стерилизации на основе данных микробиологического/температурного профиля необходимо валидировать минимальное время сушки для методов конечной стерилизации; учитывая, что влага, остающаяся на упакованных продуктах после стерилизации, может нарушить целостность упаковки и ее характеристики 1,3 .Устройства и упаковка должны быть визуально сухими после паровой стерилизации 4 . Кроме того, после паровой стерилизации оценивается любой процент увеличения веса. Существует несколько критериев приемлемости прибавки в весе, однако ISO/TS 17665-2:2009, приложение A, и EN 285[8] указывают, что влага, оставшаяся в загрузке в конце процесса стерилизации, не может привести к прибавке в массе более чем на 1% для текстиля, 0,2% для металла. ISO/TS 17665-2:2009 Приложение B и ANSI/AAMI/ST8:2013/(R)2018[9] утверждают, что остаточная влага не может привести к увеличению веса абсорбирующих материалов на 3%.

Температурное профилирование

В стандарте ISO/TS 17665-2:2009 указано, что всякий раз, когда для подтверждения летальности используются биологические индикаторы, физические параметры, измеренные в процессе стерилизации, всегда должны использоваться для подтверждения того, что определенный процесс стерилизации был проведен. 4 . ISO/TS 17665-2:2009, Приложение A, также устанавливает критерии приемлемости температурного профиля, утверждая, что принятый диапазон температур стерилизации имеет установленную температуру стерилизации в виде нижнего предела и верхнего предела +3°C.Кроме того, время уравновешивания не должно превышать 30 секунд. Например, цикл, заданный при 132°C в течение 4 минут, должен достигать температурного диапазона от 132°C до 135°C в течение последних 3 минут и 30 секунд фазы воздействия. В то время как ISO/TS 17665-2:2009 Приложение A предлагается как информативное в США, оно часто рассматривается как требование в ЕС. По нашему опыту, FDA будет уделять меньше внимания данным о температуре и больше внимания микробиологическим данным, хотя имели место отклонения из-за отсутствия данных о температуре.В настоящее время мы выполняем температурное профилирование отдельно от других проверок, чтобы убедиться, что датчики не мешают другим тестам.

 

[1] ISO 17665-1:2006 Стерилизация изделий медицинского назначения. Влажный жар. Часть 1: требования к разработке, валидации и текущему контролю процесса стерилизации медицинских изделий.

[2] AAMI TIR12:2020 Проектирование, испытания и маркировка медицинских изделий, предназначенных для обработки в учреждениях здравоохранения: руководство для производителей устройств.

[3] FDA 2015 Повторная обработка медицинских изделий в медицинских учреждениях: методы проверки и маркировка — руководство для промышленности и персонала Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов.

[4] ISO/TS 17665-2: 2009 Стерилизация изделий медицинского назначения. Влажное тепло. Часть 2. Руководство по применению ISI 17665-1

[5] ISO 11138-3:2017 Стерилизация изделий медицинского назначения. Биологические индикаторы – Часть 3: Биологические индикаторы для процессов влажно-тепловой стерилизации.

[6] Значение z — это изменение температуры, необходимое для создания 1-логарифмического изменения значения D.

[7] ISO 14161:2009 Стерилизация изделий медицинского назначения. Биологические индикаторы. Руководство по выбору, использованию и интерпретации результатов

[8] BS EN 285: 2015 Стерилизация. Паровые стерилизаторы. Большие стерилизаторы

[9] ANSI/AAMI/ST8:2013(R)2018 Больничные паровые стерилизаторы

Лабораторные методы

Лабораторные методы

Часть G: Методы и материалы


Лабораторные методы

А.Стерильные методы

Стерильная техника всегда относительная вещь. Необходимые меры предосторожности зависят от экспериментальная ситуация, в том числе используемые питательные среды, конкурентные способности экспериментальный организм, продолжительность эксперимента и предполагаемое использование культуры. Для В этих экспериментах наиболее серьезной проблемой загрязнения является плесень. Многие распространенные плесени растут хорошо на дрожжевых средах и эффективно конкурируют, зарастая чашками и скрывая эти дрожжи которым удается расти.Бактерии представляют меньшую проблему, так как большинство из них плохо растут на эти среды и при небольшом опыте можно легко отличить их от дрожжей. Другие штаммы дрожжи могут быть катастрофическими загрязнителями, если они остаются незамеченными. В частности, красные дрожжи, которые иногда может сбивать с толку, но отличается от наших красных дрожжей тем, что не требует аденина.

Однако, в отличие от краткосрочных экспериментов, стерилизация сред должна быть весьма строгой. потому что хранение дает достаточно времени для развития даже медленно растущих загрязнителей.У нас есть пришли к выводу из опыта, что хранение сред на холоде на самом деле контрпродуктивно. Оно делает не предотвращает заражение, но замедляет его рост. Следовательно, загрязнение может остаться незамеченным. до инкубации культур. Гораздо лучше хранить среду при комнатной температуре и обнаруживать загрязнения до использования среды.

(1) Стерилизация влажным теплом

Влажное тепло, создаваемое автоклавом или скороваркой, является эффективным способом стерилизации. большинство материалов.При давлении на 15 фунтов на квадратный дюйм выше атмосферного давление воды достигает температуры примерно 121°С до кипения. Большинство материалов эффективно стерилизуются за 15 минут. воздействия этой температуры. Если автоклава нет, можно использовать обычный бытовой пресс. Cooker эффективно стерилизует питательные среды небольшими партиями.

(2) Стерилизация сухим жаром

Сухие материалы, такие как стекло и металл, можно стерилизовать в печи, но для этого требуется более высокая температура. температура (160°С) и более длительное время (не менее 2 часов), чем в автоклаве.Это наиболее практично для стеклянной посуды, когда имеется духовка, управляемая автоматическим таймером, так что стерилизация и охлаждение может произойти ночью. Использование одноразовой, предварительно стерилизованной пластиковой посуды снижает потребность в духовке. важный.

(3) Стерилизация пламенем

Пламя газовой горелки эффективно стерилизует небольшие стеклянные или металлические предметы, такие как инокуляции петель, но следует избегать «поджаривания» дрожжей при контакте с предметами, нагретыми в пламени.Окуните шпатели в спирт, а затем используйте пламя, чтобы поджечь спирт. Разместите металлические инструменты, такие как петли в пламени, пока они не раскалятся докрасна. Охладить горячие инструменты, прикоснувшись ими к агару или внутрь из стерильной стеклянной трубки. Однако, поскольку пламя опасно, этот метод можно и нужно использовать. по возможности избегать. Мы обнаружили, что сжигание действительно необходимо только для стерилизации прививочные петли и мелкие инструменты. Мы не смогли продемонстрировать какую-либо ценность в поджигание отверстий пробирок, бутылок или колб в этих экспериментах.

(4) Стерилизация спиртом

Во многих экспериментальных процедурах наиболее эффективным способом стерилизации предметов является этиловый спирт. Либо 95%, либо 70% будут работать. Последнее на самом деле более эффективно, но первое зачастую удобнее. Конечно, спирту нужно дать испариться или сгореть. перед использованием объекта в контакте с дрожжами. Используйте пламя, чтобы сжечь алкоголь, свечу как правило, дешевле и безопаснее, чем газовая горелка.Алкоголь больше, чем тепло, делает стерилизации, поэтому просто «зажгите» спирт, чтобы минимизировать нагрев и ускорить процесс. Также протрите стол со спиртом перед началом эксперимента по удалению пыли с плесенью, наиболее распространенный источник загрязнения. Если ваша кожа не особенно чувствительна, протрите руки небольшое количество алкоголя тоже.

(5) Сохранение стерильности вещей

Наиболее распространенными источниками загрязнения во время эксперимента являются пыль, настольные, с воздуха и от людей.Это диктует несколько очевидных принципов:
1) Сохраняйте вещи максимально раскрыты.
2) Не прикасайтесь ни к чему, с чем может соприкасаться культуры, и если вы прикасаетесь к ней, стерилизуйте ее снова перед использованием.
3) Протрите поверхность вокруг эксперимента с алкоголем и минимизировать турбулентность воздуха.
4) Избегать разговоров, пения, свист, кашель или чихание в сторону вещей, которые должны быть стерильными. Длинные волосы, если нет связаны сзади, могут быть источником заражения.
5) Обеспечьте подходящее место для подготовки, хранение и использование стерильных сред. К сожалению, комнатные растения, животные и другие материалы, такие как Среда дрозофилы, обычно встречающаяся в кабинетах биологии, является обильным источником плесени и следует держать подальше от зоны, используемой для стерильных процедур.

(6) Изучите свое загрязнение, чтобы избежать его в следующий раз Время

Если некоторые из ваших чашек с агаром загрязнились, вы часто можете это определить, изучив их. табличка, как произошло заражение.Если загрязнители проникли в агар, загрязняющее вещество, вероятно, было вылито со средой. Если загрязнение находится под агаром, мог находиться в блюде до того, как его налили, или попасть внутрь, когда крышку открывали, чтобы налить. Если загрязнение находится сверху, оно могло попасть до того, как крышка была закрыта после заливки, открывая крышку для удаления конденсата или пока пластина подвергается прививке.

(7) Адаптируйте свои методы к вашим Потребности

Соответствующая стерильная техника необходима для успешных микробиологических экспериментов, но чрезмерные меры предосторожности могут серьезно отвлечь внимание.Дрожжи и бактерии требуют разных методов из культуры ткани. Дрожжи быстро растут, опережая большинство дрожжей, кроме нескольких нитевидных. (нечеткие) грибы и некоторые бактерии. Эксперименты могут быть загрязнены и все еще не потеряны, когда студенты используют дрожжи, потому что дрожжи будут расти достаточно хорошо, несмотря на загрязнение, что результаты эксперимента можно прочитать через нарушающий рост. Поэтому используйте максимально осторожность при изготовлении и заливке среды.

Д.Среда роста

В большинстве экспериментов, описанных в этом руководстве, используются один или два из следующих типов среды:
1) питательно полноценная среда, содержащая субоптимальное количество аденина (ДАД),
2) питательно полноценная среда, содержащая избыток аденина (YEAD),
3) а среда определенного химического состава без аденина (MV),
4) среда определенного химического состава с аденин (MV + Ade),
5) среда для спорообразования (YEKAC),
6) среда, используемая для определить мелкие мутанты (PETITE) и
7) богатую среду, используемую для хранения штаммов дрожжей (YEPAD).

Мы используем среды, приготовленные из коммерчески доступных ингредиентов. Небольшие дополнительные расходы этих ингредиентов более чем компенсируется их однородностью и надежностью. То экономия, которую можно получить за счет использования «домашних» ингредиентов, меньше, чем можно было бы ожидать. потому что мы еще не нашли замену самому дорогому ингредиенту, агару. Несмотря на то что общие источники, такие как различные виды овощных соков, могут поставлять большую часть других ингредиенты, мы пришли к выводу, что жертва воспроизводимостью является неоправданной.

Среда YED (дрожжевой экстракт + декстроза) будет нашей стандартной питательной средой. Это называется «сложная» среда, потому что она сделана из натуральных ингредиентов (дрожжей) и ее точного химического состава. состав не известен. Он содержит все, что есть в дрожжах, включая, конечно, аденин. это также «полный» носитель. Мутанты, нуждающиеся в красном аденине, хорошо растут на этой среде. вырабатывают характерный красный пигмент.

Среда YEAD (дрожжевой экстракт + аденин + декстроза) содержит те же ингредиенты, что и среда YED, но добавлен избыток аденина.Мутанты, нуждающиеся в красном аденине, хорошо растут на этой среде, и будут не развивают характерный красный пигмент.

Среда YEPAD (дрожжевой экстракт + пептон + аденин + декстроза) содержит те же ингредиенты. как YEAD, но с добавлением пептона. Это очень богатая среда, используемая для хранения штаммов дрожжей.

Среда MV (минимальная плюс витамины) представляет собой среду с определенным химическим составом, то есть она состоит из минимум чистых химических ингредиентов, необходимых для поддержания роста дрожжей дикого типа.Мы будет использовать MV, когда нам понадобится среда, не содержащая аденина.

Среда MV + Ade (минимальный плюс витамины + аденин) содержит те же ингредиенты, что и MV, но добавлен избыток аденина.

YEKAC (дрожжевой экстракт плюс ацетат калия) индуцирует образование спор диплоидных дрожжей и образование спор. пройти мейоз. Он несбалансирован по питанию, поэтому рост будет очень незначительным.

Среда PETITE содержит глицерин в качестве источника углерода и используется для выявления мелких колоний. мутанты.Мелкие клетки не будут расти на этой среде.

Рецепты агаровой среды для выращивания

Если вы используете расфасованную смесь, следуйте инструкциям на упаковке. Если ты Для взвешивания сухих ингредиентов используйте следующие рецепты. Даны рецепты приготовления 100 миллилитров. Если вы хотите сделать больше, просто умножьте суммы, чтобы получить нужный вам объем. хочу. Пример: чтобы сделать 500 миллилитров, умножьте каждый ингредиент на 5.Не ставьте больше 600 миллилитров в колбе на 1000 мл. Если вы наполните контейнеры слишком полными, они могут выкипеть во время приготовления. процесс стерилизации. Для заливки одной стандартной 100-кратной заливки требуется примерно 25 миллилитров среды. пластина 15 мм. (Жидкие среды можно приготовить по этим рецептам, исключив агар.)

Декстрозная среда с дрожжевым экстрактом (YED):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Среда дрожжевого экстракта с аденином и декстрозой (ДА):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
8 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

Дрожжевой экстракт Пептон Аденин Декстроза Среда (ЕПАД):

1 грамм дрожжевого экстракта
2 грамма пептона
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
8 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

ПЕТИТ Средний:

1 грамм дрожжевого экстракта
0.025 грамм безводной декстрозы (глюкозы)
2,4 мл глицерина
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
98 мл воды

Минимальный с витаминами (MV):

0,15 г Дрожжевой азотной основы без аминокислот и сульфата аммония
0,52 г сульфата аммония
2 грамма безводной декстрозы (глюкозы)
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Минимальный носитель плюс аденин (MV + ade):

0.15 грамм дрожжевой азотной основы без аминокислот и сульфата аммония
0,52 г сульфата аммония
2,0 г безводной декстрозы (глюкозы)
2,0 г Агар (агар-агар; гуммиагар)
8,0 мл исходного раствора аденина
92 мл воды

Среда для спорообразования (YEKAC):

1 грамм ацетата калия
0.25 г дрожжевого экстракта
2 грамма Агар (агар-агар; гуммиагар)
100 мл воды

Стандартный раствор аденина

400 мг аденина в 400 мл воды (1 мг/мл)
Хранить при комнатной температуре.
Используйте 2 мл маточного раствора на 100 мл среды; уменьшить воду добавляют в среду по 2 мл.

Диски для промокательной бумаги с аденином

1.25 грамм аденина
150 мл дистиллированной воды
художественные промокательные бумажные диски
Добавьте аденин в дистиллированную воду в достаточно большом стакане, чтобы раствор не закипел. над. Кипятить пять минут. Добавьте диски промокательной бумаги и кипятите еще пять минут. Извлеките диски стерильными щипцами в стерильную закрытую емкость, например чашку Петри. Поместите их в один слой и дайте им высохнуть в течение нескольких дней.

Э.Стерильная вода

Во многих краткосрочных экспериментах воду можно «стерилизовать» кипячением.
1) поместите воду в неплотно накрытую емкость,
2) поместите емкость в кастрюлю с кипячение воды в течение 15 минут,
3) после того, как она остынет, закройте емкость для воды крышкой.

Вероятно, лучший способ приготовить стерильную воду — это поставить контейнеры в автоклаве или скороварке, а затем стерилизовать воду под тем же Условия, используемые для питательных сред.

F. Температура инкубации и скорость роста

Оптимальная температура роста для этих штаммов составляет примерно 30°С, но они вполне удовлетворительно растут в гораздо более широком диапазоне. Все эти опыты можно провести за комфортная комнатная температура, но дрожжи переносят почти любую температуру, которую могут люди. Однако температура влияет на скорость роста. При более низких температурах клетки будут расти. медленнее, и скорость должна быть определена опытным путем.Инкубационный период оценивается в эти эксперименты основаны на инкубации при температуре в пределах одного или двух градусов от 30°С.

На самом деле можно замедлить дрожжи, охладив их, чтобы эксперименты соответствовали классу. расписания. Просто охладите или просто охладите чашки на разных стадиях, чтобы замедлить рост. Имейте в виду, однако, что после того, как культура была помещена в холодильник, может наступить лаг-период. несколько часов, прежде чем он снова начнет расти. Конечно, если он достиг стационарной фазы, не будет расти дальше ни при какой температуре.

Штаммы дрожжей действительно могут храниться длительное время в холодильнике при температуры чуть выше нуля. Некоторые штаммы будут продолжать расти, хотя и очень медленно, в этих температурах, но большинство из них остаются жизнеспособными в течение недель или месяцев, а некоторые — в течение многих лет.

Следует избегать температур выше 30°С. Хотя клетки будут расти при более высоких температуры, они накапливают нежелательные petite мутации, и спороношение сильно подавляется.Красный пигмент у адениновых мутантов также ингибируется при более высоких температурах. Безопаснее всего инкубируйте культуры, которые спорулируются при комфортной комнатной температуре.

Инкубируйте культуры в темноте или при слабом освещении, насколько это возможно. удобный. Хотя и не критично, длительное пребывание в обычном помещении свет или более яркий свет снизит жизнеспособность клеток, которые содержат красный пигмент. Чувствительный к УФ штамм G948-1C/U не должен подвергаться длительному воздействию источников света.

Для оптимального роста и развития красного пигмента пластины должны быть аэробными. Мы инкубируйте чашки в открытых пластиковых мешках для хранения пищевых продуктов. Достаточное количество кислорода доступно при открытых мешках для поддержки аэробного дыхания. Пластиковые пакеты предохраняют тарелки от слишком быстрого высыхания, защищают их от загрязнения и сделать их легче носить с собой, не проливая.

G. Использование зубочисток и инокуляционных петель

Для большинства целей самый простой способ переместить дрожжи из одного места в другое на агаре. среду стерильной зубочисткой.Плоская зубочистка удобнее в использовании, чем круглая. Заостренный конец удобен для отбора образцов из отдельных колоний или для нанесения небольших пятен. или полосы. Плоский конец удобен для разбрасывания дрожжей, для выделения отдельных дрожжей. колонии и для смешивания. Зубочистки стерильны прямо из коробки, если коробка не был загрязнен. Просто обрежьте один угол, чтобы сделать небольшое отверстие (от 1/4 до 1/2 дюйма в поперечнике). а коробка будет служить дозатором.Зубочистки в коробке направлены в обе стороны, но вы можете легко выбрать конец, который вы предпочитаете для любой задачи. Конечно, нужно позаботиться об обращении каждую зубочистку только за тот конец, который не будет касаться дрожжей или среды.

Зубочистка является альтернативой традиционной инокуляционной петле, которая доступна коммерчески, даже в платине. Мы делаем свои собственные прививочные петли из 6-8-дюймового куска латунный стержень (используемый для пайки) и нихромовая проволока.Просверлите небольшое отверстие рядом с концом стержня, чтобы закрепите проволоку, вставьте конец проволоки в отверстие, оберните несколько витков вокруг стержня и оставьте дюйм или два провода прямо. В конце прямого участка сформируйте петлю с парой острогубцы. Подожгите проволоку на бунзеновской горелке, пока она не загорится красным, чтобы стерилизовать ее перед каждым используйте и, конечно же, дайте ему остыть, прежде чем он коснется (или поджарит) дрожжи. Прикосновение к агару сразу охлаждает.

ЧАС.Распространение клеток

Существует несколько способов распространения клеток. Они используют различные типы пипеточного оборудования и различные способы перемещения клеток по поверхности агара.
Количественный метод заливки
Этот метод требует подготовки отдельной пробирки для окончательного разведения для каждого планшета и затем все содержимое пробирки выливают на поверхность агара. Этот метод имеет Преимущество в том, что не требуется использование пламени.У него есть недостаток в том, что он не такой воспроизводимый.

1. Сделайте серию разведений суспензии дрожжевых клеток от 1 до 10.
2. Пипеткой внесите 0,1 мл соответствующей суспензии в стерильную пробирку, содержащую 0,9 мл стерильная вода. Вращайте пробирку, чтобы подвесить клетки, а затем вылейте все содержимое пробирку на поверхность агаровой среды. Наклоняйте и вращайте пластину, чтобы равномерно распределить суспензию по поверхности агара.
3. Если есть пятна, которые не покрываются, используйте стерильную зубочистку, чтобы распределить подвеска над непокрытыми участками.

Суспензия должна впитаться в агар до того, как чашки будут подвергнуты воздействию экспериментальное лечение. Чтобы ускорить процесс, заварите чашки с агаром на несколько дней. заранее и дайте им немного подсохнуть, прежде чем вылить дрожжевую суспензию.

Видеораздел Серийное разбавление и подсчет жизнеспособных клеток иллюстрирует метод заливки.

Метод количественного распределения
Если вам нужны точные данные, лучше использовать альтернативный метод покрытия. Сотовый суспензию аккуратно пипеткой наносят на поверхность агара, а затем распределяют стерильным разбрасыватель. Есть два типа разбрасывателей:

Разбрасыватель скрепок без пламени
Вы можете легко сделать недорогой многоразовый разбрасыватель, выпрямив два изгиба в большом канцелярская скрепка, оставив конец в виде шпильки для расправления и прямую ручку под прямым углом к ​​нему.Вы можете стерилизовать несколько шпателей вместе в закрытых стаканах или завернуть их в фольгу или бумагу.
Разбрасыватель пламенного стекла
Если у вас есть оборудование и навыки работы со стеклянной палочкой, вы можете сделать простой разбрасыватель стекла. нагревая и сгибая один дюйм секции на конце короткого куска стеклянного стержня. Эти также можно приобрести разбрасыватели.

1. Сделайте серию разведений суспензии дрожжевых клеток от 1 до 10.
2. Используйте новый наконечник для пипетки, чтобы набрать 0.1 мл соответствующей суспензии на агар поверхность. Ударьте пробирку перед взятием пробы. Если вы делаете несколько тарелок вы можете пипетировать клетки в каждый планшет, используя один и тот же наконечник пипетки, а затем распределять их без воспламенения распределителя между каждой плитой.
3. Стерилизуйте шпатель в 95% этаноле, а затем пропустите шпатель через пламя до поджечь спирт. Аккуратно держите шпатель, пока весь спирт на шпателе не полностью сгорает.Использование спиртового пламени является опасным шагом и требует осторожности и строгий контроль со стороны учителя.
4. Охладите шпатель, коснувшись им агара. Используйте плоскую сторону, чтобы распределить подвеска над поверхностью; затем используйте изогнутую часть шпателя, чтобы сделать перекрывающиеся штрихи. Поверните тарелку на 90 градусов и повторите процесс приготовления перекрывающиеся штрихи. Крышку можно держать над планшетом, чтобы свести к минимуму загрязнение. Избегайте распределения суспензии по краям, где она может стекать между агаром. и сторона чашки Петри.

В видеоразделе «Использование дрожжей для измерения солнечного УФ-излучения» показано покрытие распределителя из обожженного стекла. метод.

Качественный метод заливки для получения газонов из ячеек
Этот метод дает толстый равномерный рост клеток (газон) на поверхности агара. пластина. Это быстрый метод, который полезен для различных качественных экспериментов.

1. Сделать мутную взвесь дрожжевых клеток.
2.Пипеткой нанесите 1,0 мл суспензии на поверхность агаровой среды. Наклоняйте и вращайте чашку для равномерного распределения суспензии по поверхности агара.
3. Если есть пятна, которые не покрываются, используйте стерильную зубочистку, чтобы распределить подвеска над непокрытыми участками.

Как и в количественном методе заливки, суспензия должна быть пропитана влагой. агара до того, как чашки будут подвергнуты экспериментальной обработке.Если вы делаете пластины с агаром за несколько дней и дайте им немного подсохнуть, прежде чем вылить дрожжевую суспензию, которую вы ускорить процесс.

Видеораздел Влияние солнечного УФ на клетки иллюстрирует метод заливки покрытия для лужайка.

I. Автоматические микропипетки, серологические пипетки и Одноразовые пипетки с грушей

Автоматические пипетки — это рабочие лошадки современной молекулярной биологии. микробиология.Они быстрые и точные и экономят много времени и нервов. То эксперименты в этом руководстве часто требуют использования пипетки на 0,1 мл. Хотя они относительно дорогие, они делают работу так быстро, что ее легко могут разделить несколько студентов или лабораторий. группы. Вы будете использовать его для серийных разведений и для посева клеток на агар. Стерильные советы упакованы в многоразовые пластиковые диспенсеры. Практикуйте использование пипетки с водой, пока не почувствуете комфортно с этим.(Если автоматические микропипетки недоступны, их можно заменить одноразовые грушевидные пипетки, серологические пипетки или градуированные капиллярные трубки)

1. Плотно прижмите узкий конец пипетки к открытому концу наконечника, пока наконечник еще в дозаторе.
2. Чтобы заполнить его, медленно нажимайте на поршень до тех пор, пока не почувствуете сопротивление, но не до упора. возможно. Погрузите наконечник в раствор, а затем медленно отпустите поршень.Если если капли прилипнут к наконечнику, протрите их о край контейнера.
3. Поместите наконечник в жидкость в пробирке, в которую вы пипетируете, и медленно нажмите поршень. На этот раз нажмите на нее как можно сильнее, чтобы удалить весь образец. Удалите наконечник пипетки из раствора, отпустите поршень и выбросьте наконечник.

Вместо автоматических пипеток можно использовать серологические пипетки и пипеточные насосы.Эти пипец даст очень точные измерения объема. Возможно приобрести предварительно стерилизованное серологические пипетки нескольких размеров. У вас должен быть набор пипеточных насосов, чтобы учащиеся могли использовать с этими пипетками. Помните, что никогда не рекомендуется набирать жидкость ртом в рот. пипетка Нет даже стерильной воды!

Одноразовые пипетки с грушей также подходят для большинства экспериментов, описанных в этом руководстве. Три капли из пипетки с грушей на один миллилитр примерно равны 0.1 мл. Громкость измерения не такие точные, но эти пипетки дешевы и не требуют использования пипеток насосы. Эти пипетки также можно приобрести предварительно стерилизованными и в индивидуальной упаковке. То обертки предварительно стерилизованных пипеток обеспечивают удобный стерильный держатель пипетки во время Экспериментальная процедура.

J. Создание субкультуры дрожжей

Питательные вещества для дрожжей могут поставляться в виде твердой или жидкой среды.Когда дрожжи напрягаются поступают от поставщика, они обычно растут на скошенном агаре. Если вы держите эти наклоны плотно закрытые и охлажденные вы можете хранить их до одного года. Небольшие наклоны позволяют использовать зубочистки для перемещения дрожжей. Лучше всего иметь свежие культуры для экспериментов. Итак, день перед тем, как вы собираетесь использовать дрожжи, перенесите небольшое количество клеток из исходной культуры в свежую средний (обычно YED). Для переноса клеток можно использовать обожженную петлю, но можно использовать стерильную зубочистку. обычно проще.Прикоснитесь зубочисткой к ячейкам в наклоне; вам не нужно передавать много ячеек. Сделать штрих из клеток на поверхности агара; постарайтесь не поцарапать поверхность агара. Этот Процедура выращивания свежих дрожжей называется пересевом. Вы должны пересев не менее 12 часов прежде чем вы собираетесь использовать дрожжи.

Иногда культуры отправляются из центров хранения дрожжей на молочных бумагах. Чтобы сделать свежий пересев: стерильно откройте фольгу и с помощью стерильных щипцов поместите небольшой квадрат молочной бумаги на стерильной чашке с агаром YED.Если несколько раз протереть бумагой агар, должно получиться использовать отдельные колонии, и на месте размещения бумаги вырастет большое пятно клеток. Это займет от 3 до 5 дней для многих штаммов, культивируемых таким образом, чтобы вырасти до подходящего размера. Культуры отправлены Таким образом, они менее уязвимы к неблагоприятным погодным условиям и длительному времени в пути.

K. Изоляция одиночных колоний

Многие эксперименты требуют выращивания колоний из изолированных одиночных клеток.Это легко Высеивают культуры штрихом на чашку с агаром с помощью плоского конца зубочистки. То Цель метода состоит в том, чтобы развести клетки на поверхности агара последовательными, перекрывающимися полосами, пока отдельные клетки не разделятся или не распределятся с образованием изолированных одиночных колоний. Фигура 11>ниже показана техника, которую вы должны практиковать, пока не овладеете ею.

Рисунок 11: Изоляция одиночных колоний

Первым шагом является сделайте одну короткую полоску клеток (длиной около 2 см) у края агара в чашке Петри.Свежей зубочисткой сделайте вторую полосу внахлест под углом примерно 15 градусов к первый, перетаскивая ячейки с первой полосы на свежий агар. Сделайте еще несколько параллельных полос с та самая зубочистка. Затем возьмите новую зубочистку и повторить процесс, начиная с конца последнего полоса. Повторяйте эту последовательность, пока вся пластина не был покрыт. Поскольку популяция клеток, производится из одного родительская клетка является клоном, это процесс клонирования дрожжи.Если культура не является чистой по какой-либо причине, это обеспечивает метод выделения чистых клонов. То Тот же результат может быть достигнут с помощью пламенного и охлаждаемая петля на каждом шагу, где находится свежая зубочистка использовал. Этот подход медленнее и рискует поджарить клетки.

Л. Реплика Покрытие

В некоторых экспериментах мы переносим многие культуры из одного вида среды к одному или нескольким другим видам, к определяют рост культур требования.Это можно сделать с помощью зубочистки или петли, но если их очень много штаммов, которые нужно перенести, становится трудоемкий. Простой и быстрый метод — покрытие реплик — сыграло важную роль в развитие микробной генетики и является одним из величайших средств экономии труда всех время. Эксперименты, описанные ниже можно обойтись и без этой техники, но это увлекательно и стоит проблема его настроить. Даже при скромных эксперименты, старания хорошие инвестиции в долгосрочной перспективе.

Принцип репликации покрытия заключается в следующем. что резиновый штамп.

Рисунок 13: Реплика покрытия

Штамп из хлопкового вельвета используется для штамповки копии рисунка. клеток, растущих на одной чашке, на одну или несколько других чашек. Аппарат состоит из цилиндрический держатель для вельвета, размер которого идеально подходит для размещения на дне чашки Петри. тарелка и какое-то кольцо, чтобы удерживать вельвет на месте. Для стандартных пластиковых тарелок диаметром 10 см соответствующий диаметр составляет приблизительно 3.3 дюйма. Держатель может представлять собой цилиндр из дерева, металла, пластик или любой другой материал, который вы можете изготовить. Это может быть даже пищевая банка весом в один фунт или что-то другое. тяжелый цилиндрический контейнер, если дно плоское. (Круг, вырезанный из пенопластового лотка для мяса, плоская поверхность, чтобы положить на банку с едой) Кольцо для удержания вельвета может быть большим зажимом для шланга, некоторые другой найденный предмет или даже большая резинка.

Вельвет, конечно, нужно стерилизовать, а свежескроенный хлопковый вельвет обычно нуждается в стерилизации. перед стерилизацией необходимо удалить ворсинки с помощью кусочка малярной ленты.Автоклавируйте и высушите его тщательно. Мы используем шестидюймовые квадраты, которые складываем и заворачиваем в бумагу, автоклавируем, а затем сушим на настройке вакуума. Если автоклав недоступен, высушите их в теплой духовке или просто дайте им сидеть на прилавке, пока они не высохнут. Чтобы повторно использовать вельветовые квадраты, промойте их в простой воде и повторно стерилизовать. Вместо хлопка можно использовать другие ткани, такие как несколько слоев хлопчатобумажной марли. вельвет.

Чтобы создать копию пластины, переверните мастер-пластинку с дрожжами на вельвет на держатель и плотно прижмите пластину к стерильной поверхности ткани.Затем медленно снимите тарелку выключается, оставляя копию или отпечаток клеточного рисунка на вельвете. Перенести реплику на вельвета на одну или несколько стерильных пластин, осторожно прижимая каждую пластину к вельвету и вытащить его. С одной мастер-пластины можно сделать до 20 копий, если необходимо. Процедура показана на рисунке 13.

То, как вы снимаете тарелку с вельвета, определяет количество дрожжи переносятся с вельвета на тарелку или с тарелки на вельвет.Если вы очистите мастер-пластину с вельвета медленным, перекатывающим движением, на бархате останется больше дрожжей, чем если бы вы это с быстрым вертикальным движением. Желательно перенести как можно меньше клеток и при этом быть возможность увидеть отпечаток клеток на реплике пластины.

M. Оценка количества дрожжевых клеток в Культура

Существует много способов непосредственного подсчета клеток, наиболее распространенный из которых использует подсчет клеток. камеры для микроскопа или электронные счетчики частиц.Они имеют мало поучительного значения в генетики и не подходят для общего использования в классе. Поэтому мы разработали эксперименты, которые не зависят от точного подсчета частиц. Когда необходим подсчет клеток, мы определить их по количеству колоний на чашках (см. Разведение и посев Процедуры ).

Однако многие эксперименты требуют приблизительных оценок числа клеток в жидкой суспензии, чтобы получить достаточное количество посевных колоний.Для этого вы будет использовать один из самых сложных и чувствительных оптических инструментов: человеческий глаз. С удивительно небольшой практикой вы можете научиться оценивать количество клеток в суспензии. просто глядя на это.

Визуальная оценка плотности клеток основана на достаточно резком пороге наблюдения глаз. мутность. При осмотре в стандартной пробирке 13 х 100 мм дрожжевые суспензии менее примерно 1 млн клеток на мл визуально не мутные.Выше этой пороговой плотности они заметно облачны. К регулируя количество клеток в суспензии до едва заметного, можно получить суспензию известной плотности (примерно 1 х 106 клеток/мл), а затем использовать серийные разведения для получения других концентрации. (См. также эксперимент Серийные разведения и подсчет жизнеспособных клеток )

Материалы:

  • Стерильные, с крышками 13 x 100 мл культуральных пробирок
  • Стерильная вода
  • Стерильные пипетки на 1 мл (одноразовые пипетки с грушей или серологические пипетки и пипеточный насос)
  • Микропипетка и стерильные наконечники (дополнительно)

Процедура:
а.Поместите 1-2 мл стерильной воды в пробирку.
б. Используйте охлажденную, нагретую петлю для посева или стерильную зубочистку, чтобы подвесить небольшой количество дрожжей размером с булавочную головку в воде.
в. Тщательно перемешайте суспензию, свободно удерживая пробирку за ее верхнюю часть. между большим и указательным пальцами и постукивая по нему снизу ладонью одного или нескольких пальцев другой руки, создавая завихрение движение.(Ударное движение напоминает жест, который можно было бы сделать, чтобы мани кого-нибудь сюда)
Эта суспензия должна содержать примерно 1 х 107 клеток/мл, но это плотность трудно судить, поэтому мы разбавим его, прежде чем судить о его плотность.
д. С помощью стерильной пипетки на 1,0 мл внесите 0,9 мл стерильной воды в пробирку.
е. Разбавить 0.В эту пробирку налейте 1 мл вашей клеточной суспензии и ударьте по ней. Сравните это трубкой со стерильной водой. Если пробирка с клетками едва мутная, тогда он содержит почти 1 х 106 клеток/мл.
ф. Если пробирка визуально не мутная, добавьте дополнительные объемы 0,1 мл оригинальная подвеска пока есть. Если вы думаете, что это более мутно, чем предел видимости, затем добавьте больше стерильной воды.Отрегулируйте объемы воды и клеток пока не убедишь. Следите за объемами, которые вы добавляете, чтобы знать окончательное разбавление, которое вы сделали.

N. Процедуры разбавления и посева

Во многих экспериментах необходимо распределить приблизительно известное количество клеток на пластине. разрастаться в колонии. Используем серийные разведения, делая несколько небольших разведений одно за другим, вместо того, чтобы сделать одно большое разбавление.Метод экономит материал и позволяет избежать использования больших объемы, которые трудно измерить и стерилизовать.

Материалы:

  • Стерильные, с крышками 13 x 100 мл культуральных пробирок
  • Стерильная вода
  • Стерильные пипетки на 1 мл (одноразовые пипетки с грушей или серологические пипетки и пипетка насос)
  • Микропипетка и стерильные наконечники (дополнительно)
  • Скрепка для бумаг или шпатель для стекла: клетки распределяются по поверхности агар с разбрасывателями.

Приготовление серийных разведений:
Следующая процедура дает серию разведений, которые различаются в десять раз. Вы сможете использовать эту процедуру для большинства экспериментов, требующих последовательного разведения (рис. 12).

Рис. 12. Посев с последовательным разведением Стратегия

а. Приготовьте суспензию, содержащую приблизительно 1 х 106 клеток/мл в стерильной воды, используя процедуру, описанную в Оценка количества дрожжей Клетки в культуре.
б. Пипетка 0,9 мл стерильная воды в каждую из трех трубы и промаркируйте их. Мы рекомендуем сделать схема в тетради показ процедуры и смысл твоего этикетки.
в. Ресуспензируйте клетки в подвеска оригинал. Отберите 0,1 мл с помощью микропипетки и свежего наконечника и перенесите его в одну из трубки воды.Затем ударьте по трубке, чтобы подвесить клетки.
д. Повторяйте процедуру последовательно, используя новую пипетку или наконечник пипетки для каждого из остальные пробирки, так что каждая пробирка содержит 1/10 числа клеток, как Предыдущая. Третье разведение должно содержать примерно 1 х 103 клеток/мл.

Покрытие разведений:
Если вы ожидаете, что все клетки вырастут, то вы поместите только окончательное разведение, т.к. другие пробирки были бы слишком концентрированными, и пластины, сделанные из них, содержат слишком много колоний для подсчета.Однако в экспериментах с излучением вы используйте разведения, содержащие больше клеток, чтобы компенсировать уменьшенное количество клеток которые выдерживают облучение. Таким образом вы получите оптимальное количество колоний для количество на каждой чашке, даже когда большинство клеток мертвы.

е. У вас будут лучшие данные, если вы сделаете все покрытия в двух или трех экземплярах. Первый пометьте пластины маркером (Pilot SC-UF или Sharpie).(Ты будешь также используйте такую ​​же ручку для маркировки колоний при подсчете их.) Мы рекомендуем идентифицировать каждую пластину номером штамма, дозу (для радиационных экспериментов), разбавление и ваши инициалы, но вы Вы можете предпочесть закодировать эту информацию в своих заметках и поставить кодовые буквы или цифры на табличке. Пишите только на крышке или маленькими буквами по краю дно, оставляя дно свободным для маркировки колоний, когда вы посчитай их.

ф. Ресуспендируйте клетки в каждой пробирке, постукивая по ней перед взятием образца, затем пипеткой 0,1 мл в центр каждой из дубликатов пластин. Если вы используете разбрасыватели скрепок возьмите стерильный разбрасыватель из конверта. Если ты с помощью шпателя вынуть из спирта, поджечь в пламени, а после пламя погаснет, прикоснитесь им к агару одной из чашек вдали от клетки.Распределите клетки по поверхности любым шпателем, стараясь Держите клетки на расстоянии не менее 0,5 см от края агара. (Если вы используете методом высева пипеткой 0,1 мл суспензии в 0,9 мл стерильной вода. Смешайте клетки с водой. Вылейте всю смесь на агар. поверхности, затем наклоняйте и вращайте пластину до тех пор, пока смесь не будет равномерно распределена по поверхности агара.)

О.Микроскопическое исследование дрожжей

Самый простой способ исследовать дрожжи под микроскопом — посмотреть на них прямо на пластина. Это работает только с маломощными объективами (10x), потому что более мощные объективы слишком близко к агару и туману. Чтобы увидеть больше деталей, сделайте влажное слайд-препарат. Нанесите каплю воды на предметное стекло микроскопа. Перенесите небольшое количество дрожжей в воду с помощью стерильной зубочистки и перемешайте. немного. Затем положите покровное стекло на суспензию дрожжей на предметном стекле.Если подготовка будет просматривается несколькими учащимися, прикрепите покровное стекло к предметному стеклу лаком для ногтей, а предметное стекло будет доступен для просмотра в течение нескольких часов. Погружение в масло не должно быть необходимым и только для соблюдая форму клеток, окрашивать их необязательно. При подходящих методах окрашивания ядро можно увидеть, но хромосомы дрожжей слишком малы, чтобы их можно было увидеть при самом ярком свете. микроскопы.

Для демонстрации в классе вы можете использовать видеомикроскоп.Есть ряд очень хорошие видеомикроскопы, доступные на рынке. Если у вас его нет, то можно получить многие из тех же результатов с микроскопом в классе и домашней видеокамерой. Когда мы смотрим через микроскоп наши глаза сфокусированы на бесконечности. Если мы поместим видеокамеру рядом с окуляр микроскопа и установив фокус камеры на бесконечность, он «увидит» то же самое, что и наш глаза. Это помогает вырезать свет, проникающий сбоку, обернув объектив камеры и окуляр микроскопа кусочком темной ткани или алюминиевой фольги.

P. Штаммы дрожжей

В экспериментах используются следующие штаммы:

Гаплоиды:

BSCS Фонд
Штамм № Генотип2 9094 Комментарии Артикул Центральный номер
HA0 a Дикий тип; будет расти на MV a1 XP837-S10
HB0 1 XP837-S11
HA1 a ade1 Красный, требующий аденина; дикий XP300-38B
HB1 ade1 тип для ADE2 XP823-S34
HA2 Красный, требующий аденина; дикий
HAR a ade2 тип для ADE1 a2 XP832-S25
HB2, Красный, требующий аденина; дикий
HBR ade2 тип для ADE1 2 XP820-S4
HA12 a ade1 ade2 Красный, требующий аденина; двойной XP300-29C
HB12 ade1 ade2 мутанты XP300-40C
HAT a trp5 Белый, триптофан- требуется a3 XP837-S5
HBT trp5 3 XP837-S6
HART a ade2 trp5 Красный, требующий аденина, a4 XP837-S8
HBRT ade2 trp5 триптофан-требующий 4 XP837-S9
HA1L a ade1 leu2 Красный, аденин а также лейцин требуется
G948-1C/U рад1 рад18 частей1 ура3 мутант в эксцизионной репарации, склонной к ошибкам репарации и фотореактивация, требуется урацил
Диплоиды:
Штамм № Генотип Кросс
D02 а / ade2/ADE2 HA2 x HB0
D12 a / ade1/ADE1 ade2/ADE2 HA1 x HB2

Q. Облучение дрожжей ультрафиолетом Радиация

Стандартные бактерицидные УФ-лампы с разрядом паров ртути низкого давления. пробирки, являются идеальным источником УФ-излучения для облучения дрожжей дикого типа нормальными ферментами репарации ДНК.Солнце или кварцево-галогенные дворовые фонари являются хорошими источниками УФ для облучения мутантных штаммов. дрожжи с дефицитом нормальных ферментов репарации ДНК.

Стандартные бактерицидные лампы УФ-С представляют собой обычные люминесцентные лампы без люминесцентного покрытием и с оболочкой, прозрачной для ультрафиолета. Ртуть низкого давления спектр представляет собой линейчатый спектр с наиболее заметной линией, имеющей длину волны 253,7 нанометры. Это случайно близко к 260 нанометрам, которые оптимальны для поглощения ДНК.

Конструкция У.В. Радиационная камера продиктована несколькими соображениями, главное безопасность. (См. Инструкции по сборке камеры УФ-излучения ) Излучение, испускаемое бактерицидными лампами, вызывает болезненные и опасные ожоги глаз и кожи. поэтому они должны быть эффективно защищены. Воздействие на клетки нельзя контролировать, поворачивая лампа включается и выключается, потому что выходная мощность лампы сильно зависит от температуры.Поэтому его необходимо заключить в экранированный короб с затворным механизмом, чтобы он мог прогреться до постоянная температура перед использованием. Дверь и ставень должны быть заблокированы, чтобы они оба не могут быть открыты одновременно.

Порядок работы камеры УФ-излучения:

1. Подключите лампу и включите ее. Вы можете с уверенностью сказать, когда лампа на, увидев световой индикатор.
2. Дайте лампе прогреться в течение 30 минут, если это возможно.
3. Отцентрируйте чашку Петри, которую необходимо экспонировать, по отметке на дне коробку, снимите крышку пластины, аккуратно опустите дверцу и откройте затвор. Измерьте время экспозиции с момента открытия затвора. Когда время истекло, закройте затвор, аккуратно поднимите дверцу, наденьте крышку чашку Петри и снимите ее. Слишком быстрое движение двери приводит к попаданию воздуха турбулентность, которая может привести к загрязнению чашек с агаром.Если коробка оснащена лампой УФ-В, такая же процедура может быть последовал.

Процедура экспонирования с использованием солнечного или кварцево-галогенного дворового фонаря:

1. Накройте блюдо темной бумагой и, пока оно остается закрытым, блюдо под углом 90 градусов к источнику света. Если вы используете кварцевая галогенная лампа снимите стеклянную крышку с лампы. В то время как солнце и свет во дворе производят меньше УФ-излучения, чем бактерицидный трубки, все равно следует принимать разумные меры предосторожности.Не смотрите прямо у источника и избегайте любого длительного прямого воздействия на кожу.

ВНИМАНИЕ: Кварцевая галогенная лампа сильно нагревается. Использование этой лампы должно быть под прямым надзор учителя.

2. Снимите темную крышку с планшета и начните измерение время контакта. По истечении времени накройте блюдо и переместите его к инкубатору. Обычно нет необходимости снимать крышку с пластиковые чашки Петри при использовании солнечных или кварцевых галогенных фонарей как источник УФ.Большинство пластиковых чашек Петри прозрачны для длина волны ультрафиолетового излучения, создаваемого этими источниками. Вы можете запустить пробный опыт на каждой новой партии чашек Петри. Если вы получаете показатели выживаемости выше, чем вы ожидаете, вы можете захотеть снять веки при воздействии УФ. Если загрязнение становится проблемой, вы можете хотите накрыть посуду тонкой полиэтиленовой пленкой или пакетом для сэндвичей. Эти тонкие пластиковые пленки не будут поглощать значительное количество УФ-излучения.

Нажмите здесь, чтобы вернуться

Последнее обновление: среда, 24 февраля 1999 г.

Posted in Разное

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.