%d0%ba%d0%bb%d1%8f%d0%ba%d1%81%d0%b0 PNG образ | Векторы и PSD-файлы
дизайн плаката премьера фильма кино с белым вектором экрана ба
1200*1200
Ручная роспись борода ба zihu большая борода
1200*1200
сердце сердцебиение любовь свадьба в квартире цвет значок векторная icon
5556*5556
мода с днем рождения шрифты
1200*1200
Закир навид ашик ба урду каллиграфия бесплатные eps и png
5000*5000
рисованный мультфильм счастливый конец блюдо на банджо шеф
2000*2000
естественный цвет bb крем цвета
1200*1200
пример с австралией праздник плакат или баннер
1200*1200
ма дурга лицо индуистский праздник карта
5000*5000
красивый современный всплеск кофе с кофе в зернах
3333*3333
набор векторных иконок реалистичные погоды изолированных на прозрачной ба
800*800
мультфильм здание с зеленой крышей вектор illustartion на белом ба
1200*1200
вектор поп арт иллюстрацией черная женщина шопинг
800*800
Векторная иллюстрация мультфильм различных овощей на деревянном ба
800*800
ба конфеты шоколад
800*800
чат комментарий образование синий значок на абстрактных облако сообщение
5556*5556
ценю хорошо как плоская цвет значок векторная icon замечания
5556*5556
вектор поп арт иллюстрацией черная женщина шопинг
800*800
3d модель надувной подушки bb cream
2500*2500
Красивая розовая и безупречная воздушная подушка bb крем косметика постер розовый красивый розовый Нет времени На воздушной
3240*4320
коробка и объектив камеры значок дизайн вдохновение изолирован на белом ба
1200*1200
малыш парень им значок на прозрачных ба новорожденного весы вес
5556*5556
Крутая музыка вечеринка певца креативный постер музыка Я Май Ба концерт вечер К
3240*4320
Косметический bb Крем Дизайн Плаката косметический Косметика постер Реклама косметики Плакат
3240*4320
аэрозольный баллончик увлажняющий лосьон bb cream парфюм для рук
3072*4107
чат пузыри комментарии разговоры переговоры аннотация круг ба
5556*5556
bb крем ню макияж косметика косметика
1200*1500
аркада консоли игры машина играть в соответствие значок на прозрачных ба
5556*5556
цвет перо на воздушной подушке bb крем трехмерный элемент
1200*1200
кодер кодирование компьютер список документ линии значок на прозрачных ба
5556*5556
happy singing mai ba sing self indulgence happy singing
2000*2000
концепция образования в выпускном вечере баннер с цоколем и золотой ба
6250*6250
новые facebook покрытия с red lion и черный и синий полигональной ба
5556*5556
простая инициализация bb b геометрическая линия сети и логотип цифровых данных
2276*2276
пример с австралией праздник плакат или баннер
1200*1200
пример с австралией праздник плакат или баннер
1200*1200
Шань Хай Цзин Ба змея Отличный зверь монстр
2000*2000
розовый бб крем красивый бб крем ручная роспись бб крем мультфильм бб крем
2000*3000
две бутылки косметики жидкая основа белая бутылка крем bb
2000*2000
цифровой маркетинг ремаркетинга квартиру цвет значок векторная icon
5556*5556
крем крем вв вв на воздушной подушке иллюстрация
2000*2000
пузыри чат замечания разговоры переговоры резюме круга ба
5556*5556
Счастливого Дивали традиционного индийского фестиваля карта с акварелью ба
5041*5041
церковь
5556*5556
99 имен аллаха вектор al baith асма husna
2500*2500
bb кремовый плакат белый макияж косметический На воздушной подушке
3240*4320
геймпад playstation квартиру цвет значок векторная icon видеоигра
5556*5556
деньги долг финансы помочь кредит им значок на прозрачных ба
5556*5556
в поход местонахождение им значок на прозрачных ба карта план трек
5556*5556
bb крем cc крем пудра Порошок торт фонд
2000*2000
Цветные кляксы на белом фоне
Корзина Купить!
Изображение помещёно в вашу корзину покупателя.
Вы можете перейти в корзину для оплаты или продолжить выбор покупок.
Перейти в корзину…
удалить из корзины
Размеры в сантиметрах указаны для справки, и соответствуют печати с разрешением 300 dpi. Купленные файлы предоставляются в формате JPEG.
¹ Стандартная лицензия разрешает однократную публикацию изображения в интернете или в печати (тиражом до 250 тыс. экз.) в качестве иллюстрации к информационному материалу или обложки печатного издания, а также в рамках одной рекламной или промо-кампании в интернете;
² Расширенная лицензия разрешает прочие виды использования, в том числе в рекламе, упаковке, дизайне сайтов и так далее;
Подробнее об условиях лицензий
³ Лицензия Печать в частных целях разрешает использование изображения в дизайне частных интерьеров и для печати для личного использования
тиражом не более пяти экземпляров.
* Пакеты изображений дают значительную экономию при покупке большого числа работ (подробнее)
Размер оригинала: 3500×5000 пикс. (17.5 Мп)
Указанная в таблице цена складывается из стоимости лицензии на использование изображения (75% полной стоимости) и стоимости услуг фотобанка (25% полной стоимости). Это разделение проявляется только в выставляемых счетах и в конечных документах (договорах, актах, реестрах), в остальном интерфейсе фотобанка всегда присутствуют полные суммы к оплате.
Внимание! Использование произведений из фотобанка возможно только после их покупки. Любое иное использование (в том числе в некоммерческих целях и со ссылкой на фотобанк) запрещено и преследуется по закону.
Конспект открытого занятия студии «Палитра». Тема: «Цветные кляксы»
Тема занятия: Линейная перспектива
Цели и задачи:
формирование у учащихся знаний и
навыков практической деятельности в изображении пейзажа с использованием правил
линейной перспективы.
развитие воображения, образного мышления, пространственного представления, способности к художественному творчеству.
воспитание чувства красоты к окружающей природе и бережного отношения к ней.
I. Организационный момент.
Если видишь на картине,
Нарисована река,
Живописные долины,
И дремучие леса,
Белокурые березки,
Или старый крепкий дуб,
Или вьюга, или ливень,
Или солнечный денек.
Нарисованным быть может,
Или север, или юг.
И любое время года
Мы в картине разглядим.
Не задумываясь, скажем:
Называется пейзажем!
Учитель: А что такое пейзаж?
Ответы детей: Это жанр изобразительного искусства.
ПЕЙЗАЖ (произошло от франц.
paysage
— страна, местность) – жанр изобразительного искусства а, в котором основным
предметом изображения является природа.
Учитель: Название жанра распространяется на изображение естественной или преобразованной человеком природы, окружающей среды, характерных ландшафтов, видов гор, рек, лесов, полей, городов, исторических памятников, всего богатства и разнообразия растительности.
Какие пейзажи бывают?
Ответы детей: В зависимости от характера пейзажного мотива, можно выделить сельский, городской, индустриальный пейзаж, морской.
Учитель: Пейзаж может носить исторический, героический, фантастический, лирический и эпический характер. А в каких видах изобразительного искусства существует пейзаж?
Ответы детей: Пейзаж может быть в графике и живописи.
Учитель: назовите основные элементы пейзажа.
Дети: В пейзаж входят некоторые основные элементы:
земная поверхность
растительность
постройки
Учитель: Картина пейзаж также может включать:
водоёмы (озера, моря, реки)
фауну
людей
свет
облака, дождь.
II.Изучение новой темы.
Учитель: Сегодня мы совершим
путешествие в природу, отраженную художником на холсте. В 19 веке многие
русские пейзажисты обращались к жанру пейзаж. Среди этих пейзажистов можно
выделить несколько художников такие, как И. Шишкин, И. Айвазовский, А.
Саврасов, Ф. Васильев много, много других. Именно в 19 веке было написано много
пейзажных шедевров. Для создания полноценной картины, художнику было необходимо
написать множество пейзажных этюдов, рисунков простым карандашом изучая натуру.
И. Шишкин много рисовал карандашом свои лесные пейзажи, и в этом ему нет
равных. А. Саврасов одним из первых показал в пейзаже грязные русские размытые
дождем проселочные дороги, отразил романтизм мокрых полей, даже серый весенний
день в его пейзаже смотрится прекрасным. Ф. Васильев проживший очень короткую
жизнь, но создавший немало красивых пейзажей, заставивший сопереживать зрителя
с увидевшим им красотами родной природы. Создавая реалистические пейзажи,
современные художники вдохновляют нас любить и беречь родную природу.
Учитель: Тема нашего урока: «Правила линейной и воздушной перспективы». Ознакомившись с темой нашего урока, вы научитесь писать замечательные пейзажи, передавать красоту русской природы, передавать глубину и пространство. Постараетесь выразить свое настроение, цвет неба и земли, дыхание леса, движение облаков, прозрачность и свет, постараетесь передать ту загадку природы, которая вдохновляет художников во все времена. Для изображения пространства в пейзаже необходимо знать правила линейной и воздушной перспективы
А что такое перспектива?
ПЕРСПЕКТИВА — (фр. perspective, от
лат. perspicio — ясно вижу) — системы изображения на плоскости пространства и
объемных тел, их пространственной структуры, расположения в пространстве и
удаления от наблюдателя. ПЕРСПЕКТИВА в изобразительном искусстве служит как
воссозданию образа видимого мира, так и истолкованию мира, выражению той или
иной концепции мироздания.
(Вместе с детьми подойти к определению таких понятий как: линейная перспектива, воздушная перспектива, видимый горизонт, линия горизонта, линии схода, точка схода.)
Линейная перспектива — это закономерное изменение масштабов изображения разноплановых объектов расположенных на плоскости. Иными словами, это технический рисунок. Линейная перспектива способствует достижению пространственного воздействия посредством изменения формы групп растений и архитектурных элементов. Она помогает укоротить или удлинить расстояния между ними.
Видимый горизонт — это линия, на которой сходятся земля и неба.
Линия горизонта (упрощенный
истинный горизонт) — это воображаемая прямая, условно находящаяся в
пространстве на уровне глаз наблюдателя.
Линии схода — это линии, образующие края формы объекта с учетом их удаленности от точки наблюдения и показывают положение объекта в перспективе.
Точка схода — точка, в которой соединяются линии схода.
При рисовании пейзажа первой задачей представляется выделить в натуре границы пространства, подлежащего изображению, и связать его с листом бумаги. Иногда помощь в установлении границ рисунка может оказать «видоискатель» — картонное окошко с подвижной заслонкой, дающее возможность варьировать отношения сторон прямоугольника окна, обычно между одним и двумя квадратами. Стоя на улице обсаженной деревьями можно наблюдать, как по мере удаления деревья становятся всё меньше и меньше, и самое большое дерево вдали будет не больше карандаша в руке. То же происходит и с машинами, в конце длинной улицы они кажутся игрушечными. Люди, по мере удаления, кажутся всё меньше и меньше.
Так ведут себя, подчиняясь законам
перспективы вертикальные предметы. А что происходит с горизонтальными линиями?
Линии разметок на проезжей части, линии тротуаров по обе стороны улицы, линии
горизонтальных архитектурных элементов зданий, удаляясь от нас, начинают
постепенно сближаться и в самой дали, сходятся в одной точке, которую мы в
пятом уроке назвали точкой схода.
Через эту точку проходит линия горизонта.
Каждый дом на улице, повёрнутый к зрителю боком, имеет две точки схода на линии
горизонта, которые в рисунке могут быть расположены далеко за пределами листа
бумаги, У художника глаз тренированный и он может убедительно определить
перспективные сокращения размеров зданий и предметов на улице, без каких либо
вспомогательных приёмов построения перспективы. Начинающему художнику, что бы
развить чувство перспективы надо постоянно сравнивать и сопоставлять размеры и
формы предметов относительно друг друга. Если изобразить в пейзаже фигуру
человека, животных или их несколько, то очень важно правильно учесть
перспективное сокращение несколько пренебрегать законами линейной перспективы.
Приступая к выполнению самостоятельной работы, первое выберите тему для пейзажа .
Прежде всего, определите в пейзаже плоскость земли и неба.
Затем уточните положение линии
горизонта. Относительно ее определи место основных элементов композиции.
Никаких мелких деталей не должно быть на данном этапе.
Думайте о
выразительности композиции. Не перегружайте формами какую-либо часть изображения.
Это может привести к нарушению композиционного равновесия.
Помните об основных положениях линейной перспективы:
чем дальше предмет, тем меньше он кажется;
все горизонтальные параллельные линии, уходящие от вас вдаль, сходятся в точке схода, принадлежащей линии горизонта;
линии, которые расположены выше уровня горизонта, будут опускаться вниз к горизонту ,и стремиться к точке схода;
линии, расположенные ниже уровня горизонта будут подниматься вверх к линии горизонта и стремиться к точке схода;
мерою движения в глубину пейзажного пространства будут предметы на горизонтальной поверхности: деревья, кусты, строения, люди, животные,
если объект находится очень близко, то его передняя часть будет казаться больше, чем дальняя.
III.
Практическая работа. Дети карандашом делают линейные
построения пейзажей. Учитель ведет наблюдение, оказывает индивидуальную помощь.
IV. Анализ работ.
Каждый из вас видит природу по – своему, каждый изобразил излюбленный мотив. Работы получились разнообразными, каждый выразил в пейзаже своё видение природы. Старались передать линейную перспективу. Рисунки заслуживают положительной оценки, но есть и недостатки в работах. Давайте их найдём и проанализируем.
VII. Выставка лучших набросков пейзажей.
Цветные стержни для клеевого пистолета. Schreiber. Артикул S-8718 — «Цветные кляксы на Ваших поделках ))) Стержни для клеевого пистолета настроят на творческий лад !!!»
Здравствуйте, милые женщины !!!
Сегодня я расскажу об одном своём хобби, не знаю как точно его назвать — но если в общем, это приклеивание, оформление, украшение чего-либо маленькими деталями.
Розочками, цветочками, пуговичками.
Могу обклеивать коробочки, баночки, одежду.
Делать открытки, аппликации.
В этом очень помогает клеевой пистолет и стержни для клеевого пистолета.
До сих пор они у меня были прозрачными, как обычный силиконовый клей.
Но недавно я купила совсем другие — ЦВЕТНЫЕ !!!
Упаковка — прозрачный пакетик, в котором находятся — два белых стержня, два чёрных, два жёлтых, два красных и два зелёных.
Всего 10 штук.
Пистолетик у меня маленький, поэтому стержни я покупала самого маленького диаметра — 0,7 мм.
Держится стержень хорошо.
Быстро плавится.
Красивые цветные лужицы — красная, зелёная, жёлтая — очень красивые и радуют взгляд )))
Стержни имеют характерный запах клея, но мне он очень нравится — слегка резиновый, тонкий.
Гибкие, пластичные, отнюдь не липкие.
Я так понимаю, такие стержни предназначены для склеивания элементов таких же цветов, что и клей.
Не так будет заметны следы клея.
В общем, прекрасная идея!
Спасибо производителям !
Всего Вам самого доброго .
Спасибо, что заглянули !
Мышь одна Капля Maus van Klecks
Возраст 5-99
кол-во игроков 3-5
Маленькая Мышка фон Капелька – известная на весь мир художница. Сегодня она пригласила своих лучших друзей к себе в галерею, чтобы
нарисовать что-нибудь вместе. Воодушевленные, они хватают кисточки, краски, холсты и приступают к делу! Но что это? Палитра художницы
слишком мала: на ней есть место лишь для трех цветов! Как же нарисовать машинку? А домик? И даже бабочку? В каждом раунде игрок выбирает по три цвета (чтобы никто не увидел!) и капает их на палитру. Затем вы сравниваете между собой: за совпадения в качестве вознаграждения художники-зверята получают вкусные пирожные.
Тот, кто первым получит 3 пирожных, побеждает в игре!
Содержание игры:
1 мышка фон Капелька, 1 собака Пабло, 1 тигр Винсент, 1 курица Ники, 1 заяц Фрида, 5 палитр, 5 защит от подглядывания, 4 кисточки, 3 карандаша, 15 пирожных, 50 цветных клякс (в 10 различных цветах), 1 кубик, 5 пакетиков для хранения игрового материала, 1 инструкция к игре
Подготовка к игре:
Каждый игрок берет фигурку, подходящую ей защиту от подглядывания, палитру, 10 цветных клякс (по одной в каждом цвете). Поставьте перед собой защиту от подглядывания, за которой спрячьте палитру и цветные кляксы таким образом, чтобы их никто не видел. В любом порядке разложите кисточки и карандаши на некотором расстоянии друг от друга в центре стола так, чтобы получился круг. Область между ними – поля для хода фигурками. Найдите также местечко для пирожных и положите туда все пирожные. Ваши фигурки ходят по одинаковому полю. Лишний игровой материал нужно убрать в коробочку. Держите наготове кубик.
Ход игры:
Вы играете по очереди по часовой стрелке много раундов.
Игрок, который недавно нарисовал картинку, ходит первым и бросает кубик.
Что изображено на кубике?
На кубике изображено 6 разных символов, каждый из которых обозначает определенную категорию. В зависимости от того, какой символ тебе выпал на кубике, ты должен придумать объект из соответствующей категории, а именно:
Животное
Предмет
Что-нибудь съедобное
Что-нибудь, что появляется в сказке или в фильме
Что-нибудь, о чем человек может мечтать или что он может желать
Что-нибудь, что начинается с буквы, которую тебе подскажет твой левый сосед
Подсказка:
Для этого символа игроки помладше выбирают то, что есть в школе или в детском саду.
Раздели четко игроков в соответствии с тем, какой объект для рисования они выбрали. Теперь игроки должны решить, при помощи каких трех цветов они раскрасят свой объект для рисования на холсте. За защитой от подглядывания три соответствующие цветные кляксы и положите их на холст. Только тогда, когда все игроки это проделают, они приподнимают свои защиты от подглядывания.
Оценивание:
Теперь по часовой стрелке от игрока, начинавшего игру, вы сравниваете цветные кляксы на ваших палитрах.
Есть ли хотя бы у одного игрока одно или несколько цветных клякс на его палитре?
Да. Отлично!
За каждую цветную кляксу, которая есть по крайней мере на одной из остальных палитр, ты можешь продвинуть свою фигурку на поле вперед.
В течение одного хода тебе разрешено продвигаться до трех полей вперед.
Внимание: если твоя фигурка попала на поле с пирожным или продвинулась дальше, то ты получаешь пирожное в качестве вознаграждения. Положи его перед твоей защитой от подглядывания так, чтобы все видели.
Нет.
Жаль. Твоя фигурка остается на месте.
Пример:
Тило на кубике выпал символ из категории «что-нибудь съедобное», и он подумал нарисовать клубнику. Следующие три кляксы выбрали игроки Тило, Ханна и Лео:
Из этого получается следующий подсчет:
Тило передвигает свою фигурку (за красную кляксу) на поле вперед, Ханна передвигает свою фигурку на два поля вперед (за красную и коричневую кляксу), и Лео – также за красную и коричневую.
Новый раунд:
После этого каждый игрок убирает цветные кляксы с палитры и снова ставит перед собой защиту от подглядывания. На очереди следующий игрок, который бросает кубик и начинает новый раунд.
Конец игры:
Игра заканчивается, как только один из игроков получает свое третье пирожное, тем самым выигрывая игру. Если в том же раунде свое третье
пирожное получает несколько игроков, то и победителей будет несколько!
Совместная игра для двух игроков:
Мышь фон Капелька приглашает вас на дуэль! Удастся ли вам вдвоем заполучить третье пирожное до того, как это сделает мышка?
Правила основной игры действуют до следующих изменений:
До начала игры положите только три пирожных на поле старта вместо всех пирожных. Поставьте туда же мышь фон Капельку и фигурку,
которую выбрали вместе.
Каждый из вас выбирает любую защиту от подглядывания, чтобы спрятать свои собственные палитру и цветные кляксы.
Тот, кто бросает кубик, называет понятие из соответствующей категории.
Не договариваюсь между собой, каждый из вас ищет три подходящих цветных кляксы и прикрепляет их на свою палитру.
Подсчет: за каждую неодинаковую цветную кляксу Мышь фон Капелька продвигается на поле вперед, а за каждую одинаковую цветную кляксу ваша фигурка продвигается на поле вперед. Важно, чтобы мышка всегда была впереди!
Пример:
Фигурка игроков продвигается на поле вперед, а мышка – на два.
Если ваша фигурка попала на поле с пирожным или продвинулась дальше, то она получает пирожное в качестве вознаграждения.
Игра заканчивается, как только Мышь фон Капелька или ваша фигурка получают второе пирожное, выигрывая тем самым игру
Наклейка на стену с разноцветными пятнами — WallMonkeys.com
Винил• Полуглянцевый
• Съемный
• Белый непрозрачный материал (непрозрачный)
• Самоклеящаяся основа
Vinyl приклеится практически к любой гладкой внутренней поверхности, включая стены, стекло, пол, окна и многое другое!
Примечание.
Если вы давний поклонник WallMonkeys, возможно, вам нужен наш предыдущий клей Photo-Tex. Винил — наш новый материал по умолчанию, мы считаем, что он лучше подходит для ваших стен.Вы можете запросить Photo-Tex для настенных росписей прямоугольной и квадратной формы в разделе примечаний при оформлении заказа.
Если для вашего заказа требуется подтверждение, производство может быть отложено на время внесения корректировок.
* Срочное производство доступно по запросу. Ознакомьтесь с часто задаваемыми вопросами о срочном производстве здесь.
См. Подробные инструкции здесь.
1. Оставьте наклейку развернутой и разложенной (на ночь для размеров 36 дюймов и больше).
2. Очистите поверхность сухой тканью от пыли и химикатов.
3. Осторожно удалите наклейку с бумажной подложки. Для размеров 36 дюймов и выше рекомендуются дополнительные руки.
4. Плотно пригладьте поверхность наклейки к стене, начав с центра и толкая наружу. Удалите и повторно приложите углы, чтобы выпустить пузырьки воздуха.
Можно ли использовать наклейки WallMonkeys на улице?
— Нет, винил предназначен только для использования внутри помещений.
Будет ли удален белый фон?
— Да, любой полностью белый фон будет отслаиваться, когда наклейка помещается на стену. Для более сложных дизайнов может потребоваться небольшая белая рамка для облегчения нанесения.
Могу ли я настроить наклейку?
— Да, все заказы печатаются по запросу. Мы бесплатно предлагаем нестандартные размеры и настройку зеркального отображения. Просто добавьте примечание к своему заказу при оформлении заказа.
Могу ли я предварительно просмотреть свой заказ перед его печатью?
— Да, цифровое подтверждение предоставляется по запросу в течение 1 рабочего дня.
Запросите его в разделе заметок при оформлении заказа.
Дополнительные ответы на часто задаваемые вопросы см. Здесь.
Субстраты для хромогенного вестерн-блоттинга | Thermo Fisher Scientific
Хромогенные или осаждающие субстраты широко используются в течение многих лет и предлагают самый простой и наиболее экономичный метод вестерн-блоттинга.Когда эти субстраты вступают в контакт с соответствующим ферментом, они превращаются в нерастворимые окрашенные продукты, которые осаждаются на мембране. Полученная цветная полоса или пятно не требует специального оборудования для обработки или визуализации. Субстраты для хромогенного блоттинга доступны в различных спецификациях и форматах. Подходящий выбор субстрата зависит от метки фермента, желаемой чувствительности и формы сигнала или необходимого метода обнаружения.
Вступление
В отличие от хемилюминесцентного или флуоресцентного блоттинга, обнаружение с помощью хромогенных субстратов не требует специального оборудования для визуализации результатов анализа.
Подобно проявочной пленке, блот инкубируется в субстрате до тех пор, пока не будет достигнута желаемая степень проявления. В отличие от хемилюминесцентного вестерн-блоттинга окрашенный осадок, образованный хромогенными субстратами, не может быть легко удален для облегчения процедур повторного зондирования. Поэтому важно позволить реакции продолжаться до тех пор, пока цвет не станет удовлетворительным, а затем остановить реакцию.
Низкая чувствительность хромогенных субстратов затрудняет оптимизацию для обнаружения белков с низким содержанием.Хотя реакции можно дать развиваться в течение нескольких часов или даже в течение ночи, это также позволяет продолжить развитие фонового сигнала. Там, где хромогенные субстраты не чувствительны, они идеальны для применений, где высока концентрация белка. Поскольку продукт реакции субстрата представляет собой окрашенный осадок, сигнал стабильный; поэтому хромогенные субстраты обычно не имеют проблем с ложноотрицательными результатами (фантомные полосы), которые могут возникнуть с хемилюминесцентными субстратами.
Характеристики конкретного субстрата могут резко отличаться при приобретении у разных поставщиков. Это связано с тем, что на характеристики могут влиять концентрация и чистота субстрата, а также другие добавки и компоненты буфера, которые входят в состав препарата.
Техническое руководство по обнаружению белков
В этом 84-страничном справочнике подробно описывается последний шаг в рабочем процессе вестерн-блоттинга — обнаружение белков.
Имея на выбор множество методов обнаружения (хемилюминесцентный, флуоресцентный или хромогенный), вы можете выбрать технологию, соответствующую вашим экспериментальным требованиям и имеющимся у вас инструментам. Будь то быстрая визуализация или точный количественный анализ, детектирование с помощью одного зонда или мультиплексирование — Thermo Fisher Scientific предлагает широкий выбор реагентов и наборов для вестерн-блоттинга и последующего анализа.
Запрос загрузки
Хромогенные субстраты для вестерн-блоттинга пероксидазы хрена
Перекись должна быть добавлена к субстрату для колориметрического определения пероксидазой хрена (HRP).
Из-за чрезвычайно короткого срока хранения при желаемой концентрации пероксид водорода традиционно добавляли в буфер вместе с субстратом непосредственно перед использованием. В результате эти подложки обычно имеют полезный срок хранения всего несколько часов. Многие коммерчески доступные преципитирующие субстраты HRP поставляются со стабильным буфером субстрата пероксидазы или готовятся в нем. Стабилизированная перекись в этих растворах обычно концентрированная и менее коррозионная, чем традиционный 30% основной раствор перекиси водорода.Поскольку 30% перекись водорода и разбавленные растворы перекиси водорода нестабильны, реагенты, приготовленные со стабилизированной перекисью, дадут более стабильные результаты.
Хромогенные субстраты для вестерн-блоттинга с HRP.
3,3 ‘, 5,5’-тетраметилбензидин (TMB) с молекулярной массой 240,4 чаще всего используется в качестве субстрата для HRP в ELISA. Однако в присутствии HRP и пероксида образуется водорастворимый синий продукт, который может осаждаться на мембране. Раствор субстрата для одностадийного ТМВ-блоттинга Thermo Scientific представляет собой однокомпонентный субстрат пероксидазы для вестерн-блоттинга и иммуногистохимии.Осаждение продукта приводит к появлению темно-синих полос, на которых расположен фермент. Одношаговый раствор для субстрата для TMB-блоттинга хорошо подходит для приложений, требующих большого отношения сигнал / шум. Ниже описаны наиболее распространенные субстраты для колориметрического HRP.
Хромогенный вестерн-блоттинг с использованием одностадийного раствора Ultra TMB-Blotting Solution.
Серийные разведения лизата клеток HeLa (7,5, 3,45, 1,88, 0,94, 0,47, 0,23 и 0,12 мкг) были приготовлены и разделены электрофорезом. Белки переносили на нитроцеллюлозные мембраны, и мембрану блокировали 5% обезжиренным молоком в TBS + 0,05% Thermo Scientific Tween 20. После блокирования мембрану инкубировали с поликлональными антителами к белку теплового шока 86 в концентрации 0,5 мкг / мл. Мембрану промывали и затем инкубировали с 0,2 мкг / мл конъюгированного с HRP козьего антикроличьего IgG, а затем снова промывали.Мембрану помещали в 10 мл одностадийного раствора Ultra TMB-Blotting Solution, и развитие окраски останавливали через 5 минут промыванием мембраны водой.
4-хлор-1-нафтол (4CN) имеет молекулярную массу 178,6 и может использоваться для хромогенного обнаружения HRP в блоттинге и гистохимии. Этот осадок не так чувствителен или стабилен, как TMB и DAB, но растворимый в спирте осадок хорошо фотографируется и имеет отчетливый сине-фиолетовый цвет, который может быть использован при двойном окрашивании.
Другим широко используемым субстратом HRP является 3,3′-диаминобензидин (DAB), который имеет молекулярную массу 214,1 и дает коричневый осадок в присутствии HRP и пероксида. Коричневый нерастворимый продукт легко образует хелат с четырехокисью осмия. Это свойство делает DAB идеальным для электронной микроскопии. Цвет, производимый DAB, может быть усилен добавлением металлов, таких как никель, медь, серебро и кобальт, которые образуют комплексы. Цвет, производимый комплексами металлов, более темный, чем цвет, производимый только DAB, что повышает чувствительность при окрашивании.
Отдельные преимущества 4-CN и DAB часто объединяются в одну смесь субстратов Thermo Scientific Pierce CN / DAB Substrate. Подложка CN / DAB имеет отличную чувствительность, образуя темно-черный осадок, который хорошо фотографируется, и он хорошо работает в применениях вестерн-блоттинга и дот-блоттинга.
Субстраты для вестерн-блоттинга хромогенной щелочной фосфатазы
Нитро-синий тетразолий (NBT) с молекулярной массой 817.
6, является членом класса гетероциклических органических соединений, известных как соли тетразолия. При восстановлении соединение дает NBT-формазан, сильно окрашенный, нерастворимый в воде продукт. Субстрат широко используется для иммунохимических анализов и методов, поскольку цвет, производимый формазаном, является линейным и стабильным в широком динамическом диапазоне.
Хромогенный вестерн-блоттинг с использованием субстрата NBT / BCIP. Идентичные гели и нитроцеллюлозные блоты образцов белка IL-6 (от 0,1 до 2 мкг на лунку) были исследованы и обнаружены с использованием идентичных реагентов и условий после отсутствия обработки (вверху) или обработки усилителем (внизу) мембраны. Окончательное обнаружение проводилось с помощью одностадийного раствора субстрата NBT / BCIP компании Thermo Scientific.
5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат (BCIP) имеет молекулярную массу 433.6, и гидролиз щелочной фосфатазой (AP) приводит к сине-пурпурному осадку, который может осаждаться на нитроцеллюлозных или нейлоновых мембранах. BCIP можно использовать в качестве хромогенного субстрата как для иммуноблоттинга, так и для иммуногистохимических исследований.
Идеальная система для блоттинга или окрашивания с AP — это комбинация NBT и BCIP. Вместе они образуют интенсивный черно-пурпурный осадок, который обеспечивает гораздо большую чувствительность, чем любой субстрат по отдельности. Эта реакция протекает с постоянной скоростью, что позволяет точно контролировать ее относительную чувствительность.NBT / BCIP обычно обеспечивает резкое разрешение полосы с небольшим фоновым окрашиванием мембраны.
Схема реакции NBT / BCIP.
BCIP гидролизуется AP с образованием промежуточного продукта, который подвергается димеризации с образованием красителя индиго.NBT восстанавливается до NBT-формазана двумя восстанавливающими эквивалентами, генерируемыми димеризацией.
Хромогенные субстраты для вестерн-блоттинга с щелочной фосфатазой.
Рекомендуемая литература
Галлахер, С., Winston (системы переноса в баке), S.E., Fuller (системы переноса в баке), S.A. и Hurrell (системы переноса в баке; обратимое окрашивание белков), J.
G. (2011) Иммуноблоттинг и иммунодетекция. Текущие протоколы клеточной биологии 52: 6.2: 6.2.1–6.2.28.
реагентов для обнаружения вестерн-блоттинга | Thermo Fisher Scientific
Обнаружение хемилюминесцентного вестерн-блоттинга
Хемилюминесцентные субстраты популярны, потому что они обладают рядом преимуществ по сравнению с другими методами обнаружения.Эти преимущества позволили хемилюминесценции стать предпочтительным методом обнаружения в большинстве белковых лабораторий. Использование хемилюминесценции позволяет делать несколько экспозиций для получения наилучшего изображения. Реагенты обнаружения могут быть удалены, и весь блот может быть повторно зондирован для визуализации другого белка или для оптимизации обнаружения первого белка. Большой линейный диапазон отклика позволяет обнаруживать и количественно определять широкий диапазон концентраций белка. Что наиболее важно, хемилюминесценция обеспечивает наивысшую чувствительность из всех доступных методов обнаружения.
Хемилюминесцентные субстраты для пероксидазы хрена (HRP) в большинстве своем представляют собой двухкомпонентные системы, состоящие из стабильного раствора пероксида и улучшенного раствора люминола. Чтобы получился рабочий раствор, два компонента смешивают вместе. При инкубации с блотом, на котором связаны антитела, конъюгированные с HRP (или другие зонды), происходит химическая реакция, излучающая свет с длиной волны 425 нм, который можно уловить с помощью рентгеновской пленки, устройств формирования изображений на ПЗС-камерах и фосфорных изображений, обнаруживающих хемилюминесценцию.Также легко доступны хемилюминесцентные субстраты для щелочной фосфатазы. Щелкните здесь, чтобы получить информацию о хемилюминесцентном вестерн-блоттинге.
Флуоресцентный вестерн-блоттинг
Флуоресцентные реагенты становятся все более популярными для вестерн-блоттинга, поскольку они обеспечивают большую экономию времени по сравнению с хемилюминесцентным детектированием и сокращение химических отходов по сравнению с хемилюминесцентными или хромогенными системами детектирования.
Хотя пределы обнаружения все еще не так низки, как хемилюминесцентное обнаружение, флуоресцентное обнаружение имеет уникальное преимущество, так как позволяет анализировать несколько мишеней на одном и том же блоте одновременно без необходимости полоскания и повторного зондирования.
Растущий спрос на мультиплексный вестерн-блоттинг стимулировал разработку многих новых флуоресцентных красителей (таких как конъюгаты Alexa Fluor Plus). Эти новые флуорофоры ярче и более фотостабильны, чем традиционные молекулы флуоресцеина и родамина, которые традиционно используются, и имеют более широкий диапазон неперекрывающихся спектров.Вместе с достижениями в области оборудования для цифровой визуализации эти новые флуорофоры позволяют проводить чрезвычайно эффективные анализы при вестерн-блоттинге. Щелкните здесь, чтобы получить информацию о флуоресцентном вестерн-блоттинге.
Обнаружение хромогенного вестерн-блоттинга
Хромогенные или осаждающие субстраты широко используются в течение многих лет и представляют собой самый простой и наиболее экономичный метод вестерн-блоттинга.
Когда эти субстраты вступают в контакт с соответствующим ферментом (например,грамм. Щелочная фосфатаза-АР или пероксидаза хрена-HRP) они превращаются в нерастворимые окрашенные продукты, которые осаждаются на мембране. Полученная цветная полоса или пятно не требует специального оборудования для обработки или визуализации. Субстраты для хромогенного блоттинга доступны во множестве спецификаций и форматов, производя ряд окрашенных преципитатов. Подходящий выбор субстрата зависит от метки фермента и желаемой чувствительности. Подобно проявочной пленке, блот инкубируется в субстрате до тех пор, пока не будет достигнута желаемая степень проявления.В отличие от хемилюминесцентного вестерн-блоттинга окрашенный осадок, образованный хромогенными субстратами, не может быть легко удален для облегчения процедур повторного зондирования. Поэтому важно позволить реакции продолжаться до тех пор, пока цвет не станет удовлетворительным, а затем остановить реакцию.
Низкая чувствительность хромогенных субстратов затрудняет оптимизацию для обнаружения белков с низким содержанием.
Хотя реакции можно дать развиваться в течение нескольких часов или даже в течение ночи, это также позволяет продолжить развитие фонового сигнала.Там, где хромогенные субстраты не чувствительны, они идеальны для применений, где высока концентрация белка. Щелкните здесь, чтобы получить информацию о хромогенном вестерн-блоттинге.
Как выбрать правильный метод обнаружения вестерн-блоттинга?
Благодаря своей гибкости, вестерн-блоттинг может использоваться для широкого круга приложений в молекулярной биологии и биохимии, включая обнаружение посттрансляционных модификаций и проверку клонирования белков.Иммобилизованные мембраносвязанные белки обычно обнаруживают с помощью вторичных антител, которые конъюгированы с флуоресцентными молекулами (флуорофорами) или ферментом, таким как щелочная фосфатаза (AP) или пероксидаза хрена (HRP). Когда добавляется ферментный субстрат, образуется окрашенный осадок (колориметрическое определение) или хемилюминесцентный или флуоресцентный продукт, и световой сигнал улавливается.
Используя размер и интенсивность цвета полосы белка, можно получить полуколичественную оценку белка.Новый набор для хромогенного вестерн-блоттинга позволяет быстро и визуально считывать результаты вестерн-блоттинга в неочищенном клеточном экстракте. Набор можно использовать для идентификации первичных мышиных антител на Вестерн-блоттинге с использованием иммунодетекции. Он содержит полный набор реагентов с оптимизированными реагентами, готовыми к использованию или готовыми к разбавлению.Обнаружение хемилюминесценции
Хемилюминесцентные системы обнаружения используют энергию, выделяемую в реакциях репортерный фермент-субстрат в виде света, который является зарегистрированным сигналом.Два обычно используемых фермента-репортера — это HRP и AP. Выбор субстрата для хемилюминесцентного вестерн-блоттинга определяется тем, какой из указанных ферментов выбран. При использовании HRP выбираются реагенты на основе люминола. HRP в пероксидном буфере окисляет люминол до продукта в возбужденном состоянии, 3-аминофталата, который излучает световой сигнал с длиной волны 425 нм.
При использовании АР реагенты на основе 1,2-диоксетана являются соседними субстратами АР. AP дефосфорилирует подложки на основе 1,2-диоксетана с образованием аниона фенолята диоксетана, который излучает световой сигнал с длиной волны 466 нм.Эти световые сигналы затем фиксируются на рентгеновских пленках или камерах с зарядовой связью (ПЗС), когда световой сигнал затухает до основного состояния. Хемилюминесцентные системы легко адаптируются к традиционным протоколам вестерн-блоттинга благодаря использованию конъюгированных с ферментом антител для активации светового сигнала. Как только конечный пользователь оптимизировал правильную концентрацию конъюгированного с ферментом антитела, вырабатывается временный хемилюминесцентный сигнал, который быстро затухает при исчерпании субстрата. Оба метода совместимы с нитроцеллюлозными или PVDF мембранными блотами. Одним из преимуществ хемилюминесцентных систем вестерн-блоттинга является их чувствительность. Реакции HRP-субстрат могут обнаруживать от 1 до 3 пг, а реакции AP-субстрат могут обнаруживать всего 10 пг белка.
Учитывая короткоживущий характер хемилюминесцентных сигналов, были разработаны хемилюминесцентные субстраты-усилители (ECL), которые позволяют увеличить продолжительность сигнала, его интенсивность и чувствительность. Однако высокая чувствительность может быть невыгодной для образцов с высоким уровнем фона, и конечный пользователь все равно должен исследовать, как аффинность белка, первичного антитела, вторичного антитела и субстрата репортерного фермента будет варьироваться по характеристикам от одного образца к другому и соответствующие оптимизации.
Методы, основанные на хемилюминесценции, предлагают гораздо более высокую чувствительность по сравнению с методами на основе колориметра, которые обнаруживают белки в диапазоне 100-500 пг, или методами на основе флуоресценции, которые ограничены диапазоном нанограмм (10-9). При этом более высокая чувствительность может быть невыгодной для образцов с высоким уровнем фона, и конечный пользователь все равно должен исследовать, как аффинность белка, первичного антитела, вторичного антитела и репортерного ферментного субстрата будет варьироваться по эффективности от одного образца к другому и сделайте соответствующие оптимизации.
Еще одно преимущество хемилюминесцентных систем — это скорость, с которой может быть обнаружен белок. Сигналы, полученные с помощью пленочных или ПЗС-камер, предлагают короткое время экспозиции, которое составляет от 30 секунд до 5 минут в зависимости от того, используете ли вы HRP или AP соответственно. Пленки предназначены для одноразового использования и должны быть проявлены, прежде чем можно будет узнать, было ли время выдержки адекватным или нет, что может привести к разочаровывающим методам проб и ошибок. Современные системы визуализации ПЗС обеспечивают широкий динамический диапазон и множество различных экспозиций, что позволяет конечному пользователю анализировать широкий спектр концентраций белка в данном образце.Алгоритмы обработки изображений позволяют не только получить четкие определенные полосы и низкий фон, но и легко провести полуколичественный анализ результатов.
Хромогенное обнаружение
В отличие от хемилюминесцентного или флуоресцентного блоттинга, хромогенные субстраты не требуют специального оборудования для визуализации для визуализации результатов анализа.
Хромогенное обнаружение — это экономичный и гораздо менее трудоемкий метод обнаружения целевого белка во время протокола вестерн-блоттинга.Подобно хемилюминесцентному обнаружению, хромогенное обнаружение использует вторичное антитело, конъюгированное с репортерным ферментом, которым является HRP или AP. Хромогенное обнаружение отличается от хемилюминесцентного обнаружения в способе получения детектируемого сигнала. Вместо реакции с хемилюминесцентным субстратом ферменты-репортеры будут реагировать с растворимым хромогенным субстратом с образованием окрашенного нерастворимого продукта, который является детектируемым сигналом. Этот сигнал осаждается непосредственно на мембране для блоттинга, образуя цветные полосы, которые могут быть видны глазом и информируют конечного пользователя о наличии или отсутствии интересующего белка.Подобно проявлению пленки, блот инкубируют до тех пор, пока не будет достигнута желаемая степень проявления, что требует некоторых проб и ошибок для оптимизации интенсивности сигнала.
Первоначально конечный пользователь должен устать от продолжительной инкубации, поскольку это может усилить фоновый сигнал, который может скрыть обнаруживаемый сигнал. Однако за ферментативной реакцией можно наблюдать визуально, поэтому реакцию можно относительно легко остановить. Эта функция делает хромогенное обнаружение методом средней чувствительности, который не подходит для образцов с низким содержанием интересующего белка. Для хромогенных систем HRP типичными субстратами хромогена являются 3,3 ’, 5,5’-тетраметилбензидин (TMB), хлор-1-нафтол (4CN) и 3,3’-диаминобензидин (DAB). TMB реагирует с HRP в пероксидном буфере с образованием водорастворимого синего продукта, который подходит для приложений, требующих большого отношения сигнал / шум. 4CN производит отчетливый сине-пурпурный продукт, который можно использовать для двойного окрашивания, несмотря на отсутствие чувствительности или стабильности, обеспечиваемой TMB и DAB. DAB дает осадок коричневого цвета.Цвет, производимый DAB, усиливается за счет добавления металлов (никеля, меди, серебра и кобальта), которые образуют комплексы, которые приводят к более темному окрашиванию продукта и, таким образом, повышают чувствительность к окрашиванию.
Для хромогенных AP-систем типичными субстратами хромогена являются нитросиний тетразолий (NBT) или 5-бром-4-хлориндолилфосфат (BCIP). NBT представляет собой гетероциклическую соль тетразолия, которая восстанавливается с образованием NBT-формазана, сильно окрашенного, нерастворимого в воде продукта, который является стабильным.Следовательно, продукт реакции не выцветает по сравнению с хромогенными продуктами фермента-субстрата HRP, которые могут исчезать под воздействием света. NBT гидролизуется AP и образует сине-фиолетовый осадок, который откладывается на нитроцеллюлозных мембранах. В отличие от хромогенных систем HRP, реакции AP можно инактивировать кислотными растворами, что позволяет многократно исследовать одну и ту же мембрану с помощью альтернативно окрашенных зондов антител. Системы AP по сравнению с системами HRP не требуют такой интенсивной химической очистки, которая может затруднить повторное зондирование мембраны для других целей.Однако в идеале хромогенный вестерн-блоттинг с AP использует комбинацию NBT и BCIP, что приводит к интенсивному черно-пурпурному осадку, который обеспечивает большую чувствительность к субстрату.
Комбинации субстратов NBT / BCIP с АР дают четкие полосы с небольшим фоновым окрашиванием, что идеально для применения Вестерн-блоттинга.
Набор для хромогенного вестерн-блоттинга использует преимущества ресурсов и времени. и простота хромогенного формата, а также повышенная чувствительность и гибкость AP-системы для предоставления конечным пользователям высокочувствительного и гибкого иммунодетектора с помощью уже оптимизированного, готового к использованию решения NBT / BCIP, которое используется с вторичными антителами против мыши, конъюгированными с фермент-репортер.В набор входят блокаторы / разбавители антител и промывочные буферы, совместимые с первичными мышиными антителами. Во время валидации продукта мы подтвердили, что время анализа составляет 2 часа, а время воздействия NBT / BCIP составляет всего минуту, а целевые белки с низким содержанием белка в лизатах клеток Jurkat (рис. 1 и 2).
Рисунок 1: Визуальное считывание для быстрых результатов. |
Рисунок 2: Обнаружение сложных белков. Клетки Jurkat обрабатывали 12,5 мкМ этопозидом в течение 18 часов. Загружали 12 мкг лизата на лунку. |
Рисунок 3: Адаптация к мультиплексному анализу. Клетки PANC-1, обработанные этопозидом. Загружено 20 мкг общего клеточного лизата. Тубулин мечен DAB. Каспаза, меченная NBT / BCIP. |
Флуоресцентное обнаружение
Подобно системам обнаружения ферментов, при флуоресцентном обнаружении по-прежнему используются комплексы антиген-антитело для обнаружения конкретных белков, которые были иммобилизованы на блот-мембране после разделения с помощью гель-электрофореза.
Флуоресцентный вестерн-блоттинг отличается от хемилюминесцентного детектирования использованием вторичных антител, связанных с флуорохромом. Результирующий сигнал обнаруживается с помощью системы визуализации флуоресценции, подобной эпифлуоресцентной микроскопии. Флуорохром, связанный с антителом, возбуждается источником света, и испускаемый флуоресцентный сигнал детектируется с помощью фильтров, зависящих от длины волны, и цифровых камер. Ключевой особенностью, которая отделяет флуоресцентное обнаружение от систем обнаружения ферментов, является то, что оно является более количественным.Хромогенное или хемилюминесцентное обнаружение предоставляет исследователю полуколичественный метод, поскольку конечный пользователь может определить присутствие или отсутствие интересующего его белка в своих образцах, а путем сравнения образцов вы можете сделать вывод об уровне экспрессии белка. Но при флуоресцентном обнаружении количество флуоресценции, производимой сигналом, прямо пропорционально количеству присутствующего белка.
Однако, как и в других методах, конечному пользователю по-прежнему необходимо оптимизировать соотношение сигнал / фон.Первоначально необходимо учитывать важные характеристики флуорофора как при выборе флуорофора, так и при оптимизации сигнала, такие как эффективность излучения фотона после поглощения фотона источника света (квантовый выход) и насколько хорошо флуорофор поглощает свет на определенной длине волны (коэффициент экстинкции). В совокупности они будут указывать на относительную яркость флуорофора.
Флуорофоры с более высокими квантовыми выходами и коэффициентами экстинкции обычно ярче.В ситуациях, когда конечный пользователь ожидает целей с низким содержанием в образце, высокая начальная яркость может быть полезной для обнаружения. При оптимизации сигнала также следует учитывать разницу в максимальных длинах волн возбуждения и излучения флуорофора (стоксов сдвиг). Флуорофоры с большими стоксовыми сдвигами могут минимизировать перекрытие между длинами волн возбуждения и излучения, увеличивая при этом интенсивность сигнала.
Кроме того, может потребоваться учитывать степень мечения вторичного антитела флуорофором.Слишком слабая флуоресцентная маркировка и интенсивность флуоресценции будут генерировать слабый сигнал. Низкий сигнал также может быть из-за низкого уровня антигена или чрезмерной промывки блоттинг-мембраны, даже если для усиления сигнала используется вторичное антитело. Слишком сильная флуоресцентная маркировка и сигнал будет слабым, потому что реагент обнаружения будет инактивирован, и сигнал будет гасить из-за передачи энергии резонанса Форстера (FRET). Чтобы смягчить это, иногда используются конъюгаты красителей в дальнем красном и инфракрасном диапазонах, такие как Alexa Fluor 680 и 790, потому что они обеспечивают низкое тушение, низкую фоновую флуоресценцию с высоким коэффициентом экстинкции, что дает чувствительный и надежный сигнал.И последнее, но не менее важное: спектры возбуждения и излучения каждого флуорофора следует учитывать в мультиплексных вестернах, чтобы избежать перекрытия.
Флуоресцентный вестерн-блот дает несколько преимуществ по сравнению с другими методами.
Например, возможность легко мультиплексировать или использовать несколько флуорофоров разного цвета для одновременного зондирования и обнаружения нескольких белков на одном и том же блоте. Флуорофоры разного цвета предназначены для различения белков-мишеней. В отличие от методов на основе ферментов, нет необходимости химически очищать и повторно зондировать блот при просмотре нескольких мишеней.Кроме того, конечному пользователю не нужно учитывать влияние времени инкубации субстрата или экспонирования пленки на обнаружение четкого сигнала. Однако конечному пользователю необходимо учитывать возможность перекрестной реактивности и использовать первичные антитела от разных видов хозяев и вторичные антитела, которые перекрестно абсорбируются против других видов. Еще одно преимущество заключается в стабильности флуорофоров. Сигналы стабильны в течение нескольких недель или месяцев, что позволяет сохранять блоты для повторной визуализации в более поздний момент времени без значительной потери сигнала.
| Флуоресцентное обнаружение | Хемилюминесцентное детектирование | Хромогенное обнаружение | |
| Подложки | Флуоресцентные красители и конъюгированные вторичные антитела | Подложки AP и HRP | Реагенты для определения цвета |
| Обнаружение | Инструменты для визуализации с соответствующими фильтрами или лазерами | Пленка и проявитель | КИПиА не требуются |
| Продолжительность сигнала | недель | Часы | месяцев |
| Соображения | Может одновременно обнаруживать несколько белков на одном блоте | Превосходная чувствительность, широкий выбор материалов для печати | Прямая визуализация без использования оборудования для обработки изображений или пленки |
Таблица 1.
Методы обнаружения вестерн-блоттинга.Enzo Life Sciences предлагает тысячи антител против пептидов, целых или частичных белков, а также модифицированных пептидов или белков. Благодаря тысячам рецензируемых ссылок, нашей программе испытаний антител без беспокойства и экспертной технической поддержке вы можете рассчитывать на Enzo-антитела для получения надежных, последовательных и точных данных. Не стесняйтесь ознакомиться с нашими советами по успешному исследованию или нашими 10 советами по успешному вестерну. Кроме того, обратитесь в нашу службу технической поддержки для получения дополнительной помощи.
Наука о кляксах Роршаха
Когда психиатр Герман Роршах нанес чернила на бумагу, чтобы получить серию абстрактных узоров, мог ли он знать, что почти 100 лет спустя тест Роршаха станет нарицательным?
Хотя использование теста Роршаха для диагностики психических заболеваний в основном осталось в прошлом, исследования этого теста продолжаются. На прошлой неделе были опубликованы две новые статьи о пятнах Роршаха, в том числе , фрактальный анализ самих изображений и исследование сканирования мозга с использованием фМРТ.
Фрактальный анализ взят от Taylor et al. Университета Орегона, Юджин. Эти авторы сообщают, что пятна Роршаха с более низкой визуальной сложностью (в частности, с более низкой фрактальной размерностью, D) генерируют более разнообразные интерпретации в умах наблюдателей.
Тейлор и др. скажем, что
Природные объекты, фрактальные характеристики которых могут вызывать узнаваемые изображения, включают скальные поверхности, узоры береговой линии, облака и кратеры на Луне. В частности, многие облака имеют фрактальные границы, количественно оцениваемые как D = 1.3 (аналогично пятнам Роршаха) и хорошо известны тем, что вызывают восприятие в нашей повседневной жизни.
К сожалению, корреляция между фрактальной размерностью и количеством восприятий имела размер выборки всего пять, потому что только половина из десяти пятен Роршаха была включена в анализ (поскольку другие включают цвета). Тем временем итальянские исследователи Лучано Джиромини и его коллеги провели исследование фМРТ, в котором 26 здоровым добровольцам показали полный набор пятен и попросили «посмотреть на каждое пятно и подумать, что это может быть, пытаясь увидеть только одну вещь на каждое пятно.
design « Наблюдение за пятнами было связано с повсеместным увеличением активности мозга:
Авторы продолжают обсуждать, что означают эти паттерны активности.Например:
Задача Роршаха сильно активировала переднюю часть таламуса, большую часть легочной артерии и часть мамиллярных тел. Эти области являются частью лимбической системы и, как считается, способствуют восприятию и обработке эмоций, особенно в отношении памяти … Таким образом, с точки зрения оценки Роршаха, это открытие особенно интригует. По сути, это показывает, что просмотр чернильных пятен Роршаха при размышлении о том, чем они могут быть, активирует области мозга, которые участвуют в восприятии и обработке эмоций и эмоциональных воспоминаний…. Таким образом, наше исследование косвенно подтверждает идею о том, что шкалу Роршаха можно использовать для исследования способности и желания респондента сосредоточиться, говорить и / или иметь дело с эмоционально нагруженными стимулами, содержанием и / или воспоминаниями.
Если честно, такая функциональная интерпретация изображений фМРТ имеет много общего с интерпретацией пятен Роршаха. Может быть, мы имеем дело с каплями Роршаха ? Однако здесь есть более серьезная проблема, заключающаяся в том, что активация мозга, вероятно, не была специфичной для просмотра изображений Роршаха, а вместо этого просто отражала нервную реакцию на любой сложный визуальный стимул.Это связано с тем, что исходным состоянием Giromini et al. Был крест фиксации, то есть видение + на экране. Перекрестный стимул менее сложен и меньше, чем изображение Роршаха (и менее красочен в случае 5 цветных пятен). Таким образом, мы не можем интерпретировать капли фМРТ как специфичные для Роршаха. Авторы признают это ограничение, но, похоже, не осознают, что оно фатально.
Тейлор Р.П., Мартин Т.П., Монтгомери Р.Д., Смит Дж. Х., Миколич А. П., Бойдстон С., Сканнелл Британская Колумбия, Фэрбенкс М.С. и Спехар Б. (2017).Видеть формы в кажущихся случайными пространственных узорах: фрактальный анализ чернильных пятен Роршаха.
PloS ONE, 12 (2) PMID: 28196082
Giromini L, Viglione DJ Jr, Zennaro A и Cauda F (2017). Нейронная активность во время производства ответов Роршаха: исследование фМРТ. Psychiatry Research, 262, 25-31 PMID: 28208069
Ремесленный нож: чернильные кляксы в стиле Роршаха своими руками
Недавно Уилл изучала тест Роршаха в рамках своей учебной программы по психологии AP и показала мне, что на самом деле анализируется не то, ЧТО вы определяете в чернильном пятне, а КАК вы приходите к этой идентификации.Очевидно, психологов больше интересует ваш мыслительный процесс, восприятие, принятие решений и общение, чем то, думаете ли вы, что все это гитара, или две собаки, играющие в покер, или что-то еще.Что все действительно круто, но пока Уилл рассказывал мне все это, я в основном думал: «Ой, мы должны снова сделать чернильные кляксы!»
Сидни пережила серьезную одержимость симметрией, когда ей было пять или шесть лет, поэтому в те дни мы тратили МНОГО времени вместе, делая чернильные кляксы.
Вот, я позволю ей объяснить вам, как создаются чернильные кляксы:
В таком случае вполне уместно, что я выкопал остатки этих семилетних красок BioColor в недавний прекрасный полдень. чтобы мы с детьми смогли вернуться к этому давно полюбившемуся ремеслу.
Можете ли вы поверить, что Сид даже не помнил, что мы делали это раньше?!? Как с течением времени могут исчезнуть воспоминания о том, что мы когда-то любили …
Чтобы избежать складки в середине отпечатка, на этот раз мы опробовали другую технику. Я снова позволю Сиду продемонстрировать:
1. Отрежьте кусок алюминиевой фольги или вощеной бумаги до нужного размера, затем согните его по вертикали. Добавляем краску:
2. Сложите фольгу или вощеную бумагу по складке:
3.Откройте его, чтобы увидеть симметричное изображение!
4.
Положите поверх краски кусок плотной бумаги. Мы использовали эту акварельную бумагу: 5. С помощью брайера (или скалки, предназначенной для пластилина) разгладьте бумагу, убедившись, что она хорошо контактирует с краской:
6. Осторожно поднимите бумагу и полюбуйтесь своим искусством (или разочаруйтесь в нем)!
Это был довольно расслабляющий и довольно интересный способ провести часть приятного дня!
Хотя, честно говоря, я не думаю, что конечный результат страницы без вертикальной складки стоил дополнительного времени и материалов, затраченных на печать на алюминиевой фольге в первую очередь:
В традиционном наборе чернильных пятен одни являются черными чернилами на белой бумаге, другие — красными и черными чернилами на белой бумаге —
— и некоторые разноцветные.Детей больше всего интересовали разноцветные кляксы:
Было бы весело составить правильный набор из них, а затем попытаться анализировать друг друга!
Если вас интересует Роршах и его тест чернильными пятнами, вот еще пара ресурсов:
youtube.com/embed/LYi19-Vx6go»/>
Удивительно, но хороших книг не так много, и нет живых книг для детей, хотя если бы вы были супер в него вы определенно можете получить доступ к официальным тестовым материалам для игры.
И что это действительно говорит вам, так это то, что если вы начинающий автор детских книг, на рынке есть много места, чтобы начать с биографии Роршаха из книжки с картинками!
Фрактальный анализ чернильных пятен Роршаха
Abstract
Пятна Роршаха оказали поразительное влияние на мир искусства и науки из-за удивительного разнообразия ассоциаций с узнаваемыми и именуемыми объектами, которые они вызывают. Первоначально принятый как проективный психологический инструмент для исследования психического здоровья, психологи и художники в последнее время интерпретировали разнообразие индуцированных образов просто как признак творческого потенциала наблюдателей.Здесь мы анализируем взаимосвязь между параметрами пространственного масштабирования рисунков чернильных пятен и количеством индуцированных ассоциаций и предполагаем, что воспринимаемые изображения вызваны фрактальными характеристиками краев пятен.
Мы обсуждаем, как эта взаимосвязь объясняет частое наблюдение изображений в естественных пейзажах.
Образец цитирования: Тейлор Р.П., Мартин Т.П., Монтгомери Р.Д., Смит Дж. Х., Миколич А. П., Бойдстон С. и др. (2017) Видение форм в кажущихся случайными пространственных узорах: фрактальный анализ чернильных пятен Роршаха.PLoS ONE 12 (2): e0171289. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289
Редактор: Штефан Глазауэр, Университет Людвига-Максимилиана, Мюнхен, ГЕРМАНИЯ
Поступила: 29 июля 2016 г .; Одобрена: 19 января 2017 г .; Опубликовано: 14 февраля 2017 г.
Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, строить или иным образом использовать в любых законных целях.Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.
Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе.
Финансирование: Это исследование было поддержано Австралийским исследовательским советом, Исследовательской корпорацией по развитию науки и Фондом У. М. Кека.
Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.
Введение
В 1921 году Герман Роршах (1884–1922) опубликовал изображения десяти узоров с чернильными пятнами, которые, как считалось, открывали скрытые секреты человеческого бессознательного [1].Пропагандируемые как «психологический рентгеновский снимок», психиатры использовали кляксы для проверки психического здоровья на основе феномена парейдолии, при которой знакомые шаблоны воспринимаются в стимулах, когда их на самом деле нет. Паттерны Роршаха по-прежнему не имеют себе равных в своем применении, поскольку вполне возможно, что «ни один другой психологический тест не проводился более миллионам людей во всем мире» [2].
Сегодня их роль как проективного психологического инструмента имеет только историческое значение [3]. Вместо этого восприятие, вызванное пятнами, интерпретируется как признак творческого потенциала наблюдателей [4].В поддержку этой точки зрения художники, от сюрреалистов до Энди Уорхола, использовали кляксы как средство для пробуждения своего воображения. Замечательная склонность этих простых форм вызывать такое богатое разнообразие образов, до 300 различных восприятий, записанных для каждого пятна [5], остается интригующим. Если характеристики рисунка, стимулирующие эту плодотворную зрительную активность, можно будет идентифицировать и количественно оценить, полученные в результате достижения могут потенциально повлиять на различные приложения, начиная от дизайна камуфляжа до искусственного зрения.
Предыдущее эмпирическое исследование парейдолии [6] было мотивировано наблюдением, что люди легко воспринимают и идентифицируют значимые изображения во многих естественных, но в значительной степени неструктурированных конфигурациях, начиная от облаков, камней и трещин в земле до поверхности Луны.
Все эти структуры являются фрактальными, с узорами, повторяющимися при все более увеличении [7]. В исследовании изучалась взаимосвязь между масштабирующими характеристиками фрактальных паттернов, количественно определяемыми их фрактальной размерностью D [7], и способностью паттернов вызывать восприятие именуемых объектов.Было обнаружено, что с помощью компьютерных стимулов фракталы с низкими значениями D вызывают более высокую способность вызывать восприятие именуемых объектов. Это было одинаково независимо от того, содержали ли фрактальные узоры только контуры или закрашенные области. Более недавнее исследование показало, что включение лево-правой симметрии (центральная особенность чернильных пятен) во фрактальные стимулы, сгенерированные компьютером, еще больше усилило парейдолию [8].
Когда наблюдатели испытывают парейдолию, исследования нейронных реакций показывают, что активируются области мозга, связанные с распознаванием объектов [8, 9].Для самых разнообразных паттернов, от фракталов и спутниковых изображений до обложек журналов, оценки « заметности » (легкости распознавания изображений), вызванные этими паттернами, были в высшей степени согласованными внутри и между наблюдателями и оставались таковыми в течение как минимум один год [10].
Эти результаты убедительно свидетельствуют о том, что воспринимаемая заметность определяется присущими паттернам сенсорными факторами, общими для всех наблюдателей.
В соответствии с этим подходом к воспринимаемым изображениям, основанным на шаблонах, мы представляем анализ, показывающий, что количество индуцированных именуемых изображений, воспринимаемых в шаблонах Роршаха, связано с фрактальными характеристиками, которые возникают на краях пятен.Наш анализ, конечно, не обращается к идиосинкразической межличностной изменчивости типа изображений, воспринимаемых в таких паттернах, но убедительно показывает, что количество индуцированных изображений может быть связано с параметрами фрактального масштабирования. Результаты нашего анализа также объясняют частое появление узнаваемых образов в природных объектах, таких как облака, скалы и береговые линии.
Фрактальный анализ чернильных пятен Роршаха
Исторически технология, используемая для создания чернильных пятен Роршаха, была окутана тайной.
В частности, художественный вклад Роршаха редко признавался [3]. Капнув черными чернилами и акварельными красками на лист белой карты, он затем размазал жидкость ручкой, прежде чем сложить карту и прижать две поверхности вместе [3]. В то время как крупномасштабные узоры образовавшегося симметричного чернильного пятна, таким образом, являются следствием стиля «рисования», с помощью которого Роршах сознательно распределял жидкость по поверхности листа, более тонкая структура пятнистого узора возникла на второй стадии процесса, поскольку под давлением жидкость растекается по волокну карты.Несмотря на то, что Роршах по существу управляется физическими законами потока жидкости, творчество Роршаха в этом втором процессе материализовалось благодаря его выбору физических условий, определяющих течение. Эти условия считаются решающими для формирования сложной структуры получаемых блотов. Настолько важно, что Общество Роршаха одобрило только реплики блотов, созданные с использованием оригинальных инструментов Роршаха и в те дни, когда влажность воздуха точно соответствовала исходным условиям [2].
Сегодняшние коммерчески доступные кляксы Роршаха состоят из отсканированных изображений исходных клякс, чтобы избежать различий во внешнем виде клякс.
Несмотря на этот явно алхимический подход к пониманию пятен Роршаха, процедура создания тонкой структуры чернильных пятен аналогична той, которая используется во многих традиционных исследованиях морфологии жидкости [11]. Например, в экспериментах Хеле-Шоу (HS) жидкость нагнетается под давлением через пористую среду, а узор, создаваемый границей жидкости, известен как фрактальный, с шероховатостью, проявляющейся во многих масштабах [11]. Это возникает из-за конкуренции между давлением движущей жидкости и локальными силами сопротивления в пористой среде.В случае чернильных пятен движущее давление постепенно снижается по мере того, как пятно распространяется, и граница пятна перестает растекаться, когда движущая сила уравновешивается локальным резистивным давлением волокон пятна. Это резистивное давление изменяется локально, создавая пространственную шероховатость фрактальных узоров [11].
На рис. 1 мы сравниваем первый пятно Роршаха с компьютерным фрактальным пятном (созданным с использованием техники случайного смещения средней точки, описанной в другом месте [12]), чтобы продемонстрировать визуальное сходство их фрактальных характеристик.
Методы
Чтобы количественно оценить свойства масштабирования фракталов клякс Роршаха, мы провели анализ границ десяти клякс. Процедура продемонстрирована на рис. 2. Сначала блот сканировали с разрешением 300 точек на дюйм, а границу между областями впитывания чернил и неокрашенной картой извлекали с помощью компьютерного анализа обнаружения краев [13] с точностью 0,5 мм (соответствует 6 пикселей на отсканированном изображении).
Рис. 2.
(A) Увеличенное изображение Блота 7, выделение выделенной границы черной линией.Масштабная полоса соответствует 1,6 мм (19 пикселей на отсканированном изображении). (B) Пятерка Роршаха шириной 17,5 см. (C) Схематическое изображение метода подсчета ящиков, примененного к границе пятого пятна.
Показанный размер коробки представляет собой самый большой проанализированный размер коробки.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289.g002
Традиционный метод измерения фрактальной размерности границы D , называемый методом подсчета ячеек, показан на рисунках 2 и 3.Значение границы D описывает, как узоры, возникающие при разном увеличении, объединяются, чтобы построить результирующую фрактальную форму [14]. Для евклидовых форм размерность описывается знакомыми целочисленными значениями — для гладкой линии (без фрактальной структуры) D имеет значение 1, а для полностью заполненной области (опять же без фрактальной структуры) ее значение равно 2. Для повторяющихся структур фрактальной линии D находится между 1 и 2, и, поскольку повторяющаяся структура покрывает больше места, его значение приближается к 2.Для извлечения D граничный узор пятна покрывали созданной компьютером сеткой из идентичных квадратов (или «квадратов»).
Затем было подсчитано количество квадратов N ( L ), содержащих часть рисунка (т. Е. Заштрихованные прямоугольники на рис. 3 (C)), и этот подсчет был повторен как размер L квадраты в сетке были уменьшены. N ( L ) дает меру покрытия пространства узором, а уменьшение размера квадрата эквивалентно просмотру этого покрытия при более мелком увеличении.Для фрактального поведения N ( L ) масштабируется согласно соотношению степенного закона N ( L ) ~ L -D , где 1 < D <2 [14].
Рис. 3. Три верхних графика: анализ подсчета прямоугольников, примененный к пятой пятне Роршаха (черный), пятой пятне Роршаха (красный) и компьютерной фрактальной границе (синий).
Три нижних графика: производные трех графиков масштабирования (подробности см. В тексте).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289.g003
Результаты
Приведенный выше степенной закон генерирует масштабно-инвариантные свойства, которые являются центральными для фрактальной геометрии и проявляются в виде прямой линии на графике масштабирования логарифма N ( L ) по сравнению с логарифмом L , как показано на рис.
Пятый пятно Роршаха. Для определения диапазона масштабирования, обеспечивающего наилучшее линейное соответствие данным, использовалась автоматизированная процедура [15].Это было достигнуто путем изменения диапазона точек данных, включенных в подбор, чтобы минимизировать отклонение данных от линии подбора. Качество подгонки количественно оценивалось с помощью коэффициента детерминации R 2 , который увеличивается с качеством подгонки и находится в диапазоне от 0 до 1 [15]. Черная линия соответствия для пятого пятна описывается формулами D = 1,23 и R 2 = 0,9995.
Вертикальные пунктирные линии представляют грубые и точные отсечки, определенные процедурой подбора.Грубая отсечка шкалы соответствует пределу измерения, происходящему из уменьшенной статистики подсчета, которая возникает, когда количество ящиков в сетке становится слишком маленьким [16]. Для блоков размером более 2,7 см недостаточно блоков, чтобы отличить фрактальную границу от границы заполненного пространства: затем градиент увеличивается до D = 2, потому что все блоки в сетке становятся занятыми граничным узором.
Этот порог грубого измерения не может быть улучшен, потому что он связан с размером пятна.Однако это не ограничивает наше исследование, поскольку ожидается, что в моделях большего размера, чем этот масштаб, будет доминировать процесс «рисования» Роршаха, а не фракталы, вызванные жидкостью.
Наблюдаемое отсечение мелкомасштабного изображения происходит в гораздо большем масштабе (19 пикселей), чем отсечение при мелкомасштабном измерении (6 пикселей, устанавливается точностью процесса выделения границ). Чтобы подчеркнуть эту разницу, масштабная линейка на рис. 2 (A) представляет размер прямоугольника при наблюдаемом отсечении (1,6 мм). Таким образом, наблюдаемое мелкомасштабное обрезание представляет собой физический предел процесса генерации фракталов и является характеристикой экспериментов типа HS [11].Хотя граничная структура существует ниже этого масштаба, она больше не описывается фрактальным степенным законом поведения.
Рис. 3 также включает масштабный график, полученный, когда метод подсчета ячеек был применен к компьютерной фрактальной границе, показанной на рис.
4. Эта граница была сгенерирована с использованием метода преобразования Фурье [17] и имеет значение D (1,26 ) аналогично пятому пятну. Для сравнения синяя аппроксимирующая линия была сформирована в том же диапазоне масштабирования, что и пятый пятый образец, и количественно оценивается как R 2 = 0.9997. В то время как значение R 2 подгонки пятого пятна соответствует этому с точностью до трех десятичных разрядов, линия подбора пятого пятна в том же диапазоне масштабирования количественно определяется значением R 2 , это только два (0,9976), что указывает на то, что Blot Ten не так точно следует поведению фрактального степенного закона. Когда процедура аппроксимации для Blot Ten позволила выбрать точки данных, которые минимизируют R 2 (в результате красная линия определяется как R 2 = 0.9992), диапазон масштабирования L значительно меньше десятикратного.
Хотя определение фракталов не предусматривает минимального диапазона размеров для масштабирования [7], степенные законы обычно требуют как минимум одного порядка величины для уверенного обнаружения.
Рис. 4. Компьютерные фрактальные границы.
Черный узор имеет значение D , равное 1,26, что близко соответствует значению пятого пятна Роршаха, в то время как серый узор имеет гораздо более высокое значение D , равное 1.77. Черные и белые квадраты указывают наименьший и наибольший размеры прямоугольника, используемые при фрактальном анализе этих границ.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289.g004
Чтобы подчеркнуть отклонение Blot Ten от фрактального поведения, производные трех графиков масштабирования нанесены под линиями данных на рис. 3. В каждом случае производная рассчитывалась с использованием линейной аппроксимации четырех ближайших соседей по обе стороны от каждой точки данных (т. е. девять точек использовались для определения каждого из значений производной).
Производные пятого пятна (черная кривая) и компьютерного фрактала (синяя кривая) расположены горизонтально в области между вертикальными пунктирными линиями (значения D для которых нанесены на левую ось), в то время как производная для Blot Ten (красный след) увеличивается постепенно. Такое поведение не распространяется прямо на линии отсечения из-за расчета 9 точек (например, значение производной, нанесенное на линию отсечения, будет зависеть от 4 точек внутри фрактальной области и 4 точек за ее пределами).Также обратите внимание, что «выпуклости» на графиках производных являются внутренней особенностью фракталов (о чем свидетельствует их появление в данных фрактала, сгенерированного компьютером) и являются результатом статистических вариаций.
Пятый пятно — одно из пяти пятен Роршаха, созданных с использованием только черных чернил. Фрактальные свойства масштабирования всех пяти из этих черных пятен подтверждены анализом подсчета ящиков, а также независимой техникой, известной как «метод береговой линии» [14].
Значения D для пяти блотов: Первый блот ( D = 1.11), Четыре (1,22), Пять (1,23), Шесть (1,17) и Семь (1,13). Этот диапазон от 1,1 до 1,3 для D соответствует значениям, измеренным в экспериментах с HS [11]. В экспериментах HS различия в измеренных значениях D являются результатом изменений приложенного давления и вязкости жидкости, и мы интерпретируем различные значения D для пяти блотов с точки зрения аналогичных изменений в процессе создания блотов Роршаха. На этом изображении интересно отметить, что влажность воздуха влияет на скорость испарения жидкости, что приводит к колебаниям управляющего давления растекающихся чернил.Это согласуется с традиционным представлением о том, что погодные условия влияли на формирование структуры тонкой структуры в пятнах [2].
Остальные пять пятен Роршаха состоят из нескольких областей разного цвета, образованных черными чернилами и акварельными красками. Графики масштабирования этих цветных пятен аналогичны данным Blot Ten, показанным на Фиг.
3. Обратите внимание, что, как и в случае с черными пятнами, граница разноцветных пятен соответствует границе между окрашенной и неокрашенной промокательной бумагой (т.е.е. цвет игнорируется). Физическая причина отсутствия фрактальности цветных пятен заключается в том факте, что границы окрашенных подобластей являются фрактальными, но с разными значениями D относительно друг друга (предположительно из-за различий в текучести чернил и приложенном давлении) . Например, значения D оранжевой и синей областей пятна Роршаха Ten составляют 1,1 и 1,41 соответственно (см. Рис. 5). Масштабирующие свойства паттерна, составленного из двух отдельных фракталов, зависят от таких факторов, как относительная плотность двух паттернов, масштабирование прямоугольников, содержащих оба паттерна, и разница в их значениях D [18].В частности, для паттернов, таких как пятна Роршаха, ожидается, что большая разница в значениях D для подобластей предотвратит фрактальную масштабную инвариантность комбинированного паттерна, как это видно на графике масштабирования, показанном на рис.
. Хотя графики масштабирования цветных пятен показывают, что их границы не могут быть определены количественно с помощью простого подсчета ящиков, мы отмечаем, что мульти-фрактальный анализ [19] может выявить дополнительную информацию об их масштабных характеристиках.
Изображения, воспринимаемые в чернильных пятнах Роршаха
Ключевой вопрос в нашем анализе касается взаимосвязи между фрактальными свойствами границ пятен и количеством изображений, воспринимаемых при наблюдении за пятнами. Чтобы решить эту проблему, мы повторно посетили два оригинальных эмпирических исследования, касающихся количества ответов на отдельные пятна Роршаха. Во-первых, психологом Маргаритой Герц [20] было составление ответов на каждый из блот-тестов Роршаха. Как член-основатель Института Роршаха, Герц впервые ввел стандартизированную оценку тестов на чернильные пятна в 1930-х годах и разработал Таблицы частот для оценки ответов Роршаха.Эти таблицы были созданы путем тщательной каталогизации различных типов восприятия (например, изображения летучей мыши, человека и т.
Д.) Для каждого из десяти пятен Роршаха, созданных совокупной выборкой из N = 1050 субъектов в возрасте 11–19 лет [5 ]. Для целей нашего анализа мы просто подсчитали количество различных типов восприятия, представленных для пяти черных пятен, и нанесли эти эмпирически определенные значения n против их соответствующих значений D , полученных в результате нашего анализа (рис.6, красные символы).Обратите внимание, что точно так же, как D количественно определяет границу всего блота, n количественно определяет количество типов восприятий, индуцированных всей границей, и не включает восприятия, индуцированные компонентами областей блотов. Данные показывают тенденцию к снижению, указывающую на важность D в наблюдении количества индуцированных восприятий.
Рис. 6. Число восприятий, n , индуцированных пятью черными пятнами, как функция значения D их границ.
На вставке приведены значения D для пяти блотов вместе с соответствующими данными Герца [5] и Вирта и МакРейнольдса [21] соответственно.
Для целей прямого сравнения исходные оценки n были стандартизированы как z-значения и показаны в скобках. Горизонтальная пунктирная линия представляет собой средний балл для каждого из двух наборов данных. Красные и синие линии представляют собой линейные аппроксимации соответствующих данных, а пунктирные линии представляют границы 95% доверительных интервалов.Обратите внимание, что три из синих точек данных (для пятен 1, 5 и 6) закрыты эквивалентными красными точками.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289.g006
Поразительно похожую тенденцию можно также наблюдать со второй независимой эмпирической выборкой восприятий для каждого блоттинга Роршаха, о которой сообщили Вирт и МакРейнольдс в 1953 г. [21] . Общее количество ответов является одной из стандартных переменных при проведении теста Роршаха (так называемая переменная Роршаха « R» ), и Вирт и Макрейнольдс интересовались, насколько эта мера надежна, воспроизводима и согласована с от одного случая тестирования к другому.
С этой целью они определили среднее и стандартное отклонение общего количества ответов для каждого блота в образцах нормальных ( N = 76), невротических ( N = 32) и шизофренических ( N = 50). предметы. Затем блоты были разделены на две группы по пять блотов, чтобы определить, были ли ответы на две группы одинаковыми. Корреляция между оценками для двух групп блотов составила 0,88, 0,91 и 0,77 для нормального, невротического и шизофренического образцов соответственно, что указывает на высокую надежность (оценка 1 представляет собой идеальную корреляцию).Хотя относительно высокая надежность общего количества ответов сама по себе обнадеживает, мы воспользовались возможностью, чтобы сравнить сообщенное количество общих ответов для каждого из пяти черных пятен с оценками, основанными на ответах, собранных Герцем [5].
Мы отмечаем, что значения, записанные Виртом и МакРейнольдсом, представляют собой среднее количество восприятий, о которых один человек сообщил на блот при одном проведении теста.
Точнее, каждое значение относится к среднему количеству ответов на вопрос «Что это может быть?» для каждого отдельного блота.В среднем один человек видел от одной до трех фигур в каждом пятне, всего от 20 до 30 за весь тест. Таким образом, значения n для теста Вирта и Мак-Рейнольдса намного меньше, чем значения из данных Hertz, которые основаны на совокупном количестве типов восприятия, о которых сообщили более 1000 участников. Числа Герца указывают на вариабельность ответов на уровне группы, в то время как числа Вирта и Макрейнольдса в некоторой степени являются показателем вариабельности на уровне одного человека.Несмотря на эти различия в записи n , стандартизованные z-баллы для среднего числа общих ответов, представленных Wirt и McReynolds, обозначенные синими символами на рисунке 6, точно соответствуют той же обратной зависимости между n и D . значения найдены в данных Герца.
Изображения, воспринимаемые с помощью компьютерных фракталов
Естественно, фрактальная структура границы — не единственная причина большого количества восприятия, вызванного черными пятнами — другие вероятные факторы включают симметрию пятна (слева направо) [8], а также затенение вызвано вариациями непрозрачности чернил в областях, ограниченных границами.
Один из способов выделить вклад вариаций фрактальной размерности — исследовать воспринимаемые изображения в компьютерных фрактальных моделях, изменяющихся только в D . Вторая мотивация для использования компьютерных стимулов заключается в том, что исследование блотов неизбежно ограничивалось всего десятью стимулами. Распространяя исследования на компьютерные стимулы, мы исследовали ответы на 24 дополнительных изображения.
Участников
Для этого исследования были использованы 23 студента-психолога первого курса из Университета Нового Южного Уэльса ( N мужчин = 10, N женщин = 13) со средним возрастом 18 лет.9 лет. Студенты получили дополнительные кредиты по курсу в обмен на их участие, и у них было нормальное или исправленное зрение. Перед началом эксперимента все участники подписали форму информированного согласия. Все процедуры и протоколы были одобрены Комиссией по утверждению этики исследований на людях Университета Нового Южного Уэльса (HREAP C).
Материалы
Для генерации фрактальных изображений использовались три различных «затравки» с использованием метода преобразования Фурье, описанного в другом месте [22].В каждом наборе семян было 8 изображений с диапазоном D от 1,05 до 1,95. Все изображения были 512 на 512 пикселей в ширину и имели одинаковую среднюю яркость и контраст. Один набор изображений показан в верхней части рис. 7.
Рис. 7. Стандартизованное количество зарегистрированных восприятий, n , вызванных сгенерированными компьютером фрактальными моделями, нанесенными на график как функция их значения D .
Один набор компьютерных изображений показан над графиком. Пунктирные линии представляют границы 95% доверительных интервалов.На вставке приведены значения D изображений вместе с соответствующим средним числом заявленных воспринимаемых форм.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0171289.g007
Процедура
Перед сбором данных участники получили печатные версии изображений, показывающих вариации в D , и выполнили 4 практических испытания.
Исследование проводилось в комнате с регулируемым освещением, участники располагались на расстоянии 60 см от монитора.Все стимулы имели угол обзора 12 на 12 градусов и центрировались на однородном сером фоне.
Представление каждого из изображений было случайным, и каждое изображение было представлено один раз и продолжительностью 10 секунд. Перед каждым испытанием на 500 миллисекунд появлялся фиксирующий крест. После того, как каждое изображение было показано, участников спрашивали, сколько форм они могли различить на изображении. Варианты ответа включали «нет», «1 или 2 фигуры», «3 или 4 фигуры», «5 или 6 фигур» или «7 или более».”
Результаты
Перед анализом ответы были преобразованы в числовые значения путем взятия среднего числа чисел в каждом выборе, за исключением «нет», которому дали «0», и «7 или более», которому было дано «7,5». Сообщенное количество воспринимаемых форм, усредненное по трем различным наборам изображений, показано на рис. 7. Затем мы применили стандартную статистическую процедуру дисперсионного анализа (ANOVA) к данным.
Однофакторный дисперсионный анализ с повторными измерениями показал значительное влияние D на количество зарегистрированных форм ( F 2 . 925 , 64 . 34 = 3,17, p = 0,03).
Связь между D и n , наблюдаемая для пятен Роршаха, и наши компьютерные фрактальные модели также согласуются с предыдущим исследованием компьютерных фрактальных моделей [6] и подтверждают, что низкие фрактальные границы D обеспечивают лучший стимул для индуцированных ассоциаций с именуемыми объектами. Наше исследование подтверждает эффект для расширенного диапазона D и для гораздо более мелких шагов интервала между различными значениями D .Что еще более важно, предыдущее исследование просто отображало группы из четырех изображений с разными значениями D и регистрировало процент раз, когда каждое изображение было выбрано по сравнению с другими, в зависимости от того, какое изображение вызвало больше предписаний.
Напротив, в нашем эксперименте регистрировалось количество восприятий, вызванных каждым изображением, что позволяло проводить прямое сравнение с исходными блот-тестами.
Обсуждение
Фрактальное измерение играет решающую роль в определении внешнего вида узора. Возвращаясь к поведению масштабирования на фиг. 3, D соответствует градиенту графика масштабирования.Таким образом, высокое значение D является признаком большого значения N ( L ) при маленьком L и отражает тот факт, что многие маленькие коробки заполняются мелкой структурой. Это можно увидеть, например, для двух сгенерированных компьютером фрактальных границ, показанных на рис. 4. Мелкие детали играют более доминирующую роль для шаблона D = 1,77, чем для шаблона D = 1,26. Содержание мелких элементов для шаблона D = 1,26 намного ближе к содержанию пятого пятна ( D = 1.23).
Из-за этой связи между D и содержанием тонкой структуры, D является хорошо зарекомендовавшим себя инструментом для количественной оценки фрактальной сложности [7, 14].
Традиционные меры визуальных паттернов количественно определяют сложность с точки зрения соотношения тонкой и грубой структуры. D идет дальше, количественно оценивая относительный вклад фрактальной структуры при всех промежуточных увеличениях между грубым и мелким масштабами. Предыдущие психофизические эксперименты, проведенные с фрактальными паттернами, подтверждают, что повышение значения D увеличивает воспринимаемую сложность [23–25].Таким образом, увеличение количества индуцированных восприятий между различными блотами может быть связано с уменьшением их фрактальной сложности.
В дополнение к зависимости n от D , важность фрактальной границы для стимулирования восприятия дополнительно подчеркивается тем фактом, что нефрактальные разноцветные пятна вызывают меньшее количество восприятий ( n = 140 к 170), чем их фрактальные черные аналоги ( n = от 170 до 300) [5]. Отметим, однако, что могут быть дополнительные причины для этого падения n .
В частности, для разноцветных пятен составляющие области (каждая с отдельным цветом) могут визуально преобладать над всем пятном. Формы границ этих составляющих областей будут тогда преимущественно определять восприятие, а не границу всего пятна. Это приведет к более низкому значению n , поскольку n количественно определяет только восприятие, вызванное всем блотом. Этот эффект согласуется с данными, свидетельствующими о мощной роли цвета в сегментации изображения [26].
Хотя значения n для цветных пятен меньше, чем для их черных аналогов, тем не менее, они все же имеют значительную величину. В нашем текущем исследовании мы сосредоточились на измерении подсчета ящиков D из-за ряда предыдущих психофизических экспериментов, которые связывали визуальные свойства фракталов с D [6, 17, 22–25, 27–37]. Однако, как отмечалось ранее, в будущих исследованиях следует изучить, могут ли другие параметры масштабирования, выявленные в результате мультифрактального анализа, объяснить восприятие, вызванное цветными пятнами.
Интересно, что фракталы играют такую важную роль, учитывая, что структура ограничена масштабами размером менее примерно 2,5 см (узоры размером более 2,5 см были созданы не процессом фрактальной диффузии чернил, а действиями Роршаха по размазыванию чернил до того, как прессование). Таким образом, на рис. 8 мы демонстрируем визуальную важность фрактальной структуры, удалив эту структуру с границы седьмого пятна Роршаха путем преобразования Фурье изображения блота и удаления пространственных частот, соответствующих режиму фрактального масштабирования (2-25 мм).Этот процесс явно влияет на визуальное восприятие пятна.
Способность зрительной системы человека обнаруживать фрактальные характеристики на основе только ограниченного диапазона увеличения была подчеркнута в предыдущих психофизических экспериментах [6, 17, 22–25, 27–37]. Эта замечательная чувствительность к фракталам, возможно, не удивительна, учитывая, что многие из физических фракталов, которые определяют нашу повседневную визуальную среду, демонстрируют фрактальные характеристики в ограниченных диапазонах увеличения [38].
Эта связь с природой подчеркивает еще один важный фактор для создания воспринимаемых изображений — статистическое качество фрактального узора.На рис. 9 показан фрактальный паттерн, основанный на кривой Коха, которая имеет значение D (1,26), аналогичное пятому пятому блоту Роршаха на рис. 2 и низкому фракталу D , сгенерированному компьютером на рис. преобразовать «точный» фрактал (где узоры точно повторяются при разном увеличении) в более естественный «статистический» фрактал (в котором статистические качества фрактала повторяются при разном увеличении) путем введения случайных изменений во фрактальный узор следующим образом .Вероятность p того, что «пик» на кривой будет направлен вверх или вниз, изменяется для трех кривых на рис. 9. Для традиционной кривой Коха p = 0, что соответствует нулевой вероятности того, что пик будет направлен вниз. Для второго изображения p = 0,25, поэтому большинство шипов направлены вверх. Для третьей кривой p = 0,5, что соответствует 50% вероятности поворота вверх или вниз.
В каждом случае пространственное распределение пиков вверх и вниз является случайным.
Эти случайные вариации сохраняют свойства масштабирования фракталов, такие как D , одновременно удаляя искусственный вид точного паттерна Коха, позволяя проявиться более «органическому» визуальному характеру, который, как мы предполагаем, усиливает способность паттерна вызывать ассоциации с именуемыми объектами и / или узнаваемые образы. Оптимальным представляется интегрирование случайных вариаций с фрактальным масштабированием D = 1,1. Отметим, что чисто случайный белый шум также может вызывать восприятие [8].Однако, поскольку белый шум характеризуется D = 2 [39], данные на рисунках 6 и 7 предполагают, что более низкие значения D (соответствующие розовому шуму [39]) будут вызывать больше восприятий, чем чисто случайные паттерны.
Природные объекты, фрактальные характеристики которых могут вызвать узнаваемость изображений, включают скалы, узоры береговой линии, облака и кратеры на Луне.
В частности, многие облака имеют фрактальные границы, количественно оцениваемые как D = 1.3 (аналогично пятнам Роршаха) и хорошо известны тем, что вызывают восприятие в нашей повседневной жизни. Биологические примеры фракталов, которые вызывают ассоциации с именуемыми объектами, включают отметины животных [40], явление, которое вдохновило на исследования фрактального камуфляжа [41]. Фрактальные образы также очевидны в произведениях искусства. В частности, сюрреалисты разработали несколько методов создания узоров, вызывающих образы. Ярким примером является техника Оскара Домингеса, декалькомания [42], для которой он нарисовал поверхность, прижал к ней лист бумаги и затем снял его.Вливание воздуха в краску при разделении двух слоев вызвало фрактальный процесс, называемый вязкой аппликатурой [43]. Домингес описал полученные в результате модели как «несравнимые по [своей] силе внушения», подчеркнув склонность этих простых фрактальных моделей к запуску поразительного разнообразия образов.
Картины абстрактного экспрессиониста Джексона Поллока состоят из фракталов со значениями D , которые увеличились с 1,1 до 1,7 за десятилетие 1943–1952 годов [32, 44].Интересно то, что Поллок, похоже, знал, что его стремление к рисункам более высокой сложности уменьшит количество наведенных заповедей: «Я стараюсь держаться подальше от любого узнаваемого изображения; если он вкрадывается, я пытаюсь с этим покончить… Я не позволяю изображению нести картину… Это лишний груз — и ненужный »[45].
Выводы
Анализ чернильных пятен Роршаха обеспечивает привлекательную основу для понимания богатого разнообразия визуальных ассоциаций, вызванных фрактальными узорами, охватывающими психологию, искусство и природу.В каждом случае повторение структуры при все более мелком увеличении создает визуальную сложность, необходимую для создания воспринимаемых изображений. В рамках этой фрактальной модели низкие фракталы D обеспечивают оптимальное распределение пространственных частот для создания изображений.
Напротив, преобладание тонкой структуры в высоких фракталах D , по-видимому, снижает восприятие узнаваемых изображений. Возможность настраивать количество восприятий путем корректировки значения D компьютерных фракталов имеет огромный потенциал как для изобразительного искусства, так и для визуальных наук.Учитывая недавний акцент на связи между изображениями, вызванными пятнами, и творчеством наблюдателя [4], интересно отметить, что творческие люди, сообщающие о себе, предпочитают смотреть на фракталы с более высокими значениями D [46]. Поэтому было бы интересно исследовать, как зависимость n от D , выявленная на рисунках 6 и 7, зависит от творческого потенциала наблюдателей. Еще одно возможное направление будущих исследований касается взаимоотношений между восприятием и эстетикой.Отметим, что предыдущее исследование фрактальных границ кляксов было сосредоточено на их эстетике [47]. Однако блоты были проанализированы после фильтрации на красный, синий и зеленый цвета.
Эта разница между их изображениями и нашими нефильтрованными изображениями не позволяет сравнивать эти два исследования.
Вклад авторов
- Концептуализация: RPT.
- Формальный анализ: TPM APM CB BCS MSF JHS RDM.
- Методология: RPT BS.
- Администрация проекта: RPT.
- Программное обеспечение: TPM APM CB BCS MSF RDM JHS.
- Проверка: RPT.
- Написание — черновик: RPT BS.
- Написание — просмотр и редактирование: RPT BS TPM APM CB BCS MSF JHS RDM.
Ссылки
- 1. Роршах Х. Психодиагностика, методика и результаты экспериментов по диагностике. Берн Эрнст Бирхер; 1921 г.
- 2. Веб-сайт Общества Роршаха: http://www.Rorschach.com.
- 3.
Wood JM, Nezworski MT, Lilienfeld SC и Garb HN.
Что не так с Роршахом? Сан-Франциско: John Wiley & Sons; 2003. - 4. Грегори Р. Роршаха вспять. Природа. 2000; 404: 19. pmid: 10716422
- 5. Hertz MR. Таблицы частот для оценки ответов Роршаха, 5 -е издание . Кливленд: Университетское издательство Кейс Вестерн Резерв; 1971 г.
- 6. Rogowitz BE & Voss RF. Восприятие формы и контуры фрактальных границ малой размерности. S.P.I.E. Человеческое зрение и электронные изображения: модели, методы и приложения. 1990; 1249: 387.
- 7. Мандельброт ББ. Фрактальная геометрия природы. Сан-Франциско: W.H. Фримен и Ко; 1982.
- 8. Лю Дж., Ли Дж., Фэн Л., Тиан Дж. И Ли К. Видеть Иисуса в тосте: нейронно-поведенческие корреляты парейдолии лица. Cortex. 2014; 53: 60–77.pmid: 24583223
- 9.
Бис А.Дж., Кикумото А., Бойдстон С., Гринфилд А., Човен К.А., Тейлор Р.П. и др. Восприятие из шумовых паттернов: роль фрактальной размерности в парейдолии объекта. Ежегодное собрание Vision Science 2016.
- 10. Серф М., Клири Д.Р., Питерс Р.Дж., Эйнхаузер В. и Кох К. Наблюдатели едины при оценке заметности изображения. Исследование зрения. 2007; 47: 3052–3060. pmid: 17923144
- 11. Барабаши А. и Стэнли Х. Фрактальные концепции в росте поверхности.Кембридж: Издательство Кембриджского университета; 1995.
- 12. Bies AJ, Boydston CR, Taylor RP и Sereno ME. Связь между фрактальной размерностью и скоростью распада спектрального масштабирования в компьютерных фракталах. Симметрия. 2016; 66: 1.
- 13. Bies AJ, Boydston CR, Taylor RP и Sereno ME. Статистика резких изображений: полуавтоматический алгоритм выделения краев и подсчета фрактальных ящиков позволяет количественно определять размер краев в естественных сценах. Журнал видения.2015; 15: 769.
- 14. Gouyet JF. Физика и фрактальные структуры. Нью-Йорк: Спрингер; 1996.
- 15.
Монтгомери RD. Фрактальные электроды для сопряжения нейронов с имплантатами сетчатки . Кандидатская диссертация. Юджин, Орегонский университет; 2014.
- 16. Тейлор Р.П., Гусман Р., Мартин Т.М., Холл Г., Миколох А.П., Джонас Д. и др. Аутентификация картин Поллока с помощью фрактальной геометрии. Письма о признании. 2007; 28: 695.
- 17.
Хагерхолл С.М., Лайке Т., Тейлор Р.П., Кюллер М., Кюллер Р. и Мартин Т.П.Исследование реакции ЭЭГ на фрактальные паттерны. Восприятие. 2008; 37: 1488–1494. pmid: 1
53
- 18. Тейлор Р.П., Миколич А.П. и Джонас Д. Возвращение к литым картинам Поллока. Природа, возникновение общения. 2006; 44.
- 19. Мурейка-младший и Тейлор Р.П. Абстрактные экспрессионисты и автоматисты: общая мульти-фрактальная глубина. Обработка сигналов. 2013; 93: 573.
- 20. Hertz MR. Методика проведения чернильного теста Роршаха.Развитие ребенка. 1936; 7: 237–254.
- 21.
Вирт Р. Д. и Макрейнольдс П. Достоверность числа ответов Роршаха. Журнал проективных методик. 1953: 17: 4, 493–494. pmid: 13118582
- 22. Спехар Б., Уокер Н. и Тейлор Р.П. Таксономия индивидуальных вариаций эстетической реакции на фрактальные узоры. Границы нейробиологии человека. 2016; 10: 00350.
- 23. Cutting JE & Garvin JJ. Фрактальные кривые и сложность. Восприятие и психофизика.1987; 42: 365–370. pmid: 3684493
- 24. Pentland AP. Фрактальное описание природных сцен. Анализ паттернов IEEE и машинный интеллект PAMI-6. 1984; 661–674.
- 25. Гилден Д.Л., Шмуклер М.А., Клейтон К. Восприятие естественного контура. Психологический обзор. 1993; 100: 460–478. pmid: 8356186
- 26. Gegenfurtner KR и Kiper DC. Цветовое зрение. Ежегодный обзор нейробиологии. 2003; 26: 181–206. pmid: 12574494
- 27.Книл Д.К., Филд Д. и Керстен Д. Человеческое распознавание фрактальных изображений. J. Opt. Soc. Являюсь. 1990; 7: 1113–1123.
- 28. Aks DJ & Sprott JC. Количественная оценка эстетического предпочтения хаотических узоров. Журнал эмпирических исследований искусств. 1996; 4: 1–16.
- 29. Хагерхолл К.М., Перселл Т и Тейлор Р.П. Фрактальная размерность очертаний пейзажного силуэта является предиктором ландшафтных предпочтений. J. Environ. Psychol. 2004; 24: 247–255.
- 30.Спехар Б., Клиффорд CWG, Ньюэлл Б.Р. и Тейлор Р.П. Универсальная эстетика фракталов. Comput. График. 2003; 27: 813–820.
- 31. Тейлор Р.П. и Спротт Дж. Биофильные фракталы и визуальное путешествие органических хранителей экрана. Журнал нелинейной динамики, психологии и наук о жизни. 2008; 12: 117–129.
- 32. Тейлор Р.П., Спехар Б., ван Донкелаар П. и Хагерхолл С.М. Перцепционные и физиологические реакции на фракталы Джексона Поллока. Границы нейробиологии человека.2011; 5: 1–13.
- 33.
Спехар Б. и Тейлор Р.П. Фракталы в искусстве и природе: почему они нам нравятся? SPIE 2013; 8651: 865118.
- 34. Хагерхолл К.М., Лайке Т., Куллер М., Марчески Э., Бойдстон К. и Тейлор Р.П. Физиологические преимущества наблюдения за природой для человека: реакция ЭЭГ на точные и статистические фрактальные паттерны. Журнал нелинейной динамики, психологии и наук о жизни. 2015; 19: 1–12.
- 35. Спехар Б., Вонг С., Ван де Клундерт С., Луи Дж., Клиффорд CWG и Тейлор Р.П.Красота и смотрящий: роль зрительной чувствительности в визуальном предпочтении. Границы нейробиологии человека. 20156; 9: 1.
- 36. Улица N, Форсайт А, Рейли Р.Г., Тейлор Р.П., Бойдстон С. и Хелми М.С. Сложная история: универсальные предпочтения против индивидуальных различий, формирующих эстетический отклик на фрактальные узоры? Границы нейробиологии человека. 2016; 10: 1–14.
- 37.
Бис А.Дж., Блан-Голдхаммер Д.Р., Бойдстон С.Р., Тейлор Р.П. и Серено М.Э. Эстетические реакции на точные фракталы, обусловленные физической сложностью.Границы нейробиологии человека. 2016; 10: 1.
- 38. Авнир Д., Бихам О., Лидар Д. и Малкай О. Является ли геометрия природы фрактальной? Наука. 1998; 279: 39.
- 39. Фэрбенкс М.С. и Тейлор Р.П. Масштабный анализ пространственных и временных закономерностей: от человеческого глаза до альбатроса. В Guastello S. Gregson R. Editors. Нелинейный динамический анализ для поведенческих наук с использованием реальных данных. Бока-Ратон: CRC Press, Taylor and Francis Group; 2011.
- 40.Кастрехон Пита-младший, Сармиенто Галан А., Кастрехон Пита А.А. и Кастрехон Гарсия Р. Фрактальное измерение в крыльях бабочек: новый подход к пониманию рисунка крыльев? Журнал математической биологии. 2005; 50: 584–594. pmid: 15614549
- 41. Тернер MJ, Blackledge JM и Andrews PR. Фрактальная геометрия в цифровых изображениях. Академическая пресса; 1998.
- 42.
Стангос Н. Концепции современного искусства: от фовизма до постмодернизма. Сингапур: Темза и Гудзон; 1994 г.
- 43. Рамка M, и Мандельброт BB. Фракталы, графика и математическое образование. Вашингтон: Математическая ассоциация Америки; 2002.
- 44. Тейлор Р.П., Миколич А.П. и Джонас Д. Фрактальный анализ картин Поллока. Природа. 1999; 442: 399.
- 45. Хант Г. Является ли он величайшим живым художником в Соединенных Штатах? Время. 08.08.1949; 45.
- 46. Ричард Р. Новая эстетика экологического сознания: теория хаоса, красота природы и наша более широкая гуманистическая идентичность.Журнал гуманистической психологии. 2001; 41: 59–95.
- 47. Конте Э, Тодарелло О., Мендолоччио Л., Корфиати Л., Майна А., Федеричи А. и др. Психофизическая модель чернильных пятен Роршаха с использованием фрактального анализа с оценкой обобщенной фрактальной размерности и функции фрактальной дисперсии. Буквы хаоса и сложности. 2008; 4; 1.
Что не так с Роршахом? Сан-Франциско: John Wiley & Sons; 2003.
Ежегодное собрание Vision Science 2016.
Фрактальные электроды для сопряжения нейронов с имплантатами сетчатки . Кандидатская диссертация. Юджин, Орегонский университет; 2014.
Д. и Макрейнольдс П. Достоверность числа ответов Роршаха. Журнал проективных методик. 1953: 17: 4, 493–494. pmid: 13118582
1990; 7: 1113–1123.
2016; 10: 1.
