Асептика и антисептика | Septolit.ru
Что собой представляет асептика?
Асептикой называют комплекс мероприятий, направленных на предотвращение попадания микробов в рану. Под раной стоит понимать не только собственно хирургическую рану, но и различные нарушения целостности кожи вследствие косметологических процедур, маникюра, татуажа, пирсинга и т.д.
Можно утверждать, что суть асептики заключается в создании стерильных условий. Асептика осуществляется путем дезинфекции и стерилизации всех предметов, которые контактируют с раной. Также немаловажно проводить дезинфекцию всего помещения, в котором осуществляются манипуляции, т.к. болезнетворные микроорганизмы могут попадать в рану с загрязненным воздухом.
По большому счету асептика включает в себя:
Виды асептики
Существует два основных вида асептики: физический и химический. Методы физической асептики применяют главным образом для обработки инструментов, изделий, посуды, перевязочного материала, белья.
Методы физической асептики
Суть физических методов асептики заключается в обеззараживании объектов путем воздействия на них физическими факторами — высокой температурой, ультрафиолетовым излучением, ультразвуком и т.д.
Физическая асептика может осуществляться с помощью:
- Кипячения;
- Паровой стерилизации;
- Воздушной стерилизации;
- Ультрафиолетового облучения;
- Ионизирующего излучения;
- Ультразвука.
Основным методом обеззараживания инструментов и изделий является термическая стерилизация (паровая и воздушная). Проведение термической стерилизации подразумевает обеззараживание в специальных аппаратах — стерилизаторах. Так, спустя 25 минут стерилизации в паровых стерилизаторах (автоклавах) при температуре 132°С погибают абсолютно все микробы, а наиболее распространенные микроорганизмы умирают и вовсе через пару минут.
Стерилизация кипячением — один из наиболее древних методов асептики. Этим методом обычно обеззараживают изделия из металла, стекла или резины. Для проведения стерилизации потребуются специальные стерилизаторы для инструментов. Длительность стерилизации таким методом — 45 минут от момента закипания. Однако нужно помнить о том, что споры некоторых бактерий и определенные вирусы могут оставаться жизнеспособными даже после нескольких часов кипячения!
Метод стерилизации ультрафиолетовым излучением применяют для обеззараживания воздуха в помещении. Для этого используют УФ-лампы, которые оказывают бактерицидное действие.
Методы химической асептики
К химическим методам асептики относят обеззараживание с помощью химических средств (дезсредств). Асептическими свойствами обладают кислоты и щелочи, спирты, окислители, галоиды, альдегиды и другие группы веществ.
Обработка химическими средствами проводится двумя методами:
- Погружение в дезсредство;
- Протирание (распыление).
Согласно принципам асептики все инструменты и изделия многократного использования должны обрабатываться путем их полного погружения в рабочие растворы дезсредства. При этом важно выждать время экспозиции. После дезинфекции инструменты подвергают предстерилизационной очистке и термической стерилизации. Только такой алгоритм позволяет добиться стопроцентного обеззараживания инструментов.
Поверхности помещения (пол, подоконники, стены, двери), мебели и оборудования должны обрабатываться дезсредствами путем протирания. После каждого пациента/клиента проводится уборка помещения, во время которой дезинфицируют все поверхности, с которыми соприкасался посетитель. В конце рабочего дня дезинфицируются все помещение с мытьем полов, плинтусов, подоконников, оборудования и мебели.
Что такое антисептика?
Асептика и антисептика являются двумя разными понятиями. Если асептика направлена на недопущение попадания микроорганизмов в рану, то антисептика направлена на уничтожении инфекции уже попавшей в ткани. Антисептика — это уже более узкое медицинское понятие, по сути, представляющее собой лечение гнойной раны.
Антисептика осуществляется с помощью таких методов:
- Механических;
- Физических;
- Химических;
- Биологических.
Механическая антисептика — это уже не что иное, как хирургическое лечение раны. Она заключается в проведении врачом первичной хирургической обработки раны, удалении из нее омертвевших тканей, вскрытии абсцессов.
Физическая антисептика базируется на уничтожении микроорганизмов в ране с помощью физических явлений. К физической антисептике относят:
- Высушивание раны;
- Ультрафиолетовое облучение раны;
- Лечение раны ультразвуком и лазером;
- Использование гигроскопического перевязочного материала;
- Применение гипертонических растворов;
- Дренирование ран.
Химическая антисептика — это метод борьбы с нагноением раны при помощи различных химических веществ, которые способны вызвать гибель болезнетворных микроорганизмов. Также химический метод антисептики включает в себя обработку рук медработника/мастера бьюти-индустрии дезсредствами.
Суть биологической антисептики, как можно догадаться уже из названия, заключается в лечении гнойных ран препаратами биологического происхождения (антибиотиками, сыворотками, анатоксинами, ферментами).
Таким образом, асептика и антисептика в медицине — это два неразделимых принципа, соблюдение которых помогает предотвратить попадание и распространение инфекции в тканях человеческого организма.
Вернуться к списку публикаций
Биологическая стерилизация — МегаЛекции
Биологическая стерилизация основана на применении антибиотиков. Этот метод используют при культивировании вирусов.
Контрольные вопросы
1. Что такое химическая стерилизация и когда ее используют?
2. Что такое биологическая стерилизация?
Основные способы стерилизации представлены в табл. 4.
Таблица 4. Основные способы стерилизации
1 (Стерилизация неполная: в стерилизуемом материале сохраняются споры.)
2 (Стерилизация неполная: в стерилизуемом материале сохраняются вирусы.)
Дезинфекция
В микробиологической практике применяют различные дезинфицирующие вещества: 3-5% растворы фенола, 5-10% растворы лизола, 1-5% растворы хлорамина, 3-6% растворы перекиси водорода, 1-5% растворы формалина, растворы сулемы в разведении 1:1000 (0,1%), 70° спирт и др.
Дезинфекции подвергают отработанный патологический материал (гной, кал, моча, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость) перед сливом его в канализацию. Обеззараживание проводят сухой хлорной известью или 3-5% раствором хлорамина.
Загрязненные патологическим материалом или культурами микроорганизмов пипетки (градуированные и пастеровские), стеклянные шпатели, предметные и покровные стекла опускают на сутки в стеклянные банки с 3% раствором фенола или перекиси водорода.
По окончании работы с заразным материалом лаборант должен обработать дезинфицирующим раствором рабочее место и руки. Поверхность рабочего стола протирают кусочком ваты, смоченным 3% раствором фенола. Руки дезинфицируют 1% раствором хлорамина. Для этого ватный шарик или марлевую салфетку смачивают дезинфицирующим раствором и протирают левую кисть, потом правую, а затем моют руки теплой водой с мылом.
Выбор дезинфицирующего вещества, его концентрация и длительность воздействия (экспозиция) зависят от биологических свойств микроба и от той среды, в которой будет происходить контакт дезинфицирующего вещества с патогенными микроорганизмами. Например, сулема, фенол, спирты непригодны для обеззараживания белковых субстратов (гной, кровь, мокрота), так как под их влиянием происходит свертывание белков, а свернувшийся белок предохраняет микроорганизмы от воздействия дезинфицирующих веществ.
При дезинфекции материала, инфицированного споровыми формами микроорганизмов, применяют 5% раствор хлорамина, 1-2,5% растворы активированного хлорамина, 5-10% растворы формалина и другие вещества.
Дезинфекцию, которую проводят на протяжении всего дня по ходу работы, называют текущей, а по окончании работы — заключительной.
Дезинфицирующие вещества и прописи приготовления из них рабочих растворов. Хлорная известь — белый комковатый порошок с резким запахом хлора, в воде растворяется не полностью. Бактерицидный эффект зависит от содержания активного хлора, количество которого колеблется от 28 до 36%. Хлорная известь, содержащая менее 25% активного хлора, для дезинфекции непригодна.
При неправильном хранении хлорная известь разлагается и теряет часть активного хлора. Разложению способствуют тепло, влага, солнечный свет, поэтому хранить хлорную известь следует в сухом, темном месте, в плотно закрытой таре.
Сухую хлорную известь применяют для обеззараживания выделений человека и животных (из расчета 200 г на 1 л испражнений и 10 г на 1 л мочи).
Приготовление исходного 10% осветленного раствора хлорной извести. Берут 1 кг сухой хлорной извести, помещают в эмалированное ведро и измельчают. Затем заливают холодной водой до объема 10 л, хорошо перемешивают, закрывают крышкой и оставляют на сутки в прохладном месте. После этого образовавшийся 10% осветленный раствор осторожно сливают и отфильтровывают через несколько слоев марли или процеживают через плотную ткань. Хранят в бутылях из темного стекла, закрытых деревянной пробкой, в прохладном месте, не более 10 сут. Рабочие растворы необходимой концентрации готовят из основного раствора непосредственного перед их употреблением. Количество основного раствора, необходимое для приготовления 0,2-10% осветленных растворов хлорной извести, приведено в табл. 5.
Таблица 5. Схема приготовления растворов хлорной извести
Концентрацию осветленных растворов хлорной извести от 0,2 до 10% выбирают в зависимости от характера обеззараживаемого объекта и устойчивости возбудителя.
Хлорамин — кристаллическое вещество белого или желтоватого цвета, содержит 24-28% активного хлора. Хорошо растворяется в воде при комнатной температуре, поэтому растворы его готовят непосредственно перед дезинфекцией. Пользуются 0,2-10% растворами хлорамина. Соотношение между процентной концентрацией раствора и количеством хлорамина в граммах на 1 и 10 л приведено в табл. 6.
Таблица 6. Схема приготовления различных растворов хлорамина
Растворяют хлорамин в стеклянной или эмалированной посуде. При хранении растворов хлорамина в посуде из темного стекла с притертой пробкой их активность сохраняется до 15 сут.
Активированный хлорамин. Дезинфицирующие свойства хлорамина усиливаются при добавлении к нему активатора в соотношении 1:1 или 1:2. В качестве активатора используют аммонийные соединения — хлорид, сульфат, нитрат аммония. Применяется активированный хлорамин в концентрации 0,5, 1 и 2,5%. Готовят их непосредственно перед употреблением. Раздельно отвешивают хлорамин и соль аммония. Сначала растворяют в воде хлорамин, а затем прибавляют активатор.
Преимущество активированных растворов хлорамина перед обычными заключается в том, что при добавлении активатора ускоряется выделение активного хлора. Поэтому препарат губительно действует не только на вегетативные формы микроорганизмов, но и на их споры. Активированный хлорамин применяют в более низких концентрациях и при меньшей экспозиции.
Фенол (карболовая кислота) представляет собой бесцветные кристаллы игольчатой формы с резким характерным запахом. Под действием света, воздуха и влаги кристаллы приобретают малиново-красный цвет. Хранят в закрытых банках из темного стекла и в защищенном от света месте.
Фенол растворим в воде, спирте, эфире, жирных маслах. Обладая большой гигроскопичностью, поглощает из окружающей среды влагу и становится жидким. Жидкая карболовая кислота содержит 90% кристаллического фенола и 10% воды.
Применяют 3-5% водные растворы карболовой кислоты, приготовленные из кристаллического фенола и жидкой карболовой кислоты по схеме, приведенной в табл. 7. Активность фенола повышается при растворении его в горячей воде (40-50° С).
Таблица 7. Схема приготовления различных растворов карболовой кислоты
Внимание! Кристаллический фенол или жидкая карболовая кислота, попадая на кожу, могут вызвать ее раздражение, а в больших концентрациях — тяжелые ожоги. Поэтому обращаться с карболовой кислотой нужно с большой осторожностью. При изготовлении растворов следует надевать резиновые перчатки или в крайнем случае смазать руки вазелином.
В случае попадания карболовой кислоты на кожу необходимо немедленно смыть ее теплой водой с мылом или 40° этиловым спиртом.
Примечание. Для приготовления дезинфицирующих растворов фенола удобнее и безопаснее использовать жидкую карболовую кислоту.
Контрольные вопросы
1. Какие дезинфицирующие вещества применяют в микробиологической практике?
2. Опишите внешний вид и основные свойства хлорной извести, хлорамина, фенола.
3. Какие растворы дезинфицирующих веществ используют для обеззараживания материала, инфицированного споровыми формами микроорганизмов?
Задание
Приготовьте 2 л 5% рабочего раствора осветленной хлорной извести; 500 мл 3% раствора хлорамина, 300 мл 1% раствора активированного хлорамина.
Внимание! Прежде чем приступить к приготовлению растворов, сделайте расчеты.
Рекомендуемые страницы:
Воспользуйтесь поиском по сайту:
НПО «Альтернатива» — 5. МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ ПОСУДЫ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
Основываясь на влиянии внешних условий на микроорганизмы, в микробиологической практике разработан ряд приемов, приводящих микроорганизмы к гибели. Одним из таких приемов является стерилизация.
Под стерилизацией (обеспложиванием) понимают полное уничтожение микроорганизмов и их спор в питательных средах, посуде, на инструментах и других предметах лабораторного оборудования. Для их стерильности наиболее часто пользуются воздействием высокой температуры.
5.1. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ОБЖИГАНИЕМ НА ПЛАМЕНИ ГОРЕЛКИ
Небольшие стеклянные (палочка, шпатель) и металлические (игла, петля, пинцет, скальпель) предметы проводят несколько раз через пламя горелки. Стерилизация достигается обугливанием находящихся на их поверхности микроорганизмов. Обжиганием на пламени пользуются и для стерилизации поверхности ватных пробок.
Рис. 14
Значение температуры в разных
участках пламени газовой горелки
5.2. СТЕРИЛИЗАЦИЯ КИПЯЧЕНИЕМ
Стерилизацию металлических инструментов и резиновых трубок проводят кипячением. Так как споры некоторых бактерий сохраняют жизнеспособность при кипячении в воде в течение нескольких часов, то рекомендуется стерилизацию кипячением проводить в 2%-ном растворе карбоната натрия в течение 10 мин. В этих условиях споры погибают.
5.3. СТЕРИЛИЗАЦИЯ СУХИМ ЖАРОМ
Сухим жаром стерилизуют стеклянную посуду. При этом пробирки, колбы предварительно закрывают ватными пробками. Чтобы избежать заражения простерилизованных предметов из воздуха, их перед стерилизацией заворачивают в оберточную бумагу и вынимают только перед работой.
Пипетки перед стерилизацией с концов закрывают ватой. Затем их обертывают длинными полосками бумаги шириной 3,5–4 см. Бумагу наматывают по спирали, начинная с конца пипетки, который будет погружен в среду. Концы обертки закрепляют ниткой. Тонкие пипетки обертывают бумагой вместе по несколько штук.
Чашки Петри заворачивают в бумагу в форме квадрата, сторона которого приблизительно равна трем диаметрам чашки. Чашку Петри помещают на середину листа, загибают его с двух противоположных сторон кверху так, чтобы края налегали друг на друга. Два свободных конца загибают вниз. При таком обертывании у чашек легко различать верх и низ.
Подготовленную таким образом посуду помещают в сушильный шкаф, в котором нагревают ее при температуре 160–170°С в течение 2 ч (с момента установления нужной температуры). При таком нагревании погибают не только бактерии, но и их споры.
Температуру в сушильном шкафу выше 175°С допускать не следует, так как при этом ватные пробки буреют, а бумажная обертка становится ломкой.
5.4. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ТЕКУЧИМ ПАРОМ (ДРОБНАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ), ИЛИ ТИНДАЛИЗАЦИЯ
Питательные среды, воду, резиновые трубки и другие предметы, портящиеся от действия сухого жара, и питательные среды, портящиеся под действием высокой температуры (среды, содержащие молоко, солод, желатину), обеспложивают действием текучего пара.
Стерилизацию текучим паром производят в кипятильнике Коха или в автоклаве с открытым вентилем. Воду в них доводят до кипения, и образующийся пар обтекает стерилизуемые объекты. Температура стерилизуемых питательных сред достигает 100°С. Нагревание в течение 30–45 мин приводит к гибели вегетативных клеток бактерий, но споры их не погибают. Затем жидкость охлаждают до температуры, благоприятной для прорастания спор (до 30°С). Нагревание приводит к активации спор и более быстрому их прорастанию. На следующий день нагревание повторяют. При этом погибают вегетативные клетки, развившиеся из спор. Для обеспечения полной стерильности жидкость оставляют еще на сутки и снова повторяют нагревание. Такую стерилизацию называют дробной или тиндализацией.
5.5. ПАСТЕРИЗАЦИЯ
В основе пастеризации лежит нагревание жидкостей до температуры меньше 100°С. Целью ее является уничтожение неспороносных бактерий в жидкостях, теряющих питательные свойства при кипячении (молоко, пиво, вино и др.). Осуществляется пастеризация путем нагревания жидкостей при 60°С в течение 30 мин, или при 75°С в течение 15 мин, или при 80°С в течение 10 мин.
5.6. ХОЛОДНАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ
Органические жидкости, не выносящие нагревания, освобождают от бактерий, пропуская через стерильные мелкопористые фильтры. Эти фильтры задерживают микроорганизмы, их называют бактериальными фильтрами.
Бактериальные фильтры имеют разные номера. Фильтры № 1 имеют средний диаметр пор 0,3 мкм и являются наиболее надежными. Фильтры № 5 имеют самые большие отверстия пор, диаметром 1,2 мкм.
Перед употреблением мембранные фильтры стерилизуют кипячением. Фильтры помещают в теплую дистиллированную воду и кипятят 30 мин, меняя 2– 3 раза воду.
5.7. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ПАРОМ ПОД ДАВЛЕНИЕМ (АВТОКЛАВИРОВАНИЕ)
Наиболее надежным и универсальным методом стерилизации питательных сред и материалов является стерилизация их насыщенным паром под давлением. Производят ее в автоклаве, в котором стерилизуемые объекты нагревают чистым насыщенным паром при давлении выше атмосферного. Когда насыщенный пар встречается с более холодным объектом, он конденсируется, превращаясь в воду. При конденсации выделяется большое количество теплоты, и температура стерилизуемого объекта быстро повышается.
Полная стерилизация питательных сред при 120°С и давлении 0,1 МПа обеспечивается нагреванием в течение 20 мин.
5.7.1. ПРАВИЛА РАБОТЫ С АВТОКЛАВОМ
Стерилизация в автоклаве производится при повышенном давлении, поэтому работа с ним требует определенной осторожности. Исправность автоклава в определенные сроки проверяют специалисты, которые устанавливают следующий срок проверки.
Системы автоклавов различаются, но все они имеют общие принципы устройства (рис. 15), и правила работы с ними однотипны.
Во внутренний котел автоклава (стерилизационную камеру) помещают материал, подлежащий стерилизации.
В водопаровую камеру наливают воду с таким расчетом, чтобы уровень ее в водомерной трубке был между верхней (максимальной) и нижней (минимальной) чертой.
Рис. 15
Устройство автоклавов:
а – вертикальный автоклав: 1 – подставка, 2 – водомерная трубка, 3 – воронка, 4 – предохранительный клапан, 5 – манометр, 6 – крышка, 7 – винтовые зажимы, 8 – котел, 9 – кожух, 10 – камера стерилизации, 11 – водопаровая камера, 12 – паровыпускной клапан;
б – горизонтальный автоклав: 1 – постамент, 2 – нагревательный элемент. 3 – крышка котла, 4 – предохранительный клапан, 5 – вентиль, 6 – кожух, 7 – паровая камера, 8 – стерилизационная камера, 9 – манометр паровой камеры, 10 – трехходовой кран, 11 – сифонная трубка паровой камеры, 12 – опорное кольцо, 13 – крышка паровой камеры, 14 – штурвал, 15 – впускной кран,
16 – манометр котелка, 17 – трехходовой кран котелка, 18 – сифонная трубка котелка, 19 – патрубок, 20 – воронка, 21 – водоуказательная колонка, 22 – котелок.
Крышку автоклава привинчивают болтами к корпусу. Завинчивают болты попарно, крест-накрест, чтобы избежать перекоса крышки, который может возникнуть при завинчивании болтов по кругу.
Открывают краны и включают источник обогрева. Когда пар из выпускного крана начинает выходить непрерывной струей, его закрывают и наблюдают за постепенным повышением давления в рабочей камере по манометру.
Отсчет времени стерилизации начинают с того момента, когда в автоклаве установится заданное давление.
Таблица 5
Зависимость давления и температуры в камере автоклава
Между показаниями манометра и температурой кипения воды имеется определенная зависимость (табл. 5). Время от времени эти соотношения следует проверять. Нарушение их указывает на неисправность автоклава и на необходимость его ремонта.
Проверку осуществляют следующим образом: в стерилизационную камеру автоклава помещают 100 г бензойной кислоты с добавлением небольшого количества фуксина или метиленового синего. Если при показании манометра в 0,1 МПа бензойная кислота расплавится, образуя с красителем сплав, то, значит, автоклав дает нужную температуру (120°С).
После окончания заданного срока стерилизации источник нагрева выключают, перекрывают вентиль водопаровой камеры и только после этого постепенно открывают выпускной клапан. При быстром выпускании пара могут быть вырваны ватные пробки из стерилизуемой посуды.
После полного выхода пара отвинчивают болты крышки (снова крест-накрест) и открывают ее, ориентируя крышку на себя для защиты от выходящего пара.
Если во время стерилизации давление начинает подниматься выше заданного уровня, его регулируют, уменьшая нагрев или выпуская часть пара через предохранительный клапан. Последний должен быть отрегулирован так, чтобы при повышении давления излишек пара выходил автоматически.
Приемы и способы стерилизации в биотехнологии
Стерилизация (от лат. sterilis — бесплодный) — полное освобождение различных веществ, предметов от живых микроорганизмов. Среди физических факторов, влияющих на рост и размножение микроорганизмов, наибольшее значение имеет температура. Простейшим способом стерилизации является обжигание металлических и стеклянных предметов в пламени горелки.Стерилизация сухим жаром производится в сушильных шкафах при 160-165 °С в течение двух часов. Таким методом стерилизуют лабораторную посуду, металлические предметы, некоторые порошкообразные, не портящиеся при нагревании вещества. Стерилизация водяным паром под давлением производят в автоклавах.
Насыщенный пар под давлением убивает микроорганизмы и споры быстрее, чем перегретый пар. Сухой воздух (жар) убивает микроорганизмы при более высокой температуре, чем водяной пар. Гибель клеток бактерий, грибов, дрожжей и вирусных частиц при стерилизации высокой температурой происходит либо в результате сгорания клеток, либо в результате коагуляции белковых структур микроорганизмов.
Основным недостатком термической стерилизации, несмотря на ее широкое практическое использование, следует считать неизбежные потери питательных свойств среды, поскольку при температурах, необходимых для стерилизации (120-150 °С), большинство субстратов, особенно углеводы, оказываются термически нестабильными.
Осмотическое давление отрицательно влияет на биохимическую активность микроорганизмов. Повышение концентрации солей задерживает развитие многих бактерий, однако есть виды, способные развиваться в присутствии концентрированных растворов солей, такие бактерии называют осмофильными (галофильными). Осмотическое давление в клетке регулирует цитоплазматическая мембрана.
При высоком осмотическом давлении окружающей среды происходит плазмолиз. Плазмолиз явление обратимое, и если понизить осмотическое давление окружающего микроорганизмы раствора, вода поступает внутрь клетки и возникает явление, противоположное плазмолизу.
Ультрафиолетовая компонента солнечного света является главной причиной гибели микробов в наружном воздухе.
Смертность микроорганизмов на открытом воздухе достигает 90-99 %, но зависит от вида микроорганизма и может варьировать от нескольких секунд до пары минут. Споры и некоторые виды бактерий окружающей среды имеют стойкость к воздействию солнечного света и могут переносить длительное облучение светом без особого вреда своему организму. Энергия ультрафиолетовой компоненты солнечного света вызывает повреждения микроорганизмов на клеточном и генетическом уровнях, тот же самый ущерб наносится людям, но он ограничен кожей и глазами.
Искусственные источники ультрафиолетового излучения (УФИ) используют гораздо более сконцентрированные уровни излучения, нежели те, что представлены в обычном солнечном свете. Ультрафиолетовые лучи распространяются по прямой и действуют преимущественно на нуклеиновые кислоты, оказывая на микроорганизмы как летальное, так и мутагенное воздействие. Бактерицидными свойствами обладают только те лучи, которые адсорбируются протоплазмой микроклетки.
Биофизическое действие УФИ на генетический или функциональный аппарат бактерий выглядит следующим образом: излучение вызывает деструктивно-модифицирующее повреждение ДНК, нарушает клеточное дыхание и синтез ДНК, что приводит к прекращению размножения и лизису микробных клеток. В нарушении синтеза ДНК основным является окисление сульфгидрильных групп, что вызывает инактивацию нуклеотидазы и гибель микробной клетки в первом или последующих поколениях.
Сила проникновения ультрафиолетовых лучей невелика. Тонкий слой стекла достаточен для того, чтобы не пропустить их. Действие лучей ограничивается поверхностью облучаемого предмета, его чистота имеет большое значение. УФИ высокоактивно, если микроорганизмы и частицы пыли расположены в один слой, при многослойном расположении верхние защищают нижележащие.
Защитная оболочка вокруг бактериальной клетки препятствует достижению антимикробного действия. В любой живой клетке существуют биохимические механизмы, способные полностью или частично восстанавливать исходную структуру поврежденной молекулы ДНК. Благодаря радиационному мутагенезу, уцелевшие микроорганизмы способны образовывать новые колонии с меньшей восприимчивостью к облучению.
Вероятностный характер стерилизации УФИ изучен в достаточной степени, существуют различные уравнения, характеризующие процесс отмирания бактерий. Эффективность биоцидного действия УФИ зависит от длины волны, интенсивности облучения, времени воздействия, видовой принадлежности обрабатываемых микроорганизмов, расстояния от источника, а также от состояния воздушной среды помещения: температуры; влажности; уровня запыленности; скорости потоков воздуха.
Метод заслуженно считается эффективным для обеззараживания поверхностей, при этом доказаны микробиологическое и экономическое преимущество УФИ или его эквивалентная эффективность химическим методам. При использовании ультрафиолетовых облучателей лимитирующим фактором является предельно допустимая доза облучения людей, а не доза, требуемая для уничтожения микроорганизмов в воздухе помещения.
Влияние ультразвуковых волн. Ультразвуком (УЗ) называются механические колебания с частотой, превышающей 18 кГц (18 000 колебаний в секунду). УЗ получают с помощью высокочастотного генератора, который превращает частоту электросети в электрический ток высокой частоты. Колебания электрического тока высокой частоты посредством пьезоэлектрического преобразователя превращаются в механические колебания, которые передаются в резервуар с жидкостью.
При частоте колебания 1 ,0-1,3 мГц в течение 10 мин оказывает бактерицидный эффект на клетки микроорганизмов. Ультразвук способствует разрыву клеточных стенок и мембран, повреждению флагеллина у подвижных форм микроорганизмов. Влияние ультразвука основано на механическом разрушении микроорганизмов в результате возникновения высокого давления внутри клетки. Это позволяет использовать его в качестве стерилизующего агента, а также применять для инактивации и дезинтеграции вирусов с целью получения антигенов и вирусных вакцин.
Стерилизация инфракрасными лучами. Инфракрасные, или тепловые, лучи составляют часть спектра световой радиации, простирающуюся от красного конца видимого спектра в область длинных волн. Источником инфракрасных лучей являются любые нагретые тела. Практически для этой цели могут быть использованы специальные зеркальные тепловые лампы накаливания, выпускаемые отечественной промышленностью.
Особенность передачи лучистой энергии заключается в том, что промежуточный слой воздуха между термоизлучателем и облучаемым материалом не нагревается и потери тепла в окружающую среду невелики. Различные типы бактерий в разной степени стойки к ультрафиолетовым излучениям. Так, особостойкими являются споры, многие из которых не теряют своих вегетативных свойств.
Высокая влажность воздуха повышает сопротивляемость бактерий, а в тонком слое воды на стерилизацию требуется примерно в десять раз больше энергии по сравнению с той, которая нужна для гибели тех же микроорганизмов в воздухе. С увеличением толщины слоя воды бактерицидные свойства ультрафиолетовых лучей приближаются к нулю.
Стерилизация озоном. Механизм инактивации воздушной микрофлоры озоном очень похож на действие озона в воде.
Сначала озон воздействует на оболочку микроорганизмов путем реакции с двойными связями липоидов. Затем, благодаря способности разрушать дегидрогеназы клетки, озон воздействует на ее дыхание. В результате нарушения проницаемости оболочки и изменения растворимости белков клетка лизируется. Обнаружено проникновение озона внутрь микробной клетки, вступление его в реакцию с веществами цитоплазмы и превращение замкнутого плазмида ДНК в открытую ДНК, что снижает пролиферацию бактерий.
Противовирусное действие озона связывается с разрушением вирусных частиц, инактивацией обратной транскриптазы и влиянием на способность вируса связываться с клеточными рецепторами. Капсулированные вирусы более чувствительны к действию озона. Это объясняется тем, что капсула содержит много липидов, которые легко взаимодействуют с озоном.
Наблюдается известное различие между разными видами микроорганизмов по их сопротивляемости действию озона. Довольно быстро погибают возбудители ангины, дифтерии, различные плесени. Как правило, наиболее устойчивы микробы, покрытые оболочкой, как например туберкулезная палочка и микробные споры. Эффективность стерилизующего действия озона зависит от его концентрации, экспозиции, температуры, влажности, вида микроорганизма, pH и исходной обсемененности обеззараживаемого воздуха.
Озон в низких концентрациях (около 0,2 мг/м3) не очень эффективен для уничтожения бактерий, так как они восстанавливаются спустя некоторое время после обработки. В этих случаях озон оказывает лишь поверхностное действие (контактируя с внешней оболочкой клетки) и незначительно проникает вглубь. Для полной инактивации микрофлоры помещения необходима высокая концентрация озона и длительное время для контакта с микроорганизмами. Оксиды азота усиливают бактерицидные свойства озона, которые в значительной степени зависят от влажности воздуха. При относительной влажности воздуха ниже 45 % озон почти не оказывает бактерицидного действия, а оптимум его активности лежит между 60-80 % влажности.
В профессиональных целях для стерилизации воздуха помещения в присутствии людей генератор озона служить не может, поскольку концентрация озона в несколько раз превышает ПДК для человека. Высокая концентрация выделяющегося озона приводит к деструкции. Таким образом, озонирование высокоэффективно для стерилизации поверхностей и воздушной среды помещения. Невозможность использования метода в присутствии людей и необходимость проводить обеззараживание в герметичном помещении серьезно ограничивает сферу его профессионального применения.
Воздействие химического агента. По химическому составу противомикробные антисептические вещества можно разделить на несколько групп. Например, галогены — препараты йода и хлора, они нарушают ферментативные структуры бактериальной клетки, угнетают гидролитическую и дегидрогеназную активность бактерий, инактивируют такие ферменты, как амилазы и протеазы.
Перекись водорода, перманганат калия, как и галогены, обладают окислительным действием. Кислоты и их соли, щелочи, спирты и альдегиды повреждают поверхностные структуры бактериальной клетки, клеточную стенку и мембраны, нарушая их избирательную проницаемость и другие функции. Соединения тяжелых металлов обладают антиферментным механизмом действия на бактериальную клетку, при этом изменяется структура дыхательных ферментов, и разобщаются процессы окисления и фосфорилирования в митохондриях.
Красители обладают денатурирующим эффектом. К антисептическим химическим веществам относятся группы производных 8-оксихинолина и нитрофурана, которые также нарушают биосинтетические и ферментативные процессы в бактериальной клетке. К наиболее распространенным дезинфицирующим средствам относятся хлорсодержащие, фенольные, перекисные и аммониевые соединения.
Стерилизация твёрдых предметов, портящихся при нагревании (некоторые пластмассы, электронная аппаратура и др.), может быть осуществлена обработкой газами (например, окисью этилена в смеси с СО2 или бромистым метилом), спиртом, растворами сулемы.
Стерилизация растворов проводится также путем их пропускания через мелкопористые материалы, которые адсорбируют клетки микроорганизмов: каолин, асбест, фарфор и др. Широкое применение нашли мембранные фильтры их изготавливают из специально обработанной нитроцеллюлозы. Бактерии задерживаются пористыми перегородками не потому, что диаметр капиллярных ходов фильтра меньше, чем поперечник бактерий, а вследствие молекулярного притяжения и прилипания взвешенных тел к внутренним стенкам пор.
В принципе метод стерилизующей фильтрации является идеальным средством стерилизации лабильных, в том числе термически неустойчивых жидких и газовых сред, поскольку он может быть проведен при низкой температуре и требует лишь градиента давления по разные стороны мембраны.
Промышленная очистка и стерилизация воздуха. Как известно, в воздухе содержится взвешенных частиц до 109, в том числе микроорганизмов 0,8-10000 — 100000 на 1 м3. Среди микроорганизмов обнаружены бактерии и их споры, актиномицеты и аспоргенные дрожжи, вирусы и др. Наименьшие размеры, за исключением вирусов, имеют бактерии, диаметр которых 0,5-2,1 мкм и длина до 26 мкм.
Это требует при подготовке воздуха его стерилизации. Отечественный и зарубежный опыт показывает, что технологически и экономически оправданным является многоступенчатый способ продувания воздуха через волокнистые, зернистые или пористые материалы.
Для больших расходов воздуха широко распространена технологическая схема, представленная на рис. 7.15. Воздух на аэрацию в посевные и производственные ферментеры подается с помощью комрессора. Перед сжатием воздух проходит через масляный или сухой фильтры, где осуществляется его очистка от механических примесей. Нагретый в процессе компреммирования сжатый давлением 0,3 МПа воздух охлаждается в теплообменнике. После ресивера воздух охлаждается в теплообменнике для конденсации влаги. Выходящий из ресивера воздух нагревается в кожухотрубном аппарате.
Далее воздух проходит частичную очистку от микроорганизмов в фильтре грубой бактериальной очистки и полностью очищается от микроорганизмов в фильтре тонкой бактериальной очистки. Воздух, выходящий из ферментатора и инокулятора высушивается от влаги на фильтре, достигая расчетной допустимой концентрации микроорганизмов.
Рис. 7.15. Промышленная схема очистки воздуха: 1 — фильтр; 2 — компрессор; 3 — теплообменник; 4 — влагоотделитель; 5 — ресивер; 6 — теплообменник; 7 — головной фильтр (схема Н.А. Войнова)
Некоторые конструкции фильтров для биологической очистки воздуха представлены на рис. 7.16. Глубинный фильтр (рис. 7.16, а) представляет собой емкость, снабженную рубашкой с перфорированными решетками внутри. Между решетками укладывается волокнистый фильтрующий материал. В зависимости от напора сжатого воздуха плотность укладки стекловолокнистого фильтрующего материала составляет 100-500 кг/м.
Фильтр с тканью Петрянова (рис. 7.16, б) представляет собой стальной цилиндр с разъемной крышкой и коническим днищем. Внутри фильтра в трубной решетке на резьбе закреплены перфорированные цилиндры, обтянутые слоями ткани через которые проходит воздух и очищается. Фильтр стерилизуется паром с примесью формалина. Необходимая степень биологической очистки воздуха достигается при использовании в качестве фильтрующего материала пористых фильтрующих материалов. Фильтр такой конструкции представлен на рис. 7.16, в.
Известны эффективные металлокерамические фильтрующие элементы для очистки микробных частиц диаметром 0,3 мкм. Особенностью фильтрования с помощью этих элементов является тесная взаимосвязь между формой каналов фильтра с периодически изменяющимся диаметром сечения и скоростью движения воздушного потока в этих каналах. При движении воздуха через материал фильтра в нем возникают ультразвуковые колебания, приводящие к осаждению микроорганизмов на стенки фильтра. На основе фильтрующих металлокерамических элементов разработаны парные автоматические фильтрующие комплексы для грубой и тонкой биологической очистки воздуха.
Рис. 7.16. Схемы фильтров — а: 1 — корпус; 2 — крышка; 3 — решетки со слоем фильтрующего материала; 4 — днище; 5 — вход воздуха; 6 — выход воздуха; 7 — вход острого пара; 8, 9 — выход; б: 1 — корпус; 2 — фланец; 3 — фильтрующий фторопластовый элемент; 4 — прокладка; 5, 6 — вход и выход воздуха; в: 1 — корпус: 2 — крышка; 3 -
фильтр; 4, 5 — выход и вход воздуха (схемы Н.А. Войнова)
Отличительной особенностью таких комплексов является гарантированная микробиологическая надежность очистки и полная автоматизация их работы.
Н.А. Воинов, Т.Г. Волова
Опубликовал Константин Моканов
Методы и приемы стерилизации с использованием физических, химических, и биологических методов
⇐ ПредыдущаяСтр 25 из 37Следующая ⇒Для уничтожения микробов (бактерий, вирусов, грибов и простейших) на различных предметах и в материалах, используемых в медицине, в пищевой промышленности и в быту, применяют два способа: стерилизацию и дезинфекцию.
Стерилизация предполагает полную инактивацию микробов в объектах, подвергающихся обработке.
Существует три основных метода стерилизации: тепловой, лучевой, химический.
Для тепловой стерилизации применяют, в основном, сухой жар и пар под давлением.
Химическая стерилизация предполагает использование токсичных газов: оксида этилена, смеси ОБ (смеси оксида этилена и бромистого метила в весовом соотношении 1:2,5) и формальдегида и химических растворов.
Лучевая стерилизация осуществляется либо с помощью гамма-излучения, либо с помощью ускоренных электронов.
Еще одним способом стерилизации является фильтрование. Фильтрование с помощью различных фильтров (керамических, асбестовых, стеклянных), а в особенности мембранных ультрафильтров из коллоидных растворов нитроцеллюлозы или других веществ позволяет освободить жидкости (сыворотку крови, лекарства) от бактерий, грибов, простейших и даже вирусов. Для ускорения процесса фильтрации обычно создают повышенное давление в емкости с фильтруемой жидкостью или пониженное давление в емкости с фильтратом. В настоящее время все более широкое применение находят современные методы стерилизации, созданные на основе новых технологий, с использованием плазмы, озона.
Дезинфекция – процедура, предусматривающая обработку загрязненного микробами предмета с целью их уничтожения до такой степени, чтобы они не смогли вызвать инфекцию при использовании данного предмета. Как правило, при дезинфекции погибает большая часть микробов (в том числе все патогенные), однако споры и некоторые резистентные вирусы могут остаться в жизнеспособном состоянии.
Стерилизация – лучший способ обеззараживания. Однако, если отсутствует возможность подвергнуть предмет стерилизации, проводится дезинфекция. Например, нельзя простерилизовать бокс, в котором ведутся работы с заразным материалом, операционный стол, руки хирурга или оптиковолоконные микроскопы.
После дезинфекции, в отличие от стерилизации, нет необходимости защищать продезинфицированный материал от попадания микробов извне. До стерилизации предмет необходимо тщательно отчистить от грязи, крови, химических веществ (в том числе и лекарств) и вымыть, чтобы сократить количество микробов на нем. Дезинфекция нередко выполняется перед процедурой чистки для обеспечения безопасности медперсонала.
Различают три основных метода дезинфекции: тепловой, химический, УФ-облучение. Выбор того или иного метода также зависит от дезинфицируемого материала.
Тепловая дезинфекция. Очень эффективным является действие горячей воды и насыщенного пара. Рекомендуется следующее время воздействия: при 80°С – 10 мин, при 85°С 3 мин, при 90°С – 1 мин. При этом режиме погибают все вегетативные формы бактерий и большинство вирусов. Температура 100°С в течение 5 мин убивает все вегетативные формы бактерий и все вирусы.
Разновидностью тепловой дезинфекции является пастеризация — метод, созданный Л. Пастером и применяемый для обработки в основном молока, а также соков, вина и пива. При используемом обычно режиме – 60 — 70 °С в течение 20 — 30 мин погибает большинство вегетативных форм бактерий (особенно важно уничтожение бруцелл и Mycobacterium bovis), но сохраняется часть энтерококков, молочнокислых бактерий и споры. Поэтому пастеризованное молоко помещают на холод для предотвращения и прорастания спор и размножения бактерий.
Химическая дезинфекция проводится с помощью различных дезинфицирующих веществ.
Обеззараживанию с помощью данного метода подлежат, например, поверхность операционного стола, стены процедурного кабинета, кожа, некоторые инструменты — все то, что невозможно обработать теплом. Еще одним примером химической дезинфекции является хлорирование воды. Использование большинства дезинфицирующих веществ опасно для медперсонала, они загрязняют окружающую среду, многие из них дорогостоящи.
Ультрафиолетовое облучение (лучи с длиной волны 200-400 нм) производится с помощью специальных бактерицидных ламп (настенных, потолочных, передвижных и др.) для обеззараживания воздуха, различных поверхностей в операционных, перевязочных, микробиологических лабораториях, предприятиях пищевой промышленности и т. д. Действие ультрафиолетовых лучей приводит к разрушению ДНК микробов в результате образования тиминовых димеров.
Асептика и антисептика
Для профилактики внутрибольничных, и в особенности хирургических, инфекций применяют асептику и антисептику.
Асептика – это комплекс мер, направленных на предупреждение попадания возбудителя инфекции в рану, органы больного при операциях, лечебных и диагностических процедурах. Методы асептики применяют для борьбы с экзогенной инфекцией, источниками которой являются больные и бактерионосители.
Асептика включает: стерилизацию и сохранение стерильности инструментов, перевязочного материала, операционного белья, перчаток и всего, что приходит в соприкосновение с раной; дезинфекцию рук хирурга, операционного поля, аппаратуры, операционной и других помещений, применение специальной одежды, масок. К мерам асептики относится также планировка операционных (этаж, боксирование, вентиляция, кондиционирование воздуха и т. п.). Методы асептики находят также применение в микробиологических производствах, на предприятиях пищевой промышленности.
Антисептика – совокупность мер, направленных на уничтожение микробов в ране, патологическом очаге или организме в целом, на предупреждение или ликвидацию воспалительного процесса.
Антисептика включает различные методы: механические (удаление инфицированных некротизированных тканей, инородных тел и т.д.), физические (дренирование ран, введение тампонов, наложение гигроскопических повязок), химические (применение антисептиков), биологические (использование протеолитических ферментов для лизиса нежизнеспособных клеток, применение бактериофагов, антибиотиков). Обычно применяют комплекс этих методов.
Читайте также:
Семинар 3. Термические методы стерилизации
Семинар 3. Термические методы стерилизации
МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Стерилизация является одним из важнейших и необходимых приемов в микробиологической практике. Слово «стерилизация» в переводе с латинского означает «обеспложивание». В практической работе под стерилизацией понимают методы, применяемые для уничтожения всех форм жизни как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов. Микробиологи стерилизуют питательные среды, посуду, различные инструменты и другие необходимые предметы с целью не допустить развитие посторонних микроорганизмов в исследуемых культурах. Термин «стерильность» имеет абсолютное значение. Можно говорить только либо о стерильности, либо о нестерильности, но не может быть состояния «частичной или неполной стерильности», «близкого к стерильному», «почти стерильного».
Различают термическую и холодную стерилизацию. В микробиологии находят применение следующие способы термической стерилизации: прокаливание в пламени и обжигание, сухожаровая стерилизация (горячим воздухом), стерилизация насыщенным паром под давлением (автоклавирование), дробная стерилизация (тиндализация), кипячение. Из методов холодной стерилизации микробиологи используют стерилизацию фильтрованием, газообразными средствами, ультрафиолетовыми лучами и другими видами излучений.
Возможность и целесообразность применения того или иного способа определяются в первую очередь физико-химическими свойствами материала, подлежащего стерилизации, а иногда и целью исследования.
Процесс автоклавирования.
Отдельные операции процесса стерилизации в автоклавах разных типов могут быть несколько различными. Соответственно несколько различается и техника работы с ними, однако общий принцип проведения стерилизации в разных автоклавах одинаковый.
Перед работой осматривают автоклав и контрольно-измерительную аппаратуру. При наличии любой неисправности (смещение стрелки манометра с нуля, трещина на водомерной трубке и др.) работать с прибором нельзя. После осмотра автоклава в водопаровую камеру наливают воду до верхней отметки на водомерной трубке. В стерилизационную камеру на специальную подставку из дерева помещают стерилизуемый материал. Предметы следует размещать не слишком плотно, так как пар должен свободно проходить между ними, иначе они не нагреются до нужной температуры и могут остаться нестерильными. Загрузив стерилизационную камеру, устанавливают и плотно завинчивают крышку (дверь) автоклава. Затем открывают кран, соединяющий стерилизационную камеру с наружным воздухом, и включают нагрев.
После начала парообразования удаляют воздух из стерилизационной камеры. Это необходимое условие стерилизации, так как при одном и том же давлении температура чистого пара выше температуры смеси пара и воздуха. Если в автоклаве останется воздух, материал может не простерилизоваться. Наиболее простой и очень распространенный способ освобождения автоклава от воздуха — вытеснение воздуха паром. Пар и конденсат отводят либо в сосуд с водой, либо в специальное устройство, соединенное с канализацией. В первом случае на кран (2) надевают резиновый шланг, который опускают в воду. Началом продувания считается появление устойчивой непрерывной струи чистого пара. Пока в автоклаве еще имеется воздух, смесь воздуха и пара, проходя через воду, издает сильный треск. Чистый пар выходит с равномерным шипящим звуком. Его пропускают в течение 10 мин. В целом вся операция с момента появления пара с воздухом должна занимать не более 15 — 20 мин, иначе в автоклаве останется мало воды и он может испортиться. Чтобы уменьшить расход пара (воды), кран открывают не полностью. Степень открывания крана устанавливают на практике при эксплуатации автоклава. В наиболее совершенных автоклавах воздух из стерилизационной камеры удаляют с помощью вакуумного насоса.
Когда воздух вытеснен, закрывают пароотводной кран, и давление пара доводят до показания, соответствующего режиму стерилизации. Режим автоклавирования часто выражают в единицах избыточного давления, указывая при этом длительность его поддержания, например стерилизация при 1 ати в течение 20 мин. На манометре автоклава обозначается именно то избыточное давление, которое создается в автоклаве сверх нормального. Нередко режим автоклавирования характеризуется температурой и временем. Как только стрелка манометра дойдет до указателя определенного дополнительного давления и, следовательно, температура пара достигнет соответствующего значения, этот уровень давления пара поддерживают в течение необходимого времени путем ручного или автоматического регулирования подачи пара. В автоматических автоклавах подачу пара регулируют электроконтактным манометром.
По окончании времени стерилизации выключают нагрев автоклава. Давление в автоклаве постепенно падает и сравнивается с атмосферным. Лишь после этого открывают кран, выводящий пар. Преждевременное открывание крана недопустимо, так как перегретые среды при резком снижении давления сразу же бурно закипают, смачивают и даже иногда выталкивают ватные пробки, что нарушает стерильность материала. Когда пар выйдет, открывают крышку (дверь) автоклава, соблюдая при этом осторожность во избежание ожога паром лица и рук. Удаление пара из стерилизационной камеры автоклавов, оснащенных вакуумным насосом, осуществляют с помощью насоса. Одновременно происходит подсушивание стерильного материала.
Поскольку автоклав работает при высоких давлениях и температурах, неправильное обращение с ним может быть причиной несчастных случаев. Установка автоклава и работа с ним производятся при точном и строгом выполнении правил, указанных в прилагаемой к автоклаву инструкции. К работе допускаются только подготовленные лица, имеющие специальное разрешение.
При необходимости проконтролировать температуру в автоклаве пользуются разными веществами, плавящимися при определенной температуре. Эти вещества предварительно смешивают с нейтральными красителями и помещают в автоклав до начала стерилизации. В качестве индикаторов температуры используют фенантрен (температура плавления 98—100°С), бензаурин (115°С), серу (119 °С), бензойную кислоту (121 — 122 °С), мочевину (132°С), глюкозу (146°С), тиомочевину (180°С), аскорбиновую кислоту (187— 192 °С). На 100 г этих веществ берут 0,01 г красителя (фуксин, метиленовый синий), тщательно смешивают, рассыпают в стеклянные трубочки с одинаковым диаметром и толщиной стенок, запаивают и в вертикальном положении раскладывают между стерилизуемым материалом в автоклаве. По достижении в сосуде соответствующей температуры эти вещества расплавляются и окрашиваются в цвет добавленного в них красителя.
Подготовка сред к стерилизации.
При автоклавировании 3 — 5 % жидкости теряется в результате испарения, поэтому рекомендуется в приготавливаемые среды добавлять сверх объема примерно 5 % дистиллированной воды. Тогда после стерилизации среда (раствор) будет иметь требуемую концентрацию.
Среды обычно стерилизуют в пробирках, колбах, бутылях. Емкости заполняют средой не более чем на половину их высоты, чтобы предотвратить смачивание пробок. Сосуды со средами закрывают ватными пробками. Они предохраняют среду от заражения микроорганизмами, находящимися в окружающем воздухе.
Пробки должны быть достаточно плотными, чтобы выполнять эту функцию, но с достаточно равномерным распределением волокон ваты, так как через них происходит газообмен культур с окружающей средой. Слишком плотные пробки затрудняют снабжение культур воздухом.
Для приготовления пробки плоский кусок ваты, взятый вдоль волокна, скатывают валиком. Чтобы придать пробке прочность, ее прокатывают между ладонью и чистым стеклом, лежащим на столе. Длина пробки для обычной пробирки примерно 4 см. Пробка должна входить в пробирку на 1,5 — 2,0 см (рис. 4.2). Для сохранения формы пробку вынимают из горлышка, слегка вращая. Удобно обернуть пробку чистой марлевой салфеткой.
Перед стерилизацией пробки можно прикрыть бумажными колпачками. Нельзя обертывать пробки сосудов, которые будут стерилизоваться в автоклаве, целлофаном, фольгой или другими материалами, не пропускающими пар, так как пар должен проникать через пробку в сосуд, иначе среды не нагреются до нужной температуры и не простерилизуются. При использовании стеклянных, резиновых, корковых и других пробок их завертывают в двойной слой оберточной бумаги и стерилизуют привязанными к склянке, закрытой ватной пробкой. Пробки в сосуде меняют стерильно около пламени горелки.
Подготовка посуды к стерилизации.
Посуда перед стерилизацией должна быть тщательно вымыта и завернута в бумагу для сохранения стерильности после прогревания. Посуду развертывают непосредственно перед употреблением. В верхние концы пипеток вставляют ватные тампоны. Торчащие из пипеток волокна ваты сжигают в пламени горелки. Пипетки заворачивают в длинные полоски бумаги шириной 4 — 5 см. Обмотку начинают с оттянутого конца и постепенным движением бумаги по спирали заканчивают у конца с ватным тампоном. Завернутые пипетки для предохранения бумаги от загрязнения и разрывов перед стерилизацией упаковывают по несколько штук вместе или помещают в специальные металлические или картонные пеналы. Чашки Петри обычно заворачивают в пакеты по 2 —4 штуки, шпатели — по отдельности, но затем, как и пипетки, их объединяют в общий сверток. Колбы, пробирки и трубки Бурри закрывают ватными пробками. На пробки можно надеть бумажные колпачки, предохраняющие горлышко от пыли.
Стерилизация.
Посуду, подготовленную для стерилизации, загружают в стерилизатор (или сушильный шкаф) не слишком плотно, чтобы обеспечить циркуляцию воздуха и равномерный надежный прогрев стерилизуемого материала. Стерилизатор (сушильный шкаф) во время работы должен быть плотно закрыт. При отсутствии терморегулятора необходимо строго следить за температурой, так как при ее понижении не осуществится стерилизация, а при нагреве выше 180 °С бумага и пробки начинают обугливаться. По окончании стерилизации шкаф не открывают до тех пор, пока температура в нем не упадет до 80 °С, поскольку при резком охлаждении иногда нарушается стерильность материала, а сильно нагретое стекло может растрескаться. Лучше всего выгружать посуду, когда температура в стерилизаторе сравняется с комнатной.
Посуду можно стерилизовать и в автоклаве. Режим стерилизации в этом случае существенно зависит от объема сосудов и толщины стекла (см. табл. 4.2). Для автоклавирования посуду готовят, как и для сухожаровой стерилизации. Следует иметь в виду, что в автоклаве посуда увлажняется.
Стерилизация фильтрованием.
Фильтрованием стерилизуют синтетические среды строго определенного состава, которые содержат легкоразрушающиеся или летучие компоненты — витамины, аминокислоты (цистеин и цистин), белки, ароматические углеводороды, антибиотики и др. Фильтрование жидкостей осуществляют через мелко -пористые материалы, легко адсорбирующие клетки микроорганизмов: асбест, целлюлозу, фарфор, каолин и т.д.
Стерилизующими фильтрами теоретически считают такие, размер пор которых не превышает 0,7 мкм. В практике же пригодность фильтров для стерилизации устанавливают путем пробной фильтрации через них суспензии какого-нибудь мелкого микроорганизма, например Serratia marcescens. Для проверки на стерильность фильтрат в большом количестве высевают на питательную среду. Если в течение 5 сут тест-организм не вырастет, фильтры могут быть использованы для стерилизации. Широкое распространение получили мембранные фильтры. Это диски разного размера, диаметра, напоминающие бумажные. Их готовят на основе нитроцеллюлозы. Мембранные фильтры в зависимости от величины пор применяют для фильтрования и стерилизации. Для стерилизации используют фильтры с номера 1 до номера 4 фирмы «Владипор» (Россия), фильтры с номера 5 до номера 10 фирмы «СИНПОР» (Чехия) и марок VF, VM, VC, SLGS, SLHA, DA фирмы «МИЛЛИПОР» (США).
Плотные диски, изготовленные из смеси асбеста с целлюлозой, называются фильтрами Зейтца. В зависимости от диаметра пор они обозначаются разными индексами: ЕК — поры диаметром 1,5 — 1,8 мкм; ЕКS — 1,2—1,5; ЕКS-1 — 1,0— 1,2; ЕКР — 0,8— 1,0 мкм. В России выпускают асбестовые фильтры марок Ф2 и СФ. Стерилизующими являются СФ-3 и СФ-4.
Асбестовую пластинку помещают в специальный держатель, который обычно изготавливают из нержавеющей стали, и крепко зажимают винтами между верхней (цилиндрической) и нижней (воронкообразной) частями держателя. Трубка нижней части держателя через резиновую пробку проходит в колбу Бунзена. Нередко весь этот прибор в собранном виде называют фильтром Зейтца.
Для стерилизации используют стеклянные пористые фильтры, а также изготовленные из каолина с примесью кварцевого песка — «свечи» Шамберлана и из инфузорной земли — «свечи» Беркефельда. Пористость первых обозначается буквой L с цифрами от 1 до 13 соответственно уменьшению диаметра пор фильтра от 9 до 1,2 мкм. Мелкопористые «свечи» обозначаются маркой В, крупнопористые — F. Фильтры Беркефельда обозначают буквами V, N, W, что соответствует следующим размерам пор (мкм): 8—12, 5 — 7, 3 — 4.
«Свечи» и специальные держатели с закрепленными в них асбестовыми фильтрами герметически соединяют с колбой Бунзена для фильтрации в вакууме (рис. 4.3). Перед употреблением фильтры, их держатели и приемник фильтрата должны быть простерилизованы.
Мембранные фильтры стерилизуют автоклавированием при 1 ати 15 мин или длительным кипячением. Держатель вместе с резиновой пробкой заворачивают в бумагу и автоклавируют при 1 ати 20 — 30 мин. Фильтры Зейтца автоклавируют в собранном виде.
«Свечи» стерилизуют вместе с резиновыми пробками в автоклаве. Колбу Бунзена закрывают ватной пробкой, в отводную трубку вставляют тампон и стерилизуют горячим воздухом — сухим жаром.
СТЕРИЛИЗАЦИЯ ИНСТРУМЕНТОВ И ПРИБОРОВ
Мелкие металлические инструменты: петли, иглы, пинцеты, ножницы, шпатели — стерилизуют прокаливанием в пламени (т.е. нагреванием докрасна) непосредственно перед использованием. На пламени кратковременно обжигают предметные и покровные стекла, стеклянные шпатели и палочки, фарфоровые ступки и пестики, горлышки колб, пробирок, бутылок, а также ватные пробки при пересевах культур и разливах сред. В пламени погибают и вегетативные клетки, и споры микроорганизмов.
Наряду со стерильными одноразовыми шприцами в лабораторной практике широко распространены традиционные шприцы многократного использования. Их лучше всего стерилизовать сухим жаром при 160 °С в собранном либо в разобранном виде. В первом случае длительность стерилизации 75 мин, во втором —60 мин. Собранные шприцы вместе с иглой стерилизуют в пробирке, закрытой ватной пробкой, разобранные заворачивают в бумагу или ткань. Можно стерилизовать шприцы и в автоклаве при 1 ати в течение 15 — 20 мин. Автоклавируют их только в разобранном виде, иначе они повреждаются. Прокаливать шприцы нельзя, так как от этого они портятся.
Термостойкие приборы для культивирования микроорганизмов, а также детали к этим приборам, резиновые пробки и шланги стерилизуют в автоклаве. При этом емкости завертывают в бумагу. Режим автоклавирования выбирают в соответствии с термостойкостью материала, из которого сделан прибор.
Некоторые предметы (металлические инструменты, мелкие стеклянные детали, мембранные фильтры) иногда стерилизуют длительным (в течение 20 — 30 мин) кипячением в дистиллированной воде. Металлические и стеклянные предметы лучше всего кипятить в специальных закрытых сосудах — стерилизаторах. Можно использовать для этой цели и металлическую посуду. Мембранные фильтры обычно кипятят в колбе или химическом стакане, закрытых ватными пробками. Однако этим способом стерилизации в микробиологической практике пользуются редко в связи с тем, что длительное кипячение может повредить обрабатываемый материал, а сокращение времени кипячения может не обеспечить стерильность, так как споры некоторых микроорганизмов способны сохранять жизнеспособность даже после длительного кипячения. Надежность стерилизации при кипячении может быть увеличена внесением в воду какого-либо бактерицидного средства: 2%-го формальдегида, 1%-й бриллиантовой зелени или 0,1%-й сулемы. Но в этом случае возможно загрязнение биоцидами стерилизуемых предметов.
Стерилизация облучением.
Для стерилизации помещений, оборудования, некоторых медицинских принадлежностей, пищевых продуктов используют разные виды излучений: инфракрасное, ультрафиолетовое, рентгеновские лучи, альфа-, бета-, гамма-лучи радиоактивных элементов. Единицей дозы облучения является радиан (1 рад = 0,01 Гр), который эквивалентен поглощенной энергии примерно в 100 эрг/г. Стерилизующими являются дозы облучения 2 — 3 Мрад (104Гр, или рад). Чаще других в микробиологической практике используют ультрафиолетовое облучение.
Основные способы стерилизации питательных сред, посуды и других лабораторных материалов обобщены в табл. 4.4. Следует отметить, что все большее распространение получают посуда и инструменты одноразового использования.
Семинар 3. Термические методы стерилизации
МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Стерилизация является одним из важнейших и необходимых приемов в микробиологической практике. Слово «стерилизация» в переводе с латинского означает «обеспложивание». В практической работе под стерилизацией понимают методы, применяемые для уничтожения всех форм жизни как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов. Микробиологи стерилизуют питательные среды, посуду, различные инструменты и другие необходимые предметы с целью не допустить развитие посторонних микроорганизмов в исследуемых культурах. Термин «стерильность» имеет абсолютное значение. Можно говорить только либо о стерильности, либо о нестерильности, но не может быть состояния «частичной или неполной стерильности», «близкого к стерильному», «почти стерильного».
Различают термическую и холодную стерилизацию. В микробиологии находят применение следующие способы термической стерилизации: прокаливание в пламени и обжигание, сухожаровая стерилизация (горячим воздухом), стерилизация насыщенным паром под давлением (автоклавирование), дробная стерилизация (тиндализация), кипячение. Из методов холодной стерилизации микробиологи используют стерилизацию фильтрованием, газообразными средствами, ультрафиолетовыми лучами и другими видами излучений.
Возможность и целесообразность применения того или иного способа определяются в первую очередь физико-химическими свойствами материала, подлежащего стерилизации, а иногда и целью исследования.
Читайте также:
Газовая стерилизация | Биологические индикаторы
Продолжая серию статей о USP, <1229.7> касается газовой стерилизации. Стерилизующие газы обычно используются, когда воздействие других методов (тепла или излучения) может повредить материалы или оборудование. Наиболее распространенные газы, используемые для стерилизации, включают оксид этилена (ЭО), озон, смешанные оксиды азота и диоксид хлора. Согласно USP, «способность ЭО проникать через полимеры, целлюлозу и другие материалы позволяет использовать его для окончательной стерилизации медицинских устройств в их окончательной упаковке.
В этой главе подробно рассматриваются следующие типы газов (определения USP):
- Оксид этилена: «мощный алкилирующий агент, который уничтожает микроорганизмы путем химической реакции, в первую очередь с клеточной ДНК. Деструктивный механизм во многом следует кинетике первого порядка и зависит от концентрации, влажности и температуры ».
- Озон: «мощный окислитель, образующийся при пропускании потока кислорода или воздуха через электрическое поле высокого напряжения. Озон является эффективным биоцидным агентом для очистки водоснабжения и продемонстрировал летальность при концентрациях в воздухе от 2% до 10%.»
- Диоксид хлора:« эффективный стерилизующий газ. Чистый диоксид хлора является метастабильным и поэтому образуется по мере необходимости. Диоксид хлора не канцерогенный, негорючий и эффективный при температуре окружающей среды ».
- Двуокись азота: «стерилизующий газ, эффективный при температуре окружающей среды. При попадании в целевую камеру жидкий диоксид азота превращается в газ. Диоксид азота невзрывоопасен, а его остатки не канцерогены, нецитотоксичны и не тератогены.”
В эту главу также включена информация о валидации газовой стерилизации, аттестации оборудования, распределении параметров пустой камеры, картировании компонентов и загрузки, биологических индикаторах, подтверждении процесса и микробиологической проверке, а также текущем контроле процесса.
Поговорим о биологических индикаторах!
Поговорите с одним из наших экспертов, чтобы получить ответы на свои вопросы и узнать, как мы можем помочь вам решить ваши проблемы с бизнес-аналитикой.
Оценка химических и биологических последствий методов стерилизации почвы
ГЛАВА 31 КОНДЕНСАТОР
.Приведенное количество электронов HPTER PITOR Net hrge Q.6 9.6 7 Чистый потенциал иферена L..6 pitne v 7.6 8 F .. r 5 m. м 8,854 5,4 6,95 5 F … Пусть R re R D мм м 8,85 r r 8,85 4. 5 м 5 м
ПодробнееМаксимальная площадь полигона
Минимум многоугольника Предположим, я даю вам n стикеров. Они могут быть разной длины, или одинаковой длины, или одной длины, другой и т. Д. Теперь у вас есть много полигонов, которые вы формируете с помощью этих стикеров.Ваш джо
ПодробнееМОДАЛЬНЫЕ ВАРИАЦИИ В ОБЛАСТИ ГРАНИТНЫХ ПОРОДОВ Д. О. ЭРУБНСОН, Департамент геологии, Калифорнийский университет, Даттис, Калифорни, а ‘
АМЕРИКАНСКИЙ МИНЕРАЛОГ, ТОМ. 49, СЕНТЯБРЬ-ОКТЯБРЬ ‘1964 МОДАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В РАЗМЕЩЕНИЯХ ГРАНИТА Д. О. ЭРУБНСОН, Департамент геологии, Университет Калифорнии, Дттис, Клайф Орни, Эстнр Сур
ПодробнееРУКОВОДСТВО ПО ОБЗОРУ РАЗМЕЩЕНИЯ МАТЕМАТИКИ
РУКОВОДСТВО ПО ОБЗОРУ РАЗМЕЩЕНИЯ МАТЕМАТИКИ Это руководство предназначено для вашего обзора перед прохождением теста.Вопросы, представленные здесь, я не участвую в тесте. Хотя si навыки lultor являются проверенным для вашего
ПодробнееОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ РАБОТЫ
РУКОВОДСТВО ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ KEYSECUREPC Примечание: ПРЕЖДЕ ЧЕМ ПРОЧИТАТЬ ДАННОЕ РУКОВОДСТВО СОВЕТУЮТ ПРОЧИТАТЬ СЛЕДУЮЩЕЕ РУКОВОДСТВО: ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ЭКСПЛУАТАЦИИ Для клиента KeySeurePC является инновационным продуктом, использующим технологию ptente:
ПодробнееОтчет о проекте за 2008-2011 гг.
Отчет о проекте за 2008-2011 гг. Название проекта: Исследование почвы в Эмметсурге: изменение уровней вымывания ороговевших и стеблей на урожайность, качество почвы и уровни питательных веществ.Основные исследователи: д-р Стерт Биррелл, доцент
ПодробнееELECTROVALUE: подход LCA
Сеть технологий n Qulity NASA / C3P 2009 Международный семинар по окружающей среде n Альтернативные источники энергии Глобальное сотрудничество в окружающей среде Оценка альтернативных энергетических стратегий повторного использования WEEE в ELECTROVALUE:
ПодробнееАвторские права 2009 Maggioli S.П.А.
Copyright 29 y Mggioli S.p.A. Mggioli Editore — это владелец Mggioli S.p.A., имеющий сертификат соответствия ISO 91: 2 47822 Sntrngelo di Romgn (RN) Vi del Crpino, 8 Tel. 541/628111 Fx 541/6222 www.mggioli.it/serviziolienti
ПодробнееКартер Р. Миллер А., Иван Очоа А., Кай Л. Нильсен А., Дуглас Бек Б. и Джонатан П. Линч А., С. Функциональная биология растений, 2003, 30, 973 985
CSIRO PUBLISHING www.pulish.siro.u / journls / fp Funtionl Plnt Biology, 23, 3, 973 985 Генерирование сомнительного укоренения в ответ на низкое содержание фосфора: потенциальная полезность для сбора фосфора
ПодробнееУрок 2.1 Индуктивное мышление
Урок 1 Инутивное резонирование Nme Perio Dte Для Eerises 1 7 используйте индуктивное резонирование, чтобы найти два члена в eh sequene. 1. 4, 8, 1, 16 ,,. 400, 00, 100, 0 ,,,. 1 8, 7, 1, 4 ,, 4.,,, 1, 1, 0 ,,. 60, 180, 10,
ПодробнееКРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ДЛЯ ОРГАНИЗАТОРА
ЗАМЕТКИ ПО ОРГАНИЗАЦИИ И ПЛАНИРОВАНИЮ ВСТРЕЧИ Индивидуальные организаторы GoToMeeting проводят встречи для 15 участников. GoToMeeting Corporte организует мои встречи с участием до 25 участников. Организаторы GoToMeeting
ПодробнееСлужба Active Directory
Чтобы узнать, на какие вопросы были даны правильные ответы: 1.Распечатайте эти pges. 2. Ответьте на вопросы. 3. Отправьте это сообщение с ответами vi :. ФАКС на (212) 967-3498. Или. Пожалуйста, ответьте на следующие
ПодробнееБританский журнал питания
(2013), 110, 981 987 q Авторы 2013 doi: 10.1017 / s0007114512006174 Добавка с гидролистом сывороточного протеина после тренировки вызывает большую активность в синтезе мышечного протеина, чем входящий в его состав миноидонент
ПодробнееСоотношение и пропорция
Пропорция Пропорции Пропорция: Одна из позиций, которую часто можно найти в большом количестве примеров, например: газетчик сообщает, что отношение Репулина к Демортам на съезде Эртина составляет 3 к студенческим / полным
. Подробнее85 ТЕСТ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ
Offiil 1 апреля 2011 г. 85 Тест на бтерильные энотоксины 1 85 ТЕСТ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЭНТОКСИНОВ Части этого общего теста согласованы с соответствующими текстами Европейских Phrmopoei n / или Jpnese Phrmopoei.
ПодробнееУрок 1. Начало работы
Клавиша ответа 0 Урок 1: Начало работы 1 Перечислите три минуты, которые вы вводите в QuikBooks. Формы, списки, регистры 2 Перечислите три способа использования функций в QuikBooks. Menu r, Ion Br, Centres, Home pge 3 Wht ookkeeping
ПодробнееРЕШЕНИЕ УРАВНЕНИЙ ФАКТОРИНГОМ
316 (5-60) Глава 5 Экспоненты и многочлены 5.9 РЕШЕНИЕ УРАВНЕНИЙ С ПОМОЩЬЮ ФАКТОРА В этом разделе Полезный совет по применению свойства Zero Ftor Обратите внимание, что свойство Zero Ftor — это наш второй пример получения
ПодробнееWord Wisdom Correlations to Common Core State Standards, 6 класс
Reing Stnrs для информационных текстовых ключей в деталях 1 Процитируйте текст, чтобы поддержать анализ того, что текстовая система явно выводит из текста.6, 7, 12, 13, 18, 19, 28, 29, 34, 35, 40, 41,
ПодробнееИсправление-II от 19.05.2011 г.
10 (21) / 2010-NICSI НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИНФОРМАТИЧЕСКИЙ ЦЕНТР УСЛУГИ In. (NICSI) (Правительство Ini Enterprise и NIC) Министерство коммуникаций и информационных технологий Hll 2 и 3, 6-й этаж, NBCC Tower 15, Bhikiji
ПодробнееНЕПРАВИЛЬНЫЕ ОБРАЗЦЫ СТРАНИЦ
6 Раздел Длина, круг, объем, который вы будете носить 6A Длина по периметру 6B Окружность петель и периметр сеторов 6C Нарезаны на петли и кольца 6D Направлены на участки 6E Периметр узла
ПодробнееБиологический контроль — Журнал — Elsevier
Биологический контроль — это экологически безопасное и эффективное средство уменьшения или смягчения последствий вредителей и их воздействия посредством использования естественных врагов.Цель Biological Control — продвигать эту науку и технологию посредством публикации оригинальных научных статей и обзоров исследований и теории. В журнале есть раздел, посвященный сообщениям о биотехнологиях, связанных с выяснением и использованием генов или генных продуктов для усиления агентов биологической борьбы .
Журнал охватывает биологический контроль вирусных , микробов , нематод , насекомых , клещей , сорняков и позвоночных вредителей в сельском хозяйстве, водной среде, лесах, природных ресурсах, хранимых продуктах, и городская среда.Также включена биологическая борьба с членистоногими вредителями человека и домашних животных. Приветствуются экологические, молекулярные и биотехнологические подходы к пониманию биологического контроля.
Этот междисциплинарный журнал охватывает:
Энтомология:
Паразитоиды, хищники и патогены и их использование посредством импорта, увеличения и / или стратегий управления средой обитания
Патология растений:
Антагонизм, конкуренция, перекрестная защита, гиперпаразитизм , гиповирулентность и подавление почвы за счет естественных и интродуцированных агентов
Нематология:
Хищники, паразитоиды и патогены в биологическом контроле с помощью стратегий увеличения и / или управления средой обитания и подавления почвы с помощью естественных и интродуцированных агентов
Наука о сорняках:
Позвоночные, беспозвоночные и патогены и их использование с помощью классических, усиливающих или биогербицидных методов
Включены следующие разделы:
Молекулярная технология:
Достижения в понимании средств биологической борьбы и их механизмов
9013 1 Форум:
Теоретические и специальные темы Письма в редакцию, служащие средством обсуждения.
биологических индикаторов | Стерилизация и дезинфекция предметов ухода за пациентами в стоматологических учреждениях | Курс непрерывного образования
×
Привлечены к вам
Поиск
регистр Авторизоваться Посетите ProShop- ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ ОБРАЗОВАНИЕ
переключить меню
- Обзор
- Что нового в CE
- Стоматологические мероприятия
- Ваши курсы и мероприятия
- Стоматологические курсы непрерывного образования
- Архивные PDF-файлы курса CE
- Интерактивные модули
- Ресурсы факультета
- Ресурсы для студентов
- Ресурсы для выпускников
- Ресурсы для стоматологов-гигиенистов
- Ресурсы для помощников стоматолога
- Примеры из практики
- Проблемы с делом
- Запрос на обучение и обучение
- ОБРАЗОВАНИЕ ПАЦИЕНТА
переключить меню
- Обзор
- Материалы для пациентов
- Детское стоматологическое здоровье
- Разговорный испанский
- ИССЛЕДОВАНИЕ
переключить меню
- Обзор
- База данных стоматологических исследований
- Медиа библиотека
- УПРАВЛЕНИЕ ПРАКТИКОЙ
переключить меню
- Обзор
- Производство
- Коллекции
- Тимбилдинг
- Сценарии
- Принятие дела
- Новый опыт пациентов
- Гигиена
- Планирование
- Маркетинг
- ТОВАРЫ
переключить меню
- Обзор
- Электрическая зубная щетка
- Ручная зубная щетка
- Зубная паста
- Другие продукты
- Купить все продукты
- Образцы заказа
- Запрос на обучение и обучение
Поиск
Очистить представить НАС английский Переключить раскрывающийся список×
Выберите свой регион
- НАС
- Канада английский
- Канада Français
- Мексика
- Бразилия
- Аргентина
- Чили
- Колумбия
- Венесуэла
- Перу
% PDF-1.6 % 1 0 obj > endobj 2 0 obj > поток 2015-12-29T13: 28: 35 + 01: 002015-12-29T13: 28: 35 + 01: 002015-12-29T13: 28: 35 + 01: 00Приложение Adobe InDesign CS4 (6.0.6) / pdfuuid:
329- d997-4e71-83d6-790a8b2ec20duuid: 364fe24b-92b1-43d8-8630-41f2de95e546 Adobe PDF Library 9.0 конечный поток endobj 3 0 obj > endobj 5 0 obj > endobj 6 0 obj > endobj 14 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 467.717 666.142] / Тип / Страница >> endobj 15 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 467.717 666.142] / Type / Page >> endobj 16 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 467.717 666.142] / Type / Page >> endobj 17 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 467.717 666.142] / Type / Page >> endobj 18 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / TrimBox [0.ku4_NRKyy) p: 7AR95I˼p.². \]: ˲ fLgxc, dK (UU @ 1Î dtTy; VX {bѹ] X] [0 & XC`9 Ռ uK6cPW’8cͫ% ֱ x & 7 # nv @ У ٭ O- «TQ | wR + ӯ ܖ7 E @ .NKm2 + h5dzѤ
3SqR, -rz.yKf / {ݳ r ~] ϧ3zf_ {o 6L4.an. |], JДKj ܥ: ȓx ׇ hN # zTNoWx \? dRWzJ ٔ A \ NPJ «Y {iK = ̊ & Pc ݺ 92 QS (YRxa ?? 5hU3.i} 6 (, ۦ ד izbk @
Стерилизация — принятые методы (информационный лист)
Допустимые методы стерилизации
Информационный лист: Управление животных ресурсов предоставило набор руководящих документов (политики, инструкции и информационные листы) для использования при планировании процедур с животными в Университете Айовы.Этот информационный лист содержит текущее руководство по рекомендованному тестированию исследовательских биопрепаратов на патогены.
Назначение
Целью этого документа является предоставление руководства по обычно используемым методам стерилизации хирургических инструментов и других материалов для использования в протоколах для животных, утвержденных IACUC.
Принятые методы полной стерилизации
- Предпочтительный
- Автоклав (высокое давление / температура)
- Прочие
- Газообразный оксид этилена — для изделий, не выдерживающих высоких температур
- Химическая / холодная стерилизация — для предметов, которые нельзя стерилизовать другими методами
Принятый метод повторной стерилизации между животными с использованием метода асептического кончика грызунов
- Сухой жар (стерилизатор сухих гранул)
- ПРИМЕЧАНИЕ: Инструменты ДОЛЖНЫ быть полностью стерилизованы другим методом между хирургическими вмешательствами
Стерилизация в автоклаве
- Эффективность автоклавирования должна быть проверена с помощью интегратора, помещенного внутри упаковки.
- Дополнительно рекомендуется заклеить упаковку автоклавной лентой
- В автоклаве используется пар с высокой температурой и давлением, который должен проникать в упаковку для достижения стерилизации.
- Такие материалы, как муслин и ткань из крепированной бумаги, позволяют пару проникать внутрь упаковки
- Не следует использовать такие материалы, как алюминиевая фольга и вощеная бумага, поскольку пар не может проникнуть в них.
- Время выдержки в автоклаве зависит от типа автоклава.
- Для самотечных стерилизаторов обычно требуется выдержка при 121 ° C (250 ° F) в течение не менее 30 минут.
- Для стерилизаторов с динамическим удалением воздуха обычно требуется выдержка при 132 ° C (270 ° F) в течение не менее 4 минут. [1]
- Пакеты большего размера требуют больше времени для достижения необходимого уровня нагрева и давления
- Автоклавная упаковка должна храниться в сухом, непыльном, хорошо проветриваемом помещении, желательно в закрытом шкафу.
- Срок хранения не ограничен, если упаковка хранится надлежащим образом (шкаф, ящик) и не промокает, не разрывается или не имеет другого события, которое может поставить под угрозу ее целостность и стерильность
Стерилизация этиленоксидом [2]
- ПРИМЕЧАНИЕ. Служба центральной стерилизации UIHC больше не выполняет стерилизацию оксидом этилена, и она не предоставляется в других местах на территории кампуса [3] , [4]
- Используется для изделий, чувствительных к нагреванию и / или влаге
- Эффективность зависит от концентрации газа, температуры, относительной влажности и времени воздействия
- Предметы можно стерилизовать в их окончательной упаковке, но эффективность зависит от способности газа свободно диффундировать через них
- Требуется аэрация для десорбции окиси этилена из камеры и предметов
- Некоторым материалам, таким как определенные биосовместимые полимеры и гели, могут потребоваться недели для полного удаления газа из химического вещества.
- Размещение любых материалов без достаточного времени и аэрации для десорбции может привести к реакции тканей и проблемам со здоровьем
- Недостатки
- Опасности — воспламеняющиеся, взрывоопасные, токсичные и канцерогенные
- Продолжительность цикла
- Стоимость
Химическая / холодная стерилизация
- Примеры обычных коммерческих стерилизаторов и их активного ингредиента (ов):
- ПРИМЕЧАНИЕ: Эта информация основана на имеющейся в настоящее время информации по состоянию на 27.05.20.Обратитесь к инструкциям производителя, чтобы узнать, как правильно приготовить и использовать.
- CIDEX ® Раствор активированного диальдегида [5]: глутаральдегид
- Активен до 14 дней после приготовления
- Для стерилизации при комнатной температуре требуется 10 часов выдержки
- Spor-Klenz ® : пероксид водорода и пероксиуксусная кислота.
- Концентрат холодного стерилизатора [6]
- Разбавить очищенной водой до концентрации 1% об.
- Использовать немедленно и не хранить
- Для стерилизации при комнатной температуре требуется 11 часов выдержки
- Готовый к использованию холодный стерилизатор [7]
- Можно использовать повторно до 14 дней
- 5.Для стерилизации при комнатной температуре требуется 5 часов выдержки
- Концентрат холодного стерилизатора [6]
- Спорицидин ® Раствор для стерилизации и дезинфекции [8]: глутаровый альдегид, фенол, фенат.
- Действует 14 дней после приготовления
- Для стерилизации при комнатной температуре требуется 12 часов выдержки
- При использовании этих средств требуется осмотрительность, чтобы гарантировать, что они используются с соответствующими мерами безопасности и что стерилизуемые предметы совместимы со стерилизующим средством
- Факторы для эффективного и правильного использования холодной стерилизации:
- Химические вещества должны быть классифицированы как «стерилизующие средства».
- Обычно используемые дезинфицирующие средства, такие как спирт, йодофор, четвертичный аммоний и фенольные соединения, не являются эффективными стерилизующими средствами и неприемлемы для использования на предметах (например,g., катетеры, инструменты), предназначенные для использования в хирургических процедурах выживания
- Физические свойства стерилизуемых предметов должны быть гладкими и непроницаемыми для влаги
- Все поверхности, как внутренние, так и внешние, должны подвергаться воздействию стерилизующего вещества
- Стерилизующий раствор должен быть чистым и свежим.
- Дата приготовления должна быть указана на таре
- Химически стерилизованные инструменты необходимо тщательно промыть как изнутри, так и снаружи стерильным физиологическим раствором или стерильной водой перед использованием, чтобы избежать повреждения тканей.
- С инструментами следует обращаться в асептических условиях для поддержания стерильности (например, обращаться в стерильные перчатки и помещать на стерильное поле).
Стандартные операционные процедуры (СОП) - Химические вещества должны быть классифицированы как «стерилизующие средства».
- ДОЛЖНЫ быть вывешены в лаборатории при использовании методов химической стерилизации и должны содержать следующую информацию:
- Используемый агент (т.е. активный ингредиент)
- Как готовят стерилизующее средство
- Как долго стерилизующий раствор остается активным после приготовления (срок годности)
- Время воздействия, необходимое для стерилизации инструментов / принадлежностей
- Удаление стерилизатора перед использованием в асептических условиях Шаблон
- и пример СОП можно найти здесь: Стандартные рабочие процедуры (СОП) химической стерилизации
- Проконсультируйтесь с ветеринаром OAR, если возникнут какие-либо вопросы, касающиеся использования химических / холодных стерилизаторов.
Стерилизация сухими шариками
- Используется для стерилизации наконечников хирургических инструментов между несколькими операциями
- Инструменты ДОЛЖНЫ быть полностью стерилизованы другим методом между хирургическими вмешательствами.
- Хирургический сеанс включает операции, выполненные в тот же день
- Стерилизатор перед использованием должен быть активирован минимум на 20 минут для достижения соответствующей температуры [9]
- Весь биологический мусор (e.грамм. кровь, ткань) необходимо удалить перед помещением инструментов в стерилизатор
- Инструменты должны быть помещены в стерилизатор минимум на 15 секунд до достижения стерилизации [10]
- После того, как инструменты вынуты из стерилизатора, наконечники станут ОЧЕНЬ ГОРЯЧИМИ
- Им необходимо дать остыть перед использованием, чтобы не обжечь животное
- Стерилизованы только кончики инструментов, а ручки считаются загрязненными
- Инструменты следует использовать таким образом, чтобы их кончики оставались стерильными.Подробную информацию о технике асептического наконечника см. В Руководстве по выживанию грызунов .
Последний раз редактировал IACUC 10.